Název: Různé metodické přístupy za účelem snížení exprese podjednotek komplexu I u hmyzích forem \kur{Trypanosoma brucei}
Autoři: HEROUTOVÁ, Barbora
Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok: 2022
Jazyk: cze
Abstrakt: [cze] [eng]
Komplex I (NADH ubichinon oxidoreduktáza) je největší proteinový komplex elektronového transportního řetězce v mitochondrii, ale jeho aktivita není pro T. brucei esenciální. Aplikovali jsme několik genetických metod k vytvoření buněčných linií T. brucei bez komplexu I. Metodické přístupy zahrnovaly i) RNAi pojednotky NDUFA6, ii) knock-out NDUFA6 pomocí CRISPR/Cas9, iii) knock-out podjednotky NUBM pomocí homologní rekombinace. Vytvořené nástroje umožní odhalení role komplexu I v jiných stádiích parazita T. brucei. Complex I (NADH:ubiquinone dehydrogenase) is the largest protein complex of the mitochondrial electron transport chain, but its presence and activity are not essential for the growth of two life cycle stages of Trypanosoma brucei. Here, we implemented various genetic methods to generate T. brucei cell lines that will lack or will have decreased levels of this complex. The methodological approaches included i) RNA interference of NDUFA6, a subunit predicted to be essential for the structural integrity, and of NUBM, a subunit essential for the complex I activity; ii) generation of double knock-out of NDUFA6 using CRISPR/Cas9; iii) generation of double knock-out of NUBM using homology replacement. These generated tools will help us to elucidate if this highly conserved complex is essential for other life cycle stages of this medically important parasite
Klíčová slova: hmyzí stádium; knock-out; komplex I; NADH ubichinon oxidoreduktáza; RNAi; trypanosoma brucei; complex I; knock-out; NADH-ubiquinone oxidoreductase; procyclics; RNAi; trypanosoma brucei
Citace: HEROUTOVÁ, Barbora. Různé metodické přístupy za účelem snížení exprese podjednotek komplexu I u hmyzích forem \kur{Trypanosoma brucei}. České Budějovice, 2022. diplomová práce (Mgr.). JIHOČESKÁ UNIVERZITA V ČESKÝCH BUDĚJOVICÍCH. Přírodovědecká fakulta

Instituce: Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Plný text je dostupný v digitálním repozitáři JČU.
Původní záznam: http://www.jcu.cz/vskp/60128

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-515971


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích
Vysokoškolské kvalifikační práce > Diplomové práce