Original title: Fenotypická charakterizace zdravé lidské rohovky a její změny při zadní polymorfní dystrofií rohovky
Translated title: Phenotypical characterization of the healthy human cornea and the alterations caused by posterior polymorphous corneal dystrophy
Authors: Reinštein Merjavá, Stanislava ; Jirsová, Kateřina (advisor) ; Martínek, Jindřich (referee) ; Čejková, Jitka (referee)
Document type: Doctoral theses
Year: 2011
Language: eng
Abstract: [eng] [cze]
Purpose: The aim of this work was to characterize the healthy human cornea and the cornea of patients suffering from posterior polymorphous corneal dystrophy (PPCD) using different antibodies. Despite the fact that PPCD is a very rare disorder, one of the largest groups of PPCD patients in the world comes from the Czech Republic. This offers us the opportunity to investigate the changes on the clinical, cellular and molecular levels. Material and Methods: A collection of 25 control corneas as well as 16 pathological corneas from PPCD patients were used. Epithelial (cytokeratins) and mesothelial markers (mesothelin, calbindin 2, HBME-1 protein) were detected in all layers of the healthy corneas using immunocyto- and immunohistochemistry. The expression of all markers was confirmed using molecular methods as well (RT-PCR and Western blot). Changes in the expression of cytokeratins and changes in the extracellular matrix structure (collagen IV and VIII) were studied in the PPCD corneas. Combined fluorescent immunohistochemistry with fluorescence in situ hybridization were used in order to characterize the origin of abnormal cells on the posterior graft surface, which cause the recurrence of the PPCD after penetrating keratoplasty surgery. Results: Changes in the cytokeratin expression (strong... Cíle: Cílem práce bylo charakterizovat pomocí vybraných protilátek zdravou lidskou rohovku a rohovku od pacientů se zadní polymorfní dystrofií rohovky (ZPDR). I když je toto onemocnění považováno za ojedinělé, v České republice se nachází jeden z největších souborů pacientů s tímto postižením. To velmi dobře umožnilo sledovat změny na úrovni klinické, buněčné i molekulární. Materiál a metody: K experimentům byl použit soubor 25ti kontrolních rohovek a soubor rohovek od 16ti pacientů se ZPDR. Imunocyto- a imunohistochemicky byly detekovány epiteliální (cytokeratiny) a mezoteliální márkry (mesothelin, kalbindin 2 a protein HBME-1) ve všech vrstvách kontrolních rohovek. Výskyt jednotlivých márkrů byl potvrzen i molekulárními metodami (RT-PCR a Western blot). U rohovek se ZPDR byly sledovány změny v expresi cytokeratinů a ve složení extracelulární matrix (kolagenu IV a VIII). Pro objasnění původu abnormálních endotelových buněk u pacientů se ZPDR po transplantaci rohovky, které způsobují relaps onemocnění, byly současně použity dva metodické postupy; nepřímá fluorescenční imunohistochemie a fluorescenční in situ hybridizace. Výsledky: V rohovkách pacientů se ZPDR byly charakterizovány změny na úrovni exprese cytokeratinů v abnormálním endotelu (silná pozitivita pro cytokeratiny 7, 19, 8 a 18, slabší...
Keywords: collagen; cornea; cytokeratin; endothelium; epithelium; posterior polymorphous corneal dystrophy; cytokeratin; endotel; epitel; kolagen; rohovka; zadní polymorfní dystrofie rohovky

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/47094

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-311376


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Doctoral theses