Original title: Stanovení isoenzymů cytochromu P450 pomocí UHPLC-MS/MS v modifikovaných buněčných liniích C3A, CACO2 a v lidských jaterních mikrosomech
Translated title: UHPLC-MS/MS absolute quantification of cytochrome P450 enzymes in C3A, CACO2 modified cell lines and in human liver microsomes
Authors: Rejšková, Lenka ; Szotáková, Barbora (advisor) ; Vokřál, Ivan (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2015
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Univerzita Východního Finska v Kuopiu, Škola Farmacie Katedra farmaceutické chemie Kandidát: Lenka Rejšková Školitel: doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: Prof. Seppo Auriola Název diplomové práce: Stanovení isoenzymů cytochromu P450 pomocí UHPLC-MS/MS v modifikovaných buněčných liniích C3A, CACO2 a v lidských jaterních mikrosomech Isoenzymy cytochromu P450 (CYP) hrají podstatnou roli v metabolismu léčiv. Mohou být zodpovědné za selhání terapie, vedlejší nebo toxické účinky a za interakce léčiv. Modifikované C3A a CACO2 buněčné linie s exprimovaným konstitutivním androstanovým receptorem (CAR) a pregnanovým X receptorem (PXR) by mohly být použity pro in vitro biotransformační a absorpční studie místo klasických primárních buněčných linií. Isoenzymy CYP by v těchto liniích měly být neustále exprimovány. Tato studie je zaměřena na vytvoření kvantitativní metody pro stanovení nejběžnějších isoenzymů CYP u člověka: CYP1A2, CYP2B6, CYP2C9, CYP2C19, CYP2E1, CYP3A5 a CYP3A4 v uvedených buněčných liniích a v lidských jaterních mikrosomech. Absolutní kvantitativní stanovení isoenzymů CYP bylo provedeno na UHPLC přístroji spojeném s tandemovým hmotnostním detektorem pracujícím v dynamickém MRM módu.... Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences University of Eastern Finland in Kuopio, School of Pharmacy Department of Pharmaceutical Chemistry Candidate: Lenka Rejšková Supervisor: doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Consultant: Prof. Seppo Auriola Title of Diploma thesis: UHPLC-MS/MS absolute quantification of cytochrome P450 enzymes in C3A, CACO2 modified cell lines and in human liver microsomes Cytochrome P450 (CYP) enzymes play a crucial role in drug metabolism. They can be responsible for the failure of treatment, adverse and toxic effects or drug-drug interactions. Modified C3A and CACO2 cell lines with constitutive androstane receptor (CAR) and pregnane X receptor (PXR) might be used for in vitro biotransformation and absorption studies instead of primary cell lines. CYP enzymes should be expressed continuously in these modified cell lines. This study aimed to establish the quantitative method for the analysis of the most common CYP enzymes in human: CYP1A2, CYP2B6, CYP2C9, CYP2C19, CYP2E1, CYP3A5 and CYP3A4 in the above mentioned cell lines and in human liver microsomes. Absolute quantifications of CYP enzymes were carried out by UHPLC in line coupled with tandem mass spectrometry working in scheduled MRM mode. Data assessment was...

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/68406

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-479724


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses