Název:
Účinky analogů peptidu uvolňujícího prolaktin (PrRP) a neuropeptidu FF (NPFF) in vitro a in vivo
Překlad názvu:
Effects of PrRP (prolactin-releasing peptide) and NPFF (neuropeptide FF) analogs in vitro and in vivo
Autoři:
Tichá, Anežka ; Ryšlavá, Helena (vedoucí práce) ; Železná, Blanka (oponent) Typ dokumentu: Bakalářské práce
Rok:
2012
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Peptid uvolňující prolaktin (PrRP) a neuropeptid FF (NPFF) patří do skupiny RF-amidů. Tyto peptidy se vyznačují stejnými C-koncovými aminokyselinovými sekvencemi (R-F-NH2) a podobnými biologickými aktivitami. PrRP byl objeven jako endogenní ligand sirotčího receptoru GPR10, který byl schopný vyvolat uvolňování prolaktinu in vitro a in vivo, avšak brzy bylo zjištěno, že to není primární funkcí tohoto peptidu. Jelikož se PrRP a GPR10 nachází v částech mozku, které jsou zodpovědné za regulaci příjmu potravy a protože se u myší s vyřazeným genem pro GPR10 nebo PrRP objevuje hyperfagie a obezita, je PrRP pokládán za anorexigenní peptid. V této studii byl zkoumán vztah mezi PrRP a NPFF ve vazebných testech a spouštění buněčné signalizace MAPK/ERK1/2 in vitro a in vivo v testu příjmu potravy a analgetickém testu na myších. V in vitro experimentech bylo prokázáno, že PrRP se váže k potkaní hypofyzární buněčné linii RC-4B/C, která obsahuje GPR10 receptor, s velkou afinitou. Oproti tomu NPFF, jeho stabilní analog 1DMe a antagonista RF9 se k receptoru GPR10 nevázaly až do koncentrace 10-5 M. NPFF, 1DMe a PrRP se vázaly na membrány buněk CHO-K1 s transfektovaným lidským NPFF2 receptorem s vysokou afinitou, avšak RF9 se vázal s afinitou nízkou, řádově 10-7 M, oproti tvrzením publikovaným v literatuře. In vivo...Prolactin-releasing peptide (PrRP) and neuropeptide FF (NPFF) belong to the RF-amide family. These peptides have identical C-terminal amino acid sequence (R-F-NH2) and similar biological activities. PrRP was identified as an endogenous ligand of an orphan receptor GPR10 able to stimulate PRL-secretion in vitro and in vivo, but soon it was discoverd that this is not the primary function of this peptide. PrRP is thought to be an anorexigenic peptide as PrRP and GPR10 are found in several parts of the brain responsible for food intake regulation and because both GPR10 and PrRP deficient mice suffer from hyperphagia and late-onset obesity. In this study, relationship between PrRP and NPFF was studied using both in vitro binding and sell signaling and in vivo food intake and analgesia test in mice. In vitro experiments showed that PrRP bound to rat pituitary RC-4B/C cells containing GPR10 receptor with high affinity and NPFF, its stable analog 1DMe and its antagonist RF9 up to 10-5 M concentration did not bind to GPR10. NPFF, 1DMe and PrRP were bound to cell membranes with transfected NPFF2 receptor with high affinity, but RF9 with low affinity in a range of 10-7 M, in contrast to published literature. In vivo experiments with fasted mice confirmed that centrally injected PrRP and NPFF significantly...
Klíčová slova:
antagonista RF9; neuropeptid FF; peptid uvolňující prolaktin; příjem potravy; antagonist RF9; food intake; neuropeptide FF; prolactin-releasing peptide