Název:
Inhibice regenerace prýtů na explantátech petunie (Petunia x hybrida) in vitro způsobená fluoranthenem
Autoři:
Czyžová, Kateřina Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2014
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Cílem diplomové práce bylo studium vlivu fluoranthenu (FLT) na biochemické a růstové procesy regenerantů petunie (Petunia hybrida cv. Lady blue) z organogeneze in vitro. K tomuto experimentu byly použity segmenty střední části listů, prýty z organogeneze in vitro a vegetační vrcholy se čtyřmi až pěti pravými listy rostlin z udržované kultivace in vitro. Bylo sledováno zda fluoranthen ovlivní organogenezi prýtů in vitro, obsah chlorofylu a a b, obsah cytokininů a zakořenění jak prýtů (z organogeneze in vitro) tak vegetačních vrcholů z udržované kultivace in vitro. Bylo použito kultivační MS médium s obsahem benzyladeninu (1,5 mg/l), 1-naftyloctovou kyselinou (0,18 mg/l) a fluoranthenem (1mg/l) či bez fluoranthenu (kontrola). V případě organogeneze in vitro byl experiment proveden na 4 variantách médií s rozdílnou subkultivací na jiná média ve třech opakováních. Varianty médií byla zvolena tak, aby bylo možné zjistit, zda fluoranthen je schopen ovlivnit růstové a biochemické procesy již od začátku kultivace anebo zda je schopen narušit tyto procesy až v průběhu dané kultivace. Pro sledování zakořeňování bylo použito kultivační MS médium s obsahem kyseliny indolyl-3-máselné (0,5 mg/l) a fluoranthenu v různých koncentracích (0,1; 1; 3 a 5 mg/l). Z výsledků vyplynulo, že fluoranthen je schopen ovlivnit organogenezi prýtů vytvořených na segmentech listů. Došlo k nižší frekvenci organogeneze oproti kontrole. A dále bylo zjištěno, že fluoranthen větším podílem ovlivňuje regeneraci již při působení na začátku kultivace oproti pozdějšímu působení až v průběhu kultivace. Byl zjištěn nejvyšší příjem benzyladeninu a jeho ribosidu z kultivačního média. Fluoranthen ovlivnil obsah dihydrozeatinu výrazným způsobem. Zeatin a jeho ribosid byl zaznamenán v minimálním množství. FLT způsobil nižší obsah chlorofylů a i b v explantátech. V případě chlorofylu a nebyly zjištěny signifikantní rozdíly mezi variantami, kdy byl explantát ovlivněn fluoranthenem na začátku kultivace anebo až v průběhu kultivace. Bylo zaznamenáno, že fluoranthen ovlivňuje morfologii kořenů subkultivovaných prýtů z organogeneze in vitro a také kořenů vegetačních vrcholu s čtyřmi až pěti pravými listy. Kořeny rostlin v kultivačním médiu s vyšším obsahem fluoranthenu (3 a 5 mg/l) vykazovaly menší větvení kořenů a kořeny byly kratší.The aim of thesis was to study the effect of fluoranthene (FLT) on growth and biochemical processes of plant Petunia (Petunia hybrida cv. Lady blue) in in vitro conditions. In this experiment were used segments of the middle parts of the leaves, shoots from organogenesis in vitro and apical meristem of stem with four to five leaves from long-term in vitro culture. It was observed if fluoranthene influence organogenesis of shoots in vitro, contents of chlorophyll a and b, content of cytokinins and rating of shoots (from organogenesis in vitro) and apical meristem of stem with four to five leaves. It was used culture MS medium containing benzylaminopurin (1.5 mg/l), 1-naphtylacetic acid (0.18 mg/l) and fluoranthene (1 mg/l) or without fluoranthene (control). In the case of organogenesis in vitro, the experiment was performed at 4 different variations of media with subculturing to other media in triplicate. Variations of the media were chosen to allow period of cultivation with fluoranthene, which affects growth and biochemical processes. MS medium containing indol-3-butyric acid (0.5 mg/l) and FLT in different concentrations (0.1, 1, 3 a 5 mg/l) was used for monitoring rooting. The results showed that fluoranthen is able to affect organogenesis of shoots formed on the segments of leaves. There was lower frequency compared to the control organogenesis. It was found that fluoranthene more affects beginning of cultivation compared to later exposure of fluoranthene during cultivation. It was found the highest uptake of benzyladenine and its riboside from the culture medium. Fluoranthene affected significantly content of dihydrozeatin. Zeatin and its riboside were recorded in a minimal amount. Fluoranthene caused lower content of chlorophylls a and b in explantats. In the case of chlorophyll a were no significant differences between influence by fluoranthene at the beginning of the cultivation or during of cultivation. It was noted that fluoranthene influence the morphology of the roots subcultured shoots from organogenesis in vitro. Plant roots exhibited less branching and roots were shorter in culture medium containing higher content of fluoranthene (3 and 5 mg/l).
Klíčová slova:
chlorofyl a a b; cytokininy; fluoranthen; organogeneze in vitro; zakořeňování
host ::
