Original title:
Příprava transgenní kultury testikulárních kmenových buněk Xenopus tropicalis.
Translated title:
Preparation of Xenopus tropicalis transgenic testicular stem cell culture.
Authors:
Vegrichtová, Markéta ; Tlapáková, Tereza (advisor) ; Drobná Krejčí, Eliška (referee) Document type: Master’s theses
Year:
2014
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Testikulární kmenové buňky (TSCs) představují relativně dostupný zdroj potencionálně pluripotentních buněk, které jsou významné zejména pro své uplatnění v regenerativní medicíně. Pro studium migračního a diferenciačního potenciálu kmenových buněk je vhodným modelovým organismem Xenopus tropicalis. Tento obojživelník se vyznačuje vnějším oplozením a embryonálním vývojem značného množství zárodků v rámci jedné snůšky. Oocyty a embrya jsou dostatečně velká (kolem 1 mm) a tím i vhodná pro mikromanipulační zásahy. Laboratoř vývojové biologie PřF UK uspěla v založení smíšené buněčné kultury TSCs rostoucích na podkladové vrstvě pre-Sertoliho buněk. Tato kultura byla odvozena z varlat juvenilního samce X. tropicalis. V rámci studia jejich diferenciačního potenciálu bylo zjištěno, že rozhodujícím faktorem umožňujícím rychlou proliferaci kmenových buněk a jejich formování do charakteristických kolonií je leukemický inhibiční faktor (LIF). Tento protein je produkován oběma typy buněk přítomných v kultuře. Stejný pozitivní vliv na proliferační potenciál kmenových buněk má i myší LIF, což ukazuje na evoluční konzervovanost metabolických drah souvisejících s udržením kmenového charakteru. RT-PCR analýza dále odhalila téměř identický expresní profil u TSCs a podkladových pre-Sertoliho buněk. Na základě těchto...Testicular stem cells (TSCs) are relatively accessible potential source of pluripotent cells, which are particularly important for their application in regenerative medicine. Xenopus tropicalis is a useful model organism to study the migration and differentiation potential of stem cells. This amphibian is characteristic by outer fecundation and embryonic development of a great amount of embryos after fertilization. Oocytes and embryos are large enough (about 1 mm) to be suitable for micromanipulation micromanipulations. Laboratory of Developmental Biology, Faculty of Science, Charles University in Prague succeeded in the establishment of a mixed cell culture of TSCs growing on feeder layer of pre- Sertoli cells. This culture was derived from the testes of juvenile Xenopus tropicalis male. In the study of their differentiation potential it was found, that leukemia inhibitory factor (LIF) is the decisive factor allowing rapid proliferation of stem cells and their forming into characteristic colonies. This protein is produced by both types of cells which are present in the culture. The mouse LIF has the same positive effect on the proliferative potential of stem cells, which points at the evolutionary conservation of metabolic pathways associated with the maintenance of the stemness. RT-PCR analysis...
Keywords:
differentiation; expression profile; LIF; Testicular stem cells; transfection; Xenopus tropicalis; diferenciace; expresní profil; LIF; Testikulární kmenové buňky; transfekce; Xenopus tropicalis
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/68512