Original title:
Evoluční inženýrství cyanobakterií v kontextu akumulace PHA
Translated title:
Evolutionary engineering of cyanobacteria with respect to PHA accumulation
Authors:
Vašířová, Kristýna ; Slaninová, Eva (referee) ; Samek, Ota (advisor) Document type: Master’s theses
Year:
2021
Language:
cze Publisher:
Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická Abstract:
[cze][eng]
Cílem této diplomové práce bylo podrobit vybrané cyanobakteriální kmeny adaptivní evoluci a následně prozkoumat vlastnosti vzniklých adaptovaných kmenů, obzvlášť jejich změny týkající se akumulace polyhydroxyalkanoátů (PHA). Teoretická část práce blíže charakterizuje problematiku cyanobakterií, PHA a jejich vzájemné propojení v oblasti evolučního inženýrství. Pro evoluční experimenty byly použity cyanobakteriální kmeny Synechocystis sp. PCC 6803 a Synechocystis salina CCALA 192. Na vybrané zástupce byly vyvíjeny selekční tlaky působením peroxidu vodíku a mědi. Vzniklé kultury a jejich schopnost akumulace PHA byly následně posouzeny metodou plynové chromatografie. Oba tyto zvolené selekční tlaky se ukázaly jako nevhodné, jelikož po jejich aplikaci na kultury byla pozorována vysoká inhibice růstu neumožňující aplikace metod evolučního inženýrství. V druhé půlce experimentální části byly sledovány poskytnuté adaptované kmeny na 6% NaCl. Prokázalo se, že adaptace má na mikroorganismy pozitivní vliv, jelikož vykazovaly lepší růst biomasy, vyšší odolnost při odolávání stresovým podmínkám a bylo pozorováno nepatrné navýšení akumulace PHA.
The aim of this diploma thesis was to subject selected cyanobacterial strains to adaptive evolution and subsequently investigate the properties of the resulting adapted strains, especially their changes related to polyhydroxyalkanoates (PHA) accumulation. The theoretical part of the work describes in more detail the issue of cyanobacteria, PHA and their interconnection in the field of evolutionary engineering. Cyanobacterial strains Synechocystis sp 6803 and. Synechocystis salina CCALA 192 were used for evolutionary experiments. Selection pressures of hydrogen peroxide and copper. were applied to selected representatives. The resulting cultures and their ability to accumulate PHA were subsequently assessed by gas chromatography. Both of these selection pressures proved to be unsuitable, as strong growth inhibition was observed after their application to cultures, which did not allow the application of evolutionary engineering methods. In the second half of the experimental part, the provided adapted strains to 6% NaCl were monitored. Adaptation has been shown to have a positive effect on microorganisms, as they have a higher biomass content, better stress resistance and a slight increase in PHA accumulation.
Keywords:
adaptation; Cyanobacteria; evolutionary engineering; flow cytometry; polyhydroxyalkanoates (PHA); Synechocystis salina CCALA 192; Synechocystis sp. PCC 6803; adaptace; Cyanobakterie; evoluční inženýrství; polyhydroxyalkanoáty (PHA); průtoková cytometrie; Synechocystis salina CCALA 192; Synechocystis sp. PCC 6803
Institution: Brno University of Technology
(web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library. Original record: http://hdl.handle.net/11012/201384