Název:
Stanovení cytotoxicity vybraných skupin xenobiotik
Překlad názvu:
Determination of Cytotoxicity of Selected Groups of Xenobiotics
Autoři:
Řeháčková, Renata ; Vopršalová, Marie (oponent) ; Trejtnar, František (vedoucí práce) Typ dokumentu: Rigorózní práce
Rok:
2010
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Cílem rigorózní práce bylo stanovit cytotoxicitu vybraných látek s využitím dvou buněčných modelů reprezentujících jaterní a ledvinnou tkáň. Testovanými látkami byly dvě skupiny xenobiotik - inhibitory membránového transportu (albumin, aprotinin, lysin, maleinát, probenecid, bestatin, cytochrom c, ampicilin) a reaktivátory acetylcholinesterázy oximového typu (obidoxim, HI-6, K027, JM-4, JM-46, K009, K027, K043, K203) a neoximového typu (7-MEOTA, takrin). Pro testování cytotoxicity reaktivátorů acetylcholinesterázy (RACHE) byly použity dvě metody - první založená na stanovení redukční kapacity buněk s využitím tetrazolového barviva MTS, druhá založená na měření aktivity proteáz v buňkách. Pro testování cytotoxicity inhibitorů membránového transportu (IMT) byla použita fluorometrická metoda využívající redukci resazurinu. Jako buněčné modely byly použity v případě RACHE dvě buněčné linie - buňky prasečích ledvinných proximálních tubulů LLC-PK1 a lidské jaterní buňky HEP G2, v případě IMT byly vedle těchto buněčných linií použity i nativní izolované ledvinné buňky potkana. K posouzení cytotoxicity byl u testovaných látek stanovován parametr IC50. Hodnoty IC50 pro RACHE stanovené oběma použitými metodami celkově přinesly srovnatelné výsledky. Výsledné pořadí testovaných RACHE dle toxicity pro daný typ...The aim of the work was to evaluate cytotoxicity of selected substances using two cellular models representing hepatic and renal tissue. Two groups of xenobiotics were tested - inhibitors of membrane transport (albumin, aprotinin, lysin, maleate, probenecid, bestatin, cytochrome c, ampicilin) and acetylcholinesterase reactivators of oxime type (obidoxime, HI- 6, K027, JM-4, JM-46, K009, K027, K043, K203) and non-oxime type (7-MEOTA, takrin). Two methods were chosen for testing cytotoxicity of reactivators of acetylcholinesterase (RACHE): the first method is based on determination of reduction capacity of cells using tetrazolium dye MTS, the second method is based on measuring activity of proteases in cells. To test cytotoxicity of inhibitors of membrane transport (IMT), a fluorometric method utilizing reduction of resazurin was used. In the case of RACHE two cellular lines were used as a cellular models, porcine renal proximal tubule cells LLC-PK1 and human hepatic cells HEP G2. In the case of IMT native rat isolated renal cells were used together with mentioned cellular lines. The parameter IC50 was determinated for tested substances to evaluate their cytotoxicity. The values IC50 of RACHE determinated by both used methods brought comparable results. The final order of the tested RACHE according...
host ::
