|
|
Flow-cytometrická analýza inhibičního vlivu nových cílených léčiv na aktivitu ABC lékových efluxních transportérů
Burianová, Gabriela ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Červený, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Gabriela Burianová Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Název diplomové práce: Flow-cytometrická analýza inhibičního vlivu nových cílených léčiv na aktivitu ABC lékových efluxních transportérů Nádorová onemocnění patří k druhým nejčastějším příčinám úmrtí. Léčba je často kombinací klasické chemoterapie, radioterapie a chirurgické léčby. Novější možností je použití tzv. cílené protinádorové léčby, která se zaměřuje s větší specifitou na nádorové buňky. Komplikací úspěšné protinádorové léčby je vznik mnohočetné lékové rezistence (MDR), která může být mimo jiné způsobena zvýšenou expresí efluxních transportérů. ATP binding cassette (ABC) transportéry představují širokou rodinu transmembránových proteinů, které využívají energii ve formě ATP k transportu látek přes membránu. S MDR jsou spojeny především tři hlavní transportéry: P-glykoprotein (ABCB1), multidrug resistance-associated protein 1 (ABCC1) a breast cancer resistance protein (ABCG2). Inhibicí transportérů se zvýší akumulace chemoterapeutických substrátů uvnitř buněk. V této práci jsme zkoumali interakci šesti syntetických nízkomolekulárních látek (alisertib, ensartinib, entrectinib, talazoparib, tepotinib, vistusertib) s ABC transportéry...
|
|
|
Studium vlivu vybraných inhibitorů proteinkináz na lékovou rezistenci zprostředkovanou cytochromy P450
Janoušková, Adéla ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Adéla Janoušková Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Název diplomové práce: Studium vlivu vybraných inhibitorů proteinkináz na lékovou rezistenci zprostředkovanou cytochromy P450 Farmakokinetická léková rezistence často vede k selhání protinádorové léčby. Jedním z mechanizmů je zvýšený eflux léčiv z nádorových buněk, přičemž některé studie naznačují, že dalším mechanizmem by mohlo být zvýšené odbourávání léčiv na neaktivní metabolit. Cílem této práce bylo definovat možnou roli enzymů CYP3A4 a CYP2C8 ve fenoménu farmakokinetické rezistence a prozkoumat možnosti jejího ovlivnění novými cílenými léčivy. V první části jsme využili MTT proliferační metodu spolu s HepG2 buňkami stabilně transdukovanými příslušnými lidskými enzymy a prokázali signifikantní účast CYP3A4 na rezistenci vůči docetaxelu. V navazující části jsme pomocí komerčního kitu zkoumali inhibiční účinky čtyř vybraných inhibitorů tyrozinkináz vůči enzymu CYP3A4 v intaktních buňkách. Kobimetinib a dabrafenib vykazovaly signifikantní inhibiční aktivitu, zatímco osimertinib a brivanib nikoliv. V závěrečné části jsme pomocí MTT testu demonstrovali schopnost prvních dvou zmíněných léčiv modulovat rezistenci k docetaxelu, jež je...
|
|
|
Role lékových transportérů v placentárním přestupu entekaviru
Lukášová, Veronika ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Veronika Křečková Školitel: PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název diplomové práce: Role lékových transportérů v placentárním přestupu entekaviru Entekavir (ETV), analog guanosinu, je antivirové léčivo s vysokou účinností proti hepatitidě B. Patří mezi léčiva první volby pro léčbu dospělých i dětí. Jeho využití v těhotenství limituje řada faktorů včetně nedostatku údajů o placentární farmakokinetice. Na placentárním transferu léčiv se podílí řada lékových transportérů. Mezi nejvýznamější patří efluxní ATP-vázající (ABC) transportéry, P-glykoprotein (P-gp), breast cancer resistance protein (BCRP) či multidrug resistance-associated protein 2 (MRP2), lokalizované v apikální membráně syncytiotrofoblastu a pumpující své substráty vefeto-maternálním směru. U léčiv odvozených od nukleosidů může být placentární transport ovlivněn i aktivitou nukleosidových transportérů (NTs). Ekvilibrační nukleosidové transportéry (ENTs) regulují intracelulární koncentraci substrátů facilitovanou difuzí, zatímco koncentrační (CNTs) zprostředkovávají pouze aktivní influx. Cílem této práce bylo popsat roli lidských P-gp, BCRP, MRP2 a NTs (ENTs a CNTs) v placentárním přestupu ETV. K tomu účelu byla použita in vitro transportní metoda...
|
|
|
Hodnocení vlivu inhibitorů CDK a FLT3 na aktivitu ABC efluxních transportérů in vitro, vztah k mnohočetné lékové rezistenci
Poráč, Jakub ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Student: Jakub Poráč Školitel: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název diplomové práce: Hodnocení vlivu inhibitorů CDK a FLT3 na aktivitu ABC efluxních transportérů in vitro, vztah k mnohočetné lékové rezistenci P-gp a BCRP jsou transmembránové proteiny, které tvoří součást velké rodiny ABC transportérů. Jedná se o ATP-řízené transportéry, jejichž hlavním úkolem je eliminace exogenních i endogenních látek a jejich metabolitů z buněk, a to jak zdravých, tak nádorových tkání. Mnohdy je tato aktivita spojována s vypuzováním podaných terapeutik a mnohočetnou lékovou rezistencí (MDR) v nádorových buňkách. Slibnou terapii nádorových onemocnění představuje novější skupina léčiv cílících na tyrozínkinázy (TK) a cyklin-dependentní kinázy (CDK), což jsou buněčné enzymy zodpovídající za procesy proliferace, apoptózy a diferenciace. Inhibitory cyklin dependentních kináz (CDKI) jsou používány v terapii nádorů prsu, zároveň ale tvoří novou skupinu léčiv s potenciálem využití u hematologických malignit. V terapii AML představují nový úspěšný přístup zejména TK inhibitory (TKI), které cílí na mutovaný FLT3 receptor, konkrétně nedávno schválená léčiva midostaurin a gilteritinib. Tyto látky a nové investigativní léčivo...
|
|
|
Kinetic Evaluation of Potential Inhibitors for Selected Cysteine Proteases
Odvárková, Anna ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Anna Odvárková Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Dohlížející: Carina Lemke Prof. Dr. Michael Gütschow Název diplomové práce: Hodnocení vlivu potenciálních inhibitorů vybraných cysteinových proteáz na jejich kinetické vlastnosti Cysteinové katepsíny jsou proteázy, které se přirozeně vyskytují v lidském těle a účastní se mnoha fyziologických procesů, jako je například buněčná signalizace, proliferace nebo kostní přestavba. Jejich dysregulace ale může vést k vážným poruchám. Abnormální aktivita cysteinových katepsínů je přítomna u onemocnění zahrnujících osteoporózu, nádorová, neurodegenerativní nebo autoimunitní onemocnění. Tyto enzymy proto mohou sloužit jako hodnotné diagnostické nebo terapeutické cíle. Rodesain je parazitická proteáza produkovaná Trypanosomou brucei rhodesiense a je nezbytná pro její přežití. Tento enzym sdílí vysokou homologii s lidským cysteinovým katepsinem L. Inhibice rodesainu může být potenciální léčbou africké trypanosomiázy, také známé jako spavé nemoci. Inhibiční potenciál mnoha sloučenin proti cílovým enzymům byl testován spektrofotometricky nebo fluorometricky a výsledky byly hodnoceny za použití lineární či nelineární regrese. Také bylo provedeno stanovení...
|
|
|
Kinetic Evaluation of Potential Inhibitors for Selected Cysteine Proteases
Odvárková, Anna ; Hofman, Jakub (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Anna Odvárková Školitel: RNDr. Jakub Hofman, Ph.D. Dohlížející: Carina Lemke Prof. Dr. Michael Gütschow Název diplomové práce: Hodnocení vlivu potenciálních inhibitorů vybraných cysteinových proteáz na jejich kinetické vlastnosti Cysteinové katepsíny jsou proteázy, které se přirozeně vyskytují v lidském těle a účastní se mnoha fyziologických procesů, jako je například buněčná signalizace, proliferace nebo kostní přestavba. Jejich dysregulace ale může vést k vážným poruchám. Abnormální aktivita cysteinových katepsínů je přítomna u onemocnění zahrnujících osteoporózu, nádorová, neurodegenerativní nebo autoimunitní onemocnění. Tyto enzymy proto mohou sloužit jako hodnotné diagnostické nebo terapeutické cíle. Rodesain je parazitická proteáza produkovaná Trypanosomou brucei rhodesiense a je nezbytná pro její přežití. Tento enzym sdílí vysokou homologii s lidským cysteinovým katepsinem L. Inhibice rodesainu může být potenciální léčbou africké trypanosomiázy, také známé jako spavé nemoci. Inhibiční potenciál mnoha sloučenin proti cílovým enzymům byl testován spektrofotometricky nebo fluorometricky a výsledky byly hodnoceny za použití lineární či nelineární regrese. Také bylo provedeno stanovení...
|
|
|
Vliv inhibice tepotinibu, entrektinibu a sapanisertibu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR.
Krtilová, Kamila ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Kamila Krtilová Školitel: prof. Ing. Vladimír Wsól Ph.D. Název diplomové práce: Vliv inhibice tepotinibu, entrektinibu a sapanisertibu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR. V České republice je znatelný zvyšující se trend rozvoje plicního karcinomu. Toto tvrzení koresponduje s faktem, že je karcinom plic celosvětově nejčastějším typem nádorového onemocnění. Karbonyl redukující enzymy se vyskytují v různých tkáních, kde jsou zodpovědné za rozvoj mnoha onemocnění, zánětů, nádorů a nádorové rezistence. Tyto NAD(P)H- dependentní oxidoreduktázy způsobují redukci karbonylových sloučenin na příslušné alkoholy a snižují tak toxicitu léčiva pro nádorové buňky. V neposlední řadě jsou tyto enzymy zodpovědné za proliferaci a diferenciaci nádorových buněk a zvýšenou agresivitu nádoru. Předmětem této práce bylo studium inhibičního vlivu vybraných inhibitorů cyklin-dependentních kináz (CDKi) na aktivitu aldo-ketoreduktáz (AKR). Tyto inhibitory však neinhibují pouze předpokládané CDK, ale prokázaly také schopnost inhibice efluxních transportérů a inhibují i karbonyl redukující enzymy. Inhibiční efekt tepotinibu, entrektinibu a sapanisertibu byl stanoven za použití UHPLC analýzy. Největší inhibiční potenciál vůči...
|
|
|
Vliv akalabrutinibu a ibrutinibu na účinek daunorubicinu v nádorových buňkách.
Čermáková, Lucie ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Lucie Čermáková Školitel: RNDr. Eva Novotná, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv akalabrutinibu a ibrutinibu na účinek daunorubicinu v nádorových buňkách Leukémie představují maligní onemocnění krvetvorby, jehož podstatou je maligní transformace hematopoetické kmenové buňky na různém stupni vyzrávání a zvýšená proliferační aktivita. Zlatým standardem v léčbě leukémií je chemoterapie. Jedním z mnoha léčebných postupů je využití antracyklinových chemoterapeutik, především daunorubicinu (DAU). V klinické praxi jsou antracykliny hojně využívány, avšak mají vysoké kardiotoxické účinky, které omezují jejich dávkování. Jednou z hlavních příčin vzniku nežádoucích účinků je redukce antracyklinového chemoterapeutika na příslušný toxický metabolit, který se hromadí v srdci. Do této redukce jsou zapojeny karbonylredukující enzymy z nadrodin aldo-ketoreduktáz (AKR) a dehydrogenáz/reduktáz s krátkým řetězcem (SDR). Zároveň bylo prokázáno, že karbonylredukující enzymy jsou zapojeny do mechanismů způsobujících rezistenci nádorových buněk vůči antracyklinům, čímž dochází ke snížení inhibice růstu těchto buněk. V rámci diplomové práce jsme zjistili, že vybrané inhibitory tyrosinkináz (akalabrutinib, ibrutinib) inhibují...
|
|
|
Návrh rodinného domu a tepelná ochrana budovy
Hofman, Jakub
Bakalářská práce se zabývá návrhem dřevostavby s ohledem na tepelnou ochranu konstrukcí. Jedná se o rodinný dům se dvěma podlažími. Druhé podlaží je přitom řešeno jako podkroví. Konstrukce jsou navrženy tak, aby splňovaly normu ČSN 73 0540. Rozvržení domu je koncipováno tak, aby byly v letním období obytné místnosti stíněny. Naopak aby v zimních měsících docházelo k vysokému proslunění a vytvoření tepelných zisků ze slunce. V teoretické části jsou popsány druhy tepelně izolačních materiálů používaných v konstrukčních systémech rámových dřevostaveb a jejich vlastnosti. Tepelné izolace jsou roztříděny do skupin syntetických, minerálních, organických a speciálních tepelně izolačních materiálů. Materiály jsou porovnány podle jednotlivých tepelně technických vlastností.
|
|
|
Vliv inhibice midostaurinu, vistusertibu a talazoparibu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR a SDR
Milan, Jaroslav ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Jaroslav Milan Školiteľ: prof. Ing. Vladimír Wsól, PhD. Konzultant: RNDr. Eva Novotná, PhD. Názov diplomovej práce: Vliv inhibice midostaurinu, vistusertibu a talazoparibu na aktivitu vybraných reduktas z nadrodiny AKR a SDR. Kľúčové slová: reduktázy, AKR, inhibítory, midostaurín, vistusertib, talazoparib, antracyklíny, KG1a Mnohočetná lieková rezistencia je už mnoho rokov stále veľkým problémom pri terapii nádorových ochorení. Antracyklínové antibiotiká sú využívané v terapií s vysokou účinnosťou, ale spomínaná rezistencia a závažné nežiadúce účinky niekedy zabraňujú ich používaniu a vedú k zlyhaniu terapie. Jedným z najzávažnejších nežiadúcich účinkov je kardiotoxicita. Podľa starších teórií bol vznik kardiotoxicity založený na vznikajúcich reaktívnych formách kyslíka (ROS). Mnohokrát bol potvrdený negatívny účinok ROS na bunky srdcového svalu, avšak dnešné poznatky otvárajú aj iné, komplexnejšie mechanizmy jej vzniku. Predmetom tejto práce bolo štúdium enzýmov, ktoré metabolizujú antracyklíny, konkrétne daunorubicín. Vznikajúce metabolity majú nižšiu účinnosť a vyššiu toxicitu a môžu byť jednou z príčin zlyhania terapie a už spomenutej kardiotoxicity. V našej práci sme použili 3 inhibítory,...
|
host ::
RSS.