Název: Prolyl endopeptidasa z krevničky Schistosoma mansoni
Překlad názvu: Prolyl endopeptidase of the blood fluke Schistosoma mansoni
Autoři: Fajtová, Pavla ; Konvalinka, Jan (vedoucí práce) ; Ryšlavá, Helena (oponent)
Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok: 2011
Jazyk: cze
Abstrakt: [cze] [eng]
Prolyl endopeptidasa SmPEP z krevničky střevní (S. mansoni) nebyla dosud studována. Tento enzym je zajímavý z pohledu vyhledávání nových molekulárních cílů pro léčbu schistosomózy. SmPEP byla detekována v extraktu z dospělých červů krevničky střevní pomocí enzymové aktivity a imunoreaktivity Aktivní forma SmPEP byla připravena jako rekombinantní protein v expresním systému E. coli a byla chromatograficky izolována. Rekombinantní SmPEP vykazuje pH optimum cca 8. Analýza substrátové specifity ukázala, že SmPEP štěpí peptidové substráty v endopeptidasovém módu, ale nikoli makromolekulární proteinové substráty. Pomocí syntetických flurogenních peptidových substrátů byly určeny preference pro aminokyseliny v pozicích P3-P1'. Byla určena inhibiční specifita SmPEP a jako nejúčinnější inhibitory nalezeny Z-Ala-Pro-CMK a Z-Arg-Pro-CHO. Pro rekombinantní SmPEP byly nalezeny primární krystalizační podmínky. Prolyl endopeptidase SmPEP from the blood fluke Schistosoma mansoni is investigated here for the first time. This enzyme is potentially interesting as a drug target for the treatment of schistosomiasis. SmPEP was detected in the extract of adult worms by enzyme activity and immunoreactivity. Enzymatically active SmPEP was produced in the E. coli expression system and was chromatographically purified. The pH optimum of recombinant SmPEP was about 8. Substrate specificity analysis revealed that SmPEP cleaved peptide substrates by endopeptidase activity, however, macromolecular substrates were not fragmented. The residue preferences in the positions P3 to P1' were determined using synthetic fluorogenic peptide substrates. SmPEP was found to be highly sensitive to the inhibition by Z-Ala-Pro-CMK and Z-Arg-Pro-CHO. Primary screening of crystallization conditions for recombinant SmPEP was performed. " (In Czech)"
Klíčová slova: exprese; krevnička; parazité; prolyl endopeptidasa; proteasy; blood fluke; expression; parasites; prolyl endopeptidase; proteases

Instituce: Fakulty UK (VŠKP) (web)
Informace o dostupnosti dokumentu: Dostupné v digitálním repozitáři UK.
Původní záznam: http://hdl.handle.net/20.500.11956/33156

Trvalý odkaz NUŠL: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-297632


Záznam je zařazen do těchto sbírek:
Školství > Veřejné vysoké školy > Univerzita Karlova > Fakulty UK (VŠKP)
Vysokoškolské kvalifikační práce > Diplomové práce