Název:
Genetický polymorfismus v HFE genu v české populaci
Překlad názvu:
Genetic polymorphism in the HFE gene in the Czech population
Autoři:
Červinková, Barbora ; Beránek, Martin (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2012
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Barbora Červinková Školitel: Doc. PharmDr. Martin Beránek, Ph.D. Název diplomové práce: Genetický polymorfismus v HFE genu v české populaci. Cíl práce: Cílem diplomové práce bylo zmapovat výskyt třech mutací v HFE genu (C282Y, H63D, S65C) u české populace. A následně porovnat získané výsledky s hodnotami hlášenými ze světa. Metody: Práce zahrnovala izolaci DNA ze stěrů bukální sliznice od 167 dárců (65 mužů, 102 žen; věkový průměr mužů byl 31 a žen 28). Získaná DNA byla následně zmnožena prostřednictvím metody PCR za použití primerů 5'-CAG ATC CTC ATC TCA CTG- 3' a 5'-CTG GAT AAC CTT GGC TGT ACC CCC - 3' pro C282Y mutaci, 5'-GCC ACA TCT GGC TTG AAA TT-3' a 5'-ACA TGG TTA AGG CCT GTT GC GCC ACA-3' primerů pro H63D a S65C mutace. Pomocí restrikčního enzymu Rsa I pro C282Y, Bcl I pro H63D, Hinf I pro S65C byl řetězec DNA rozštěpen a získané fragmenty byly odseparovány na 2 % agarózovém gelu metodou gelové elektroforézy. Výsledky: Mutace C282Y byla detekována u 0 (0 %) vzorků jako homozygot, u 3 (1,80 %) vzorků jako složený heterozygot s H63D, u 0 (0 %) vzorků jako složený heterozygot s S65C a u 19 (11,38 %) vzorků, jako samostatná mutace v kombinaci se zdravou alelou. Mutace H63D byla detekována u...Charles University in Prague Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Biochemical Sciences Candidate: Bc. Barbora Červinková Supervisor: Doc. PharmDr. Martin Beránek, Ph.D. Title of diploma work: Genetic polymorphism of the HFE gene in Czech population Outline: The main objective of the thesis was to map the incidence of the three mutations (C282Y, H63D, S65C) in the HFE gene in the Czech population. Consequently, the obtained results were compared with the reported occurrence in the world. Methods: The work involved the isolation of DNA from buccal swabs obtained from 167 donors (65 men, 102 women; average age for men was 31, for women 28). Isolated DNA strings were amplified by PCR methods using 5'-CAG ATC CTC ATC TCA CTG-3' and 5'-CTG GAT AAC CTT GGC TGT ACC CCC-3' primers for C282Y mutation, 5'-GCC ACA TCT GGC TTG AAA TT-3' and 5'-ACA TGG TTA AGG CCT GTT GC GCC ACA- 3' primers for H63D and S65C mutations. DNA samples were treated with restriction enzymes Rsa I, Bcl I and Hinf I, for C282Y, H63D and S65C mutations, respectively. Finally, the restriction fragments were separated by gel electrophoresis (2 % agarose gel). Results: C282Y mutation was present in 0 (0 %) and 19 (11,38 %) samples as homozygote or heterozygote, respectively. Moreover, C282Y mutation was present in 3 (1,80 %)...
host ::
