Original title: Kolorimetrická metoda založená na imobilizované acetylcholinesterase pro stanovení účinnosti inhibitorů používaných v terapii
Translated title: Colorimetric assay based on immobilized acetylcholinesterase for the determination of efficiency of inhibitors used in pharmacotherapy
Authors: Drobík, Oto ; Opletalová, Veronika (advisor) ; Holas, Ondřej (referee)
Document type: Rigorous theses
Year: 2014
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické chemie a kontroly léčiv Kandidát Mgr. Oto Drobík Konzultant doc. RNDr. Veronika Opletalová, Ph.D. Název rigorózní práce Kolorimetrická metoda založená na imobilizované acetylcholinesterase pro stanovení účinnosti inhibitorů používaných v terapii. Mezi inhibitory acetylcholinesterasy (AChE) patří velké množství látek, které se využívají v zemědělství například jako insekticidy nebo pesticidy. Používají se také jako nervově paralytické látky pro vojenské účely. Některé našly využití i v léčbě nemocí jako je myastenia gravis nebo Alzheimerova nemoc. V rámci rigorózní práce byla úspěšně imobilizována AChE za pomocí želatiny na dno 96 jamkové destičky. Pomocí kolorimetrické metody byly optimalizovány reakční podmínky, byla testována i odolnost imobilizované AChE vůči vymytí. Dále byla zjištěna míra inhibice AChE rozpouštědly a byly vyhodnoceny kinetické parametry enzymové reakce. Jako zástupci inhibitorů AChE byly testovány vzorky takrinu a pyridostigminu. Dále se provedl dlouhodobější test stability imobilizované AChE. Dosažené výsledky ukazují, že popsaná metoda je vhodná pro rutinní sledování účinnosti inhibitorů cholinesteras. Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmaceutical Analysis Candidate Mgr. Oto Drobík Consultant Assoc. Prof. Veronika Opletalová, Ph.D. Title of Thesis Colorimetric assay based on immobilized acetylcholinesterase for the determination of efficiency of inhibitors used in pharmacotherapy. There is a large number of substances belonging to acetylcholinesterase (AChE) inhibitors that are used in agriculture, for example as insecticides or pesticides. They are also used as nerve paralytic agents for military purposes. Some of them have been applied in treatment of diseases such as myasthenia gravis or Alzheimer's disease. Within the thesis, AChE was successfully immobilized on the bottom of a 96 well microplate, using gelatine. By means of a colorimetric method, the reaction conditions were optimized; the resistance of the immobilized AChE against the washout was also tested. Furthermore, an inhibition rate of AChE by solvents was determined and kinetic parameters of an enzymatic reaction were evaluated. Tacrine and pyridostigmine were tested as representatives of AChE inhibitors. A long-term stability test of the immobilized AChE was further performed. The results that have been achieved indicate that the method described is...

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/66475

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-335610


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Rigorous theses