Název:
Rekombinantní příprava transkripčního faktoru TEAD.
Překlad názvu:
Recombinant preparation of TEAD transcription factor.
Autoři:
Lišková, Růžena ; Novák, Petr (vedoucí práce) ; Staněk, Ondřej (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2016
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Rekombinantní příprava transkripčního faktoru TEAD (abstrakt) Transkripční faktory z TEAD rodiny hrají v organismu důležitou roli během jeho vývoje, kdy aktivují expresi proteinů ovlivňujících růst a diferenciaci buněk a také proteinů bránících apoptose, čímž regulují velikost orgánů. Aktivita TEAD proteinů je regulována prostřednictvím signálních drah a interakcí s koaktivátory a porucha těchto regulačních mechanismů může způsobit vznik nádorových onemocnění. Z toho důvodu jsou TEAD proteiny zajímavým cílem pro vývoj nových protirakovinných léčiv založených na inhibici jejich aktivity. Jednou z možností, jak inhibovat aktivitu transkripčního faktoru, je zabránit jeho vazbě na DNA. Pro navržení nového léčiva bránícího vazbě transkripčního faktoru na DNA je nejprve potřeba přesně znát strukturní podstatu interakce těchto dvou molekul. V této práci byla připravena DNA vazebná doména lidského proteinu TEAD1 postupem rekombinantní exprese v bakterii E. coli. Byly nalezeny vhodné podmínky produkce a připravovaný protein byl purifikován do dostatečné čistoty pro strukturní analýzu jeho interakcí s DNA.Recombinant preparation of TEAD transcription factor (abstract) The TEAD family transcription factors play an important role during devolopment of organisms, where their main purpose is to regulate organ size by activating expression of proteins involved in cell growth and differentiation and apoptosis inhibition. TEAD proteins activity is regulated by signalling pathways and interactions with coactivators. Disregulation of these mechanisms can lead to development of tumors, which is the reason why TEAD proteins became an interesting target for development of new anticancer drugs based on inhibiting their activity. There are several possibilities how to inhibit activity of a transcription factor including blocking its bond to DNA. To design a new drug that blocks transcription factors binding to DNA the structural basis of interaction of these two molecules has to be known first. In this thesis the DNA binding domain of human protein TEAD1 was prepared using the technique of recombinant expression in bacteria E. coli. Suitable conditions of protein production were found and the DNA binding domain of TEAD1 protein was purified so it will be possible to use it for structural analysis of its intraction with DNA.
Klíčová slova:
DNA vázající protein; purifikace proteinu; rekombinantní exprese; TEAD1; Transkripční faktor; DNA binding protein; protein purification; recombinant expression; TEAD1; Transcription factor