|
|
Vliv flavonoidů in vitro na aktivitu vybraných biotransformačních enzymů ve střevních buněčných liniích
Pokorná, Petra ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Petra Pokorná Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv flavonoidů in vitro na aktivitu vybraných biotransformačních enzymů ve střevních buněčných liniích Anthokyany se řadí mezi flavonoidní látky, které patří mezi hlavní přírodní barviva v rostlinách. Jsou považovány za velmi prospěšné pro lidský organismus. Anthokyany jsou hojně konzumovány prostřednictvím ovoce, zeleniny a červeného vína, a představují významné složky doplňků stravy. Obliba potravních doplňků s vysokými koncentracemi flavonoidů se stále zvyšuje, ale kromě pozitivního vlivu na lidské zdraví mohou také mít nežádoucí účinky - ovlivňovat enzymy metabolizující léčiva a tím ovlivňovat jak žádoucí, tak i nežádoucí účinky řady léčiv. V této diplomové práci se zkoumal in vitro vliv některých anthokyanidinů (cyanidin, delfinidin, malvidin, pelargonidin) na proliferaci střevní buněčné linie Caco- 2 za použití testu metabolické aktivity (MTT) a stanovení integrity plazmatické membrány buněk (neutrální červeň), a dále se sledoval jejich vliv na aktivitu vybraných biotransformačních enzymů: glutathion-S-transferasy (GST), karbonylreduktasy (CBR), UDP-glukuronosyltransferasy (UGT) a cytochromů P450 (CYP)....
|
|
| |
|
|
Kriminalita na otevřené drogové scéně v Praze
Matoušková, Petra ; Fidesová, Hana (vedoucí práce) ; Janíková, Barbara (oponent)
Hlavním tématem bakalářské práce je vztah mezi kriminalitou a otevřenou drogovou scénou v Praze. Samotné zneužívání drog a kriminalita s ním související, zásadně ohrožuje nejen jednotlivce, ale i celou společnost. Proto je třeba věnovat tomuto problému patřičnou pozornost a následně hledat nejefektivnější způsoby řešení. Teoretická část se snaží přiblížit čtenáři charakter drogové scény v době minulého režimu i v současnosti. Zabývá se obecně vztahem mezi kriminalitou a užíváním drog a uvádí přehled modelů vzájemné souvislosti mezi těmito jevy. Kvalitativní část výzkumu, si vymezuje za cíl popsat životní styl PUD, způsoby a získávání peněz na drogy a obživu. Zaměřuje se na zjišťování trestné činnosti, za kterou byli respondenti stíháni, obžalováni a odsouzeni. Dotazuje se také na tzv. terciální kriminalitu. Zjišťuje, zdali se respondenti také někdy stali obětí trestného činu. Podrobněji se také zaměřuje na uživatele, kteří dochází do buprenorfinové substituční léčby. Cílem práce je ověřit níže uvedené hypotézy a definovat jaký druh trestné činnosti souvisí s otevřenou drogovou scénou. Výsledky výzkumu byly získány metodou dotazníkového šetření mezi klienty terénního programu. Studie se zúčastnilo 33 respondentů. Výzkum přinesl zjištění, že nejčastěji byli uživatelé nelegálních drog odsouzeni za...
|
|
|
Role of disulphide bonds in hA2A subtype adenosine receptor
Zappe, Lukáš ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Bárta, Pavel (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická Fakulta v Hradci Králové Katedra Biochemicky věd Kandidát: Lukáš Zappe Vedoucí: Ing. Petra Matoušková Ph.D., PD Dr. Anke C. Schiedel Název diplomové práce: Role disulfidických vazeb u hA2A podtypu adenosinového receptoru Adenosinový receptor podtyp A2A je součástí rodiny receptorů spřažených s G proteinem (GPCR), která je nyní cílem téměř 40% všech léčivých látek. GPCRs se skládají ze sedmi transmembránových domén spojených třemi extracelulárními a třemi intracelulárními kličkami (ECL a ICL). Byla odkryta skutečná struktura receptoru, tedy víme, že ECL1 a ECL2 jsou spojeny disulfidickými vazbami. Z toho ECL2 je pravděpodobně zodpovědná za proces rozpoznání a navázání ligandu. Abychom lépe pochopili, jak důležitá je úloha těchto disulfidických vazeb v tomto procesu, pomocí přímé jednobodové mutace byly vytvořeny čtyři adenosinové A2A mutantní receptory, kde aminokyselina cystein byla nahrazena za serin (C146S, C159S, C166S a C146S-C159S). Ovlivnění receptorové exprese bylo zkoumáno pomocí metody ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay). Následný efekt na proces rozpoznání ligandu receptorem byl proveden pomocí kompetice mezi radioaktivně značeným ligandem [3 H]CGS-21680 (5 nM) a několika agonisty na adenosinových receptorech (NECA, CGS-21680, PSB-826,...
|
|
|
Stanovení exprese mRNA enzymu DHRS3 v lidských tkáních pomocí real-time SYBR green qPCR
Rusnáková, Pavlína ; Zemanová, Lucie (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Pavlína Rusnáková Školitel: RNDr. Lucie Zemanová, Ph.D. Název diplomové práce: Stanovení exprese mRNA enzymu DHRS3 v lidských tkáních pomocí SYBR green qPCR Dehydrogenasa/reduktasa nadrodiny SDR člen 3 (DHRS3, alternativně nazývána SDR16C1, retSDR1) je NADPH dependentní reduktasa karbonylových sloučenin, která patří do nadrodiny dehydrogenas/reduktas s krátkým řetězcem. Poprvé byl DHRS3 popsán Haeseleerem a kol. jako enzym vyskytující se ve vnějším segmentu čípků hovězí sítnice, který redukuje all-trans-retinal na all-trans-retinol v cyklu vidění. Nicméně exprese DHRS3 byla zjištěna také v jiných tkáních. Bylo prokázáno, že DHRS3 pravděpodobně hraje důležitou roli v embryogenezi a v rozvoji některých nádorů. Potvrzena byla účast DHRS3 na in vitro redukci několika endogenních látek (androstendion, DL-glyceraldehyd, estron) a xenobiotik (acetohexamid, 4-nitroacetofenon, benzil). Přestože se DHRS3 zdá být významným enzymem, který se účastní důležitých metabolických pochodů, některé jeho vlastnosti, včetně exprese v lidských tkáních, nejsou zcela dobře popsány, případně jsou dost roztříštěné. Cílem práce bylo stanovit expresi mRNA enzymu DHRS3 v lidských tkáních a přispět tak k rozvoji nových poznatků...
|
|
|
Vliv glutamátem navozené obezity na antioxidační enzymy u myší
Duchačová, Kateřina ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Kateřina Duchačová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv glutamátem navozené obezity na antioxidační enzymy u myší. Obezita je v současné době jednou z nejrozšířenějších chronických nemocí na světě. Mnoho vědeckých týmů se věnuje objasnění příčin tohoto onemocnění a také zkoumají změny v organismu, které s touto nemocí mohou souviset. Cílem této práce bylo stanovení aktivit a exprese enzymů superoxiddismutasy (SOD) a katalasy (CAT) a stanovení aktivity peroxidas (Px) v jaterním cytosolu u pokusných NMRI myší s obezitou navozenou glutamátem sodným (MSG) a u zdravých kontrol. Aktivity a exprese vybraných enzymů byly porovnávány s ohledem na patologický stav (MSG myši, osmolální kontroly a neovlivněné myši), věk (8 týdnů x 20 týdnů) a pohlaví pokusných myší. Aktivity byly stanoveny pomocí spektrofotometrických metod a polyakrylamidová gelová elektroforéza s následným imunoblottingem byla použita pro sledování proteinové exprese. Rozdíly ve specifické aktivitě SOD i CAT byly mezi jednotlivými skupinami pouze malé. Nejvýraznější změny v souvislosti s navozením obezity jsem zaznamenala v aktivitě Px. MSG myši obou pohlaví a věku měly vyšší aktivitu Px než neovlivněné myši...
|
|
| |
|
|
Vliv alfa-humulenu na adhezi prsní nádorové linie MDA-MB-231
Marešová, Markéta ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Jirkovská, Anna (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Markéta Marešová Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv alfa-humulenu na adhezi prsní nádorové linie MDA-MB-231 Seskviterpen α-humulen je obsažený v silici voskovníku červeného (Myrica rubra), která má řadu biologických účinku. Cíl této práce byl zaměřen na buněčnou adhezivitu nádorových buněk. Sledovaly se účinky α-humulenu na expresi vybraných adhezních molekul buněčné linie prsního nádoru MDA-MB- 231. Zároveň byl ověřen cytotoxický efekt α-humulenu na tuto linii. Působení α-humulenu na proliferaci buněk bylo hodnoceno s použitím neutrální červeně (NRU test) a ověřeno systémem xCelligence. Adhezivita buněk se sledovala také prostřednictvím systému xCelligence. Změny exprese vybraných adhezních molekul působením α-humulenu byly sledovány metodami Western blot a kvantitativní polymerázovou řetězovou reakcí na úrovni proteinů a mRNA. Výsledky prokázaly, že α-humulen výrazně ovlivňuje proliferaci buněk po 24 hodinovém působení (IC50 13,6 µg/ml). Adhezivita buněk byla působením samotného α-humulenu mírně zvýšena. Sledované adhezní molekuly EpCAM a β-katenin ovlivněny působením α-humulenu téměř nebyly, naopak ICAM1 byl na úrovni mRNA po 12 hodinách zvýšen a transkripční...
|
|
|
Vliv valencenu na adhezi prsní nádorové linie MDA-MB-231
Mottlová, Petra ; Matoušková, Petra (vedoucí práce) ; Schröterová, Ladislava (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Petra Mottlová Školitel: Ing. Petra Matoušková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv valencenu na adhezi prsní nádorové linie MDA-MB- 231 Valencen patří mezi seskviterpeny a je obsažen v silicích mnoha rostlin. Tvoří hlavní aromatickou složku citrusových plodů. Valencen nachází uplatnění především v potravinářském a kosmetickém průmyslu, ale nedávné studie potvrdily jeho biologickou aktivitu. Byly prokázány jeho protinádorové, protizánětlivé, antioxidační a antialergenní účinky. Cílem této práce bylo studovat cytotoxický účinek a vliv na adhezi seskviterpenu valencenu na prsní nádorovou linii MDA-MB-231. Dále bylo cílem studovat mechanismus jeho působení z pohledu vybraných adhezních molekul, které hrají důležitou roli v tvorbě nádorů a metastáz. Cytotoxický účinek valencenu byl testován s použitím neutrální červeně (NRU test). Vliv valencenu na adhezi buněk byl kontinuálně sledován pomocí přístroje x-Celligence a exprese vybraných adhezních molekul byla studována metodami Western blot a qPCR. Výsledky ukázaly mírný cytotoxický účinek valencenu, při koncentraci 100 μg/ml byla viabilita buněk více než 70%. Buněčná adheze, která byla zvýšena přídavkem TNF- ("tumor necrosis factor-") byla snížena...
|
|
|
Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu
Hlaváčová, Jitka ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jitka Hlaváčová Školitel: Prof. RNDr. Lenka Skálová, Ph.D. Název diplomové práce: Inhibiční účinek anthokyanidinů na jaterní karbonylreduktasu Karbonylreduktasa (CBR) je redukční enzym, jenž hraje významnou roli v první fázi biotransformace endogenních i exogenních substrátů. Podílí se na detoxikaci mnoha xenobiotik, mezi nimi i důležitých léčiv. Rozdíly v expresi a aktivitě jaterních biotransformačních enzymů mohou ovlivnit efektivitu a bezpečnost léčby. Cílem této práce bylo porovnat aktivitu a expresi CBR u starých a mladých jedinců, stanovit inhibiční vliv vybraných anthokyanidinů na aktivitu CBR u lidí a potkanů a pro nejsilnější inhibitory určit hodnotu IC50 a typ inhibice. U starých potkanů byla zjištěna významně vyšší aktivita CBR než u mladých potkanů a také se u nich projevila větší interindividuální variabilita. Při měření aktivity CBR u lidských vzorků nebyly zjištěny signifikantní rozdíly v souvislosti s věkem. Anthokyanidiny vykazovaly mírný až středně silný inhibiční vliv na CBR. U lidí byl enzym nejsilněji inhibován delfinidinem (IC50 = 16 µM) a u potkanů pelargonidinem (IC50 = 23 µM). Delfinidin působil jako nekompetitivní inhibitor CBR, zatímco u pelargonidinu byl zjištěn smíšený...
|
host ::
RSS.