|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody vhodné ke stanovení cabozantinibu v krevním séru
Kleinová, Jana ; Kozlík, Petr (vedoucí práce) ; Hraníček, Jakub (oponent)
The aim of this Bachelor thesis was to develop a UHPLC-MS/MS method for the determination of Cabozantinib in blood serum. This method was used to monitor the release of the active substance in a model organism - the rat. First, the mass spectrometer setup was optimized, where MRM transitions for Cabozantinib and isotope-labelled Cabozantinib-D4 were found. For Cabozantinib, an MRM transition of 502.2 → 323.1 was found with optimal energy levels of Q1 = -26.0 V, CE = -40.0 V and Q2 = -22.0 V. For Cabozantinib-D4, the MRM transition of 506.2 → 327.0 was found with optimal energy levels being Q1 = -26.0 V, CE = -39.0 V and Q2 = -22 V. The method setup parameters were as follows: The chromatography column used was a Poroshell 120 EC-C18, 2.1x50 mm, 1.9 um, (Agilent Technologies). The mobile phase consisted of acetonitrile (B) and formic acid (A), the flow rate of the mobile phase was 0.350 ml/min, the analysis time was 5.5 min and the injection volume was 1 μl at gradient elution (time: 0; 0.5; 2.0; 3.0; 3.5; 4.0; 5.5 min, B: 10; 10; 60; 100; 10; 10 %). The method was linear (weighted regression 1/x2 ) with a regression coefficient equal to 0.9978, showing an excellent linearity of the method. The precision (relative standard deviation) of the method was within 14 %. The accuracy (relative error) was...
|
|
|
Porovnání různých skenů tandemové hmotnostní detekce v analýze kanabidiolu
Tichá, Tereza ; Kozlík, Petr (vedoucí práce) ; Kubíčková, Anna (oponent)
Cílem této bakalářské práce bylo porovnat různé skeny tandemového hmotnostního spektrometru za účelem vyvinutí LC-MS/MS metody vhodné ke stanovení kanabidiolu v krysím séru. V rámci této bakalářské práce byla provedena optimalizace hmotnostního spektrometru a vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Optimální parametry byly následující: chromatografická kolona Acquity UPLC BEH C18 50 × 2,1 mm, 1,7 μm od firmy Waters (Wexford, Irsko). Mobilní fáze byla složena z methanolu a vody o LC-MS čistotě. Průtok mobilní fáze byl 0,4 ml/min, kolona byla temperována na 40 řC, teplota na dávkovači byla 15 řC, objem nástřiku vzorku byl 1 μl a doba analýzy 7 minut za podmínek gradientové eluce. Byly sledovány MRM přechody o nejvyšší intenzitě. Pro CBD se jednalo o MRM přechod v pozitivním režimu 315,2 → 193,1 (Q1 = -10 V, CE = -24 V, Q3 = -20 V), pro izotopicky značený kanabidiol D3 byl zvolen 318,4 → 196,0 (Q1 = -10 V, CE = -23 V, Q3 = -20 V). Byly provedeny kalibrace v rozpouštědle a krysím séru v režimu MRM a SIM. Nebyla sestrojena kalibrace pro mód SCAN vzhledem k jeho nízké selektivitě, kvůli níž byl schopen detekovat kanabidiol až od koncentrace 312,5 ng/ml. Vysoce selektivní MRM byl schopen pracovat v celém pozorovaném koncentračním rozsahu od 4,9 ng/ml do 625,0 ng/ml. Jako jediný z porovnávaných skenů...
|
|
|
Vývoj UHPLC-MS/MS metody ke stanovení rivaroxabanu v krysím séru
Plášilová, Denisa ; Kozlík, Petr (vedoucí práce) ; Hraníček, Jakub (oponent)
Cílem této bakalářské práce bylo vyvinout specifickou UHPLC-MS/MS metodu pro stanovení rivaroxabanu v krysím séru. Nejprve bylo optimalizováno nastavení hmotnostního spektrometru. Byly nalezeny vhodné MRM přechody pro rivaroxaban a jeho isotopicky značený interní standard. Pro rivaroxaban byl nalezen MRM přechod 436,1 → 145,05 s optimálními hladinami energie Q1 = -12,0 V; CE = -30,0 V; Q2 = -27,0 V. Pro rivaroxaban D4 byl nalezen MRM přechod 440,1 → 145,0 s optimálními hladinami energie Q1 = -22,0 V; CE = -31,0 V; Q2 = -25,0 V. Parametry nastavení iontového zdroje byly následující: průtok nebulizačního plynu 3 l/min; průtok ohřevného plynu 10 l/min; teplota rozhraní 300 řC; desolvatační teplota 526 řC; DL teplota 250 řC; teplota tepelného bloku 400 řC; průtok sušícího plynu 10 l/min. Optimální chromatografická metoda byla následující: Chromatografická kolona Poroshell 120 SB AQ, 100 × 2,1 mm, 2,6 μm (Agilent); mobilní fáze se skládala z acetonitrilu s přídavkem 0,1% kyseliny mravenčí (A) a z destilované vody s přídavkem 0,1% kyseliny mravenčí (B); průtok mobilní fáze 0,5 ml/min; gradientová eluce (čas: 0-1-2-3,5-4-6,5 min, A: 20-20-80-80-20-20 % v/v); teplota na dávkovači 15 řC; teplota kolony 40 řC; doba analýzy 6,5 minut; objem nástřiku 2 μl. Optimalizovaná UHPLC-MS/MS metoda byla lineární...
|
|
|
VÝVOJ UHPLC-MS/MS METODY KE STANOVENÍ NILOTINIBU V KRYSÍM SÉRU
Černá, Kateřina ; Kozlík, Petr (vedoucí práce) ; Křížek, Tomáš (oponent)
Cílem této bakalářské práce bylo vyvinout UHPLC-MS/MS metodu ke stanovení nilotinibu v krysím séru. Tato UHPLC-MS/MS metoda byla následně použita ke sledování farmakokinetického průběhu uvolňování účinné látky v modelovém organismu - krysa v rámci projektu zaměřeném na formulační vývoj tablety obsahující nilotinib s pomalejším uvolňováním než doposud. Optimální nastavení metody bylo následující. Chromatografická kolona Acquity UPLC BEH PHENYL 100x2,1 mm, 1,7 μm od firmy Waters. Mobilní fáze se skládala z methanolu a destilované vody, obojí s přídavkem 0,1% kyseliny mravenčí při použití gradientové eluce. Průtok mobilní fáze byl 0,3 ml/min, teplota na dávkovači 15 řC, teplota kolony 40 řC, doba analýzy 6,5 minuty a objem nástřiku 2 μl. Byl sledován MRM přechod pro nilotinib: 530,2 → 289,10 (Q1 = -26 V; CE = -31 V; Q3 = -20 V) a pro nilotinib D6: 536,2 → 295,15 (Q1 = -26 V; CE = -31 V; Q3 = -14 V). Nastavení iontového zdroje bylo následující: průtok nebulizačního plynu 3 l/min; průtok sušícího plynu 10 l/min; teplota zdroje 300 řC; teplota desolvatační kapiláry 250 řC. Metoda byla částečně validována. Koeficient determinace 1,0000 ukazuje výbornou linearitu metody. Správnost, vyjádřená relativní chybou, byla do 20 %. Přesnost, vyjádřená pomocí RSD, byla do 9 %. Všechny hodnoty splňují validační...
|
host ::
RSS.