Original title:
Vývoj čipu pro separaci biologických agens pomocí izoelektrické fokusace v rozbíhavém toku
Translated title:
Development of divergent-flow isoelectric focusing chip for separation of biological agents
Authors:
Duša, Filip ; Šalplachta, Jiří ; Horká, Marie ; Lunerová, K. ; Rosenbergová, K. ; Kubíček, O. Document type: Papers Conference/Event: HAZMAT PROTECT 2022. Odborná konference o ochraně proti CBRN látkám /4./, Kamenná (CZ), 20220914
Year:
2022
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Izoelektrická fokusace (IEF) je účinnou metodou schopnou separovat jednotlivé druhy bakterií. IEF v rozbíhavém toku (DF-IEF) umožnuje kontinuálně separovat větší objem vzorku a separované analyty jímat do frakcí k pozdější analýze. Těchto vlastností bylo využito při vývoji DF-IEF čipu pro separaci biologických agens (B-agens) inaktivovaných parami H2O2. Čip byl navržen pro separaci ve vertikální poloze, která zabránila sedimentaci běžně se vyskytující u bakteriálních vzorků a znemožňující účinnou separaci. Po optimalizaci separační metody za využití barevných markerů izoelektrického bodu byla provedena separace čtyř druhů B-agens. Všechny získané frakce byly dále analyzovány pomocí hmotnostní spektrometrie s matricí asistovanou laserovou desorpcí/ionizací (MALDI-MS). Hmotnostní spektra prokázala účinnost vyvinutého DF-IEF čipu pro separaci inaktivovaných b-agens.Isoelectric focusing (IEF) is an efficient method for separation of different bacterium species. Divergent flow format of IEF (DF-IEF) enables continual separation of large volumes of samples and fractionation of the separated analytes for later analysis. The mentioned properties enabled development of DF-IEF chip for separation of H2O2 inactivated biological agents (B-agents). The chip was designed to perform separation in vertical alignment which solved issues connected with sedimentation of bacterial cells. The separation method was optimized using colored markers of isoelectric point and four different b-agents were separated using the DF-IEF chip. The obtained fractions were subsequently analyzed with matrix assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI-MS). The mass spectra proved that the developed DF-IEF chip is an effective tool for separation of inactivated B-agents.
Keywords:
B-agents; chip; isoelectric focusing Project no.: VI04000062 (CEP), VI20172020069 (CEP) Funding provider: GA MV, GA MV Host item entry: Sborník abstraktů z 4. ročníku odborné konference Hazmat Protect 2022, ISBN 978-80-11-01902-0 Note: Související webová stránka: https://hazmat-protect.sujchbo.cz
Institution: Institute of Analytical Chemistry AS ČR
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the digital repository of the Academy of Sciences. Original record: https://hdl.handle.net/11104/0334025