Original title: Nukleové kyseliny jako terapeutické agens
Translated title: Nucleic acids as terapeutic agent
Authors: Ráčková, Lucie ; Španová, Alena (referee) ; Rittich, Bohuslav (advisor)
Document type: Bachelor's theses
Year: 2015
Language: cze
Publisher: Vysoké učení technické v Brně. Fakulta chemická
Abstract: [cze] [eng]
S rozvojem molekulární biologie dochází i k rozvoji v onkoterapii. Hlavním směrem moderní medicíny je genová terapie. V genové terapii jsou používány dvě kategorie vektorů, a to virové vektory a nevirové vektory. K nevirovým vektorům patří plazmidy. Plazmidová DNA využívána v medicíně musí být dokonale čistá. V současnosti jsou k izolaci a purifikaci plazmidové DNA využívány hlavně chromatografické metody. Výzkum a vývoj se ale zabývá i jinými metodami, například dvoufázovými vodnými systémy a magnetickými nosiči. V experimentální části byla provedena izolace plazmidové pUC 19 DNA z kultury buněk Escherichia coli JM 109 (pUC 19) metodou alkalické lýze. Izolovaná plazmidová DNA byla purifikovaná pomocí třech metod: RNA v plazmidové DNA byla vysrážena chloridem lithným, RNA byla degradovaná imobilizovanou RNázou A a plazmidová DNA byla purifikována pomocí dvoufázového systému. Kvalita izolované plazmidové DNA byla ověřena spektrofotomericky a agarózovou gelovou elektroforézou. With the development of molecular biology development of oncotherapy proceeds. The major progress of modern medicine is gene therapy. In the gene therapy are two categeories, namely, viral vectors and nonviral vectors which are used mainly. Nonviral vectors include plasmids. Plasmid DNA used in medicine must be perfectly purified. Chromatographic methods are mainly used at present. Research and development deals with other methods for example two-phase aqueous systems and magnetic carriers. In experimental part of this thesis, isolation of pUC 19 plasmid DNA from Escherichia coli JM 109 (pUC 19) cell culture was performed via method of alkaline lysis. Quality of isolated plasmid DNA was verified spectrophotometrically and by agarose gel electrophoresis. Isolated plasmid DNA was purified using three methods: RNA in plasmid DNA was precipitated by lithium chloride, RNA was degraded by immobilized RNase A and plasmid DNA was purified using two-phase aqueous system.
Keywords: Escherichia coli; gene therapy; Plasmid DNA; purification; two-phase aqueous system; dvoufázový vodný systém; Escherichia coli; genová terapie; Plazmidová DNA; purifikace

Institution: Brno University of Technology (web)
Document availability information: Fulltext is available in the Brno University of Technology Digital Library.
Original record: http://hdl.handle.net/11012/38774

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-215152


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Brno University of Technology
Academic theses (ETDs) > Bachelor's theses