Original title:
Biochemická charakterizace modelového zástupce hemových senzorových proteinů
Translated title:
Biochemical characterization of a model heme sensor protein
Authors:
Tajovská, Eva ; Martínková, Markéta (advisor) ; Jeřábek, Petr (referee) Document type: Bachelor's theses
Year:
2020
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Hemoproteiny plní v živém organismu mnoho důležitých rolí. Jednou takovou úlohou je senzorová funkce. Senzorové proteiny, které detekují hem, jsou schopny rozpoznat měnící se koncentraci hemu v daném organismu. Jako signální molekula v případě těchto proteinů slouží samotný hem. Senzorové proteiny, které detekují změny v koncentraci plynů, využívají jako signální molekulu právě biatomickou molekulu plynu. K zahájení přenosu signálu v případě těchto senzorových proteinů dochází po navázání molekuly plynu na molekulu hemu, která je pevně navázána k senzorové doméně proteinu. Oba typy signalizace regulují řadu fyziologických procesů prokaryotických i eukaryotických organismů. V teoretické části této bakalářské práce je uveden souhrn dosavadních poznatků vědeckých studií, které se zabývají hemovými senzorovými proteiny. Experimentální část této práce se zabývá vlastnostmi konkrétního modelového senzorového hemoproteinu. Jedná se o hemoprotein EcDOS, který detekuje kyslík. Dále se tato práce věnuje zkrácené formě tohoto proteinu, izolované senzorové doméně s PAS strukturou (EcDOS-PAS). Úkolem experimentální části této práce bylo oba zmíněné proteiny exprimovat a izolovat z buněk E. coli BL-21 (DE3). Nakonec byly proteiny EcDOS i EcDOS-PAS předběžně charakterizovány a byly porovnány jejich vlastnosti....Hemoproteins play a lot of important roles within the living organism. One of these being the sensor function - heme sensor proteins are able to detect the changing concentration of heme in organisms. Heme itself serves as a signalling molecule for these proteins. Heme-based gas sensor proteins use a biatomic gas molecule as a signalling molecule. Signal transduction begins once the gas molecule is bound to the heme molecule which is already tightly bound in the protein sensing domain. Both these types of signalling regulate a number of physiological processes in the prokaryotic and eukaryotic organisms. The theoretical part of the bachelor thesis summarizes recent scientific studies on heme sensor proteins, while the experimental part focuses on the properties of a specific model sensor hemoprotein. A direct oxygen sensor from E. coli (EcDOS) was selected as a model protein. Furthermore, the thesis deals with a truncated form of the EcDOS protein, an isolated sensor domain with a PAS structure (EcDOS-PAS). The experimental part aimed at expressing and isolating of both mentioned proteins from E. coli BL-21 (DE3) cells. Finally, both the EcDOS and EcDOS-PAS proteins were preliminarily characterised and their properties compared. The yield of the EcDOS-PAS was several times higher than the yield of...
Keywords:
heme; heme sensor proteins; oxygen sensors; signal transduction; hem; hemové senzorové proteiny; kyslíkový senzor; přenos signálu
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/120046