Název:
Studium antrachinonových sekundárních metabolitů hub rodu Geosmithia
Překlad názvu:
Analysis of anthraquinone secondary metabolites produced by Geosmithia spp.
Autoři:
Křesinová, Zdena ; Smrček, Stanislav (oponent) Typ dokumentu: Rigorózní práce
Rok:
2010
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Studium antrachinonových sekundárních metabolitů hub rodu Geosmithia Zdena Křesinová V rámci studia sekundárních metabolitů hub rodu Geosmithia, žijícími v asociaci s dřevokaznými ambrósiovými brouky, byl proveden screening fialově zbarvených pigmentů Geosmithia lavendula (kmen MK 1008) s cílem objasnit strukturu metabolitů a kvantifikovat jejich produkci při submerzní kultivaci na tekutém médiu. Bylo izolováno pět strukturně podobných metabolitů - polyhydroxylovaných antrachinonů (HAs). Tři majoritní metabolity byly plně identifikovány pomocí NMR a MS jako 1,3,6,8- tetrahydroxyantrachinon (1), rhodolamprometrin (1-acetyl-2,4,5,7- tetrahydroxyantrachinon, 2), a 1-acetyl-2-,4,5,7,8-pentahydroxyantrachinon (3). Izolace a kvantifikace HAs v extracelulární tekutině a myceliu se skládala z extrakčních a purifikačních kroků (SPE, semi-preparativní HPLC / UV) a analytické metody (UPLC / UV). Vývoj vhodné analytické metody zahrnoval optimalizaci separačních podmínek pro dva typy UPLC kolon s částicemi sorbentu menšími než 2 µm ve srovnání s HPLC kolonou obsahující sorbent s velikostí částic 5 µm. Kolona Shield RP C18 byla následně použita pro kvantifikaci produkce HAs v průběhu kultivace. Kalibrační křivky pro metabolity 2 a 3 byly v rozmezí 1,95 až 1000 g mL-1 s korelačními koeficienty 0,999. Limity...Analysis of anthraquinone secondary metabolites produced by Geosmithia spp. Zdena Křesinová Geosmithia species are little known fungal symbionts of bark beetles. Secondary metabolites from lilac colored species G. lavendula (strain MK 1008) and nine other Geosmithia species were investigated in order to elucidate their structures and quantify their production during submerged cultivation. Five hydroxylated anthraquinones (HAs) were isolated from culture media during submerged cultivation of the fungi and three of them were identified using NMR and MS techniques as 1,3,6,8- tetrahydroxyanthraquinone (1), rhodolamprometrin (1-acetyl-2,4,5,7- tetrahydroxyanthraquinone; 2), and 1-acetyl-2,4,5,7,8-pentahydroxyanthraquinone (3). Preparation, quantification and identification of HAs in fungal samples involved a SPE step, semi-preparative HPLC/UV and UPLC/UV methods. For optimization of analytical methods, separation qualities of two types of reversed phase sub-2-micron particle sized columns and one 5-micron particle sized column were tested. The most efficient Sheild RP C18 column filled with 1.7 µm particles was then used for quantification of HAs production during the cultivation period. Calibration curves for metabolites 2 and 3 (representing the majority of produced metabolites) were determined in...
host ::
