Original title:
Vývoj antibakteriálních protilátek pro pacienty s cystickou fibrosou
Translated title:
Development of antibacterial antibodies for cystic fibrosis patients
Authors:
Vašková, Michaela ; Hodek, Petr (advisor) ; Nosková, Libuše (referee) Document type: Master’s theses
Year:
2019
Language:
cze Abstract:
[cze][eng] Autozomálně recesivní onemocnění cystická fibrosa (CF) způsobené mutacemi genu CFTR ("cystic fibrosis transmembrane conductance regulator") vede k absenci či defektům CFTR proteinu s funkcí chloridového kanálu. Pro toto onemocnění je typická zejména náchylnost k bakteriálním infekcím dýchacího ústrojí z důvodu hromadění zahuštěného hlenu a pozměněné glykosylace v plicích. Tyto infekce nejčastěji způsobuje bakterie Pseudomonas aeruginosa (PA), k jejíž patogenitě přispívá i lektin PA-IIL. Tento lektin má vysokou afinitu k L-fukose a patří mezi adhesiny PA. Tato práce je zaměřena na studium vlivu anti-PA-IIL protilátek izolovaných z vaječných žloutků a multivalentních inhibitorů PA-IIL na bázi fukosy na adherenci PA k buňkám plicního epitelu. Protilátky byly izolovány z vaječných žloutků slepice před a po imunizaci lektinem PA-IIL. Specifické anti-PA-IIL protilátky byly získány afinitní chromatografií na koloně s imobilizovaným PA-IIL. Metodou ELISA byla ověřena schopnost těchto protilátek rozpoznat PA-IIL. Přítomnost PA-IIL v bakteriální kultuře Pseudomonas aeruginosa (PAK, ST 1763) a schopnost protilátek rozpoznat tento bakteriální lektin byla ověřena pomocí metody Western blot s následnou imunodetekcí. Byly též zjištěny vhodné podmínky kultivace pro expresi tohoto lektinu. Vliv protilátek na adhezi...Cystic fibrosis (CF) is an autosomal recessive disease caused by mutations in the CFTR gene (CF transmembrane conductance regulator). These mutations result in absent or defective CFTR chloride channel function. The susceptibility to bacterial respiratory infections due to the accumulation of thickened mucus and altered glycosylation in lungs is typical for this disease. Bacteria Pseudomonas aeruginosa (PA) is a major cause of these infections. Among other virulent factors, the pathogenicity of these bacteria is caused by fucose-specific PA-IIL lectin which plays a role as an adhesin. The effect of anti-PA-IIL egg yolk antibodies and multivalent fucose-based PA-IIL inhibitors on PA adherence to lung epithelial cells was studied in this work. Chicken antibodies were isolated from egg yolks before and after immunization with antigen PA-IIL. Specific anti-PA-IIL antibodies were obtained by affinity chromatography using a column with an immobilized PA-IIL. Reactivity of IgY was verified by ELISA. The presence of PA-IIL in the bacterial culture of Pseudomonas aeruginosa (PAK, ST 1763) and the ability of antibodies to recognize this bacterial lectin were verified by Western blotting followed by immunodetection. Appropriate culture conditions have also been found for the expression of this lectin. The...
Keywords:
cystic fibrosis; IgY; multivalent inhibitors; Pseudomonas aeruginosa; cystická fibrosa; IgY; multivalentní inhibitory; Pseudomonas aeruginosa
Institution: Charles University Faculties (theses)
(web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository. Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/106378