|
|
Flow cytometry (FCM) sperm assessment In normozoospermic and asthenozoospermic men using monoclonal antibodies against sperm proteins
Čapková, Jana ; Kubátová, Alena ; Děd, Lukáš ; Teplá, O. ; Pěknicová, Jana
Recent studies have shown that infertility affects an estimated 15% of all couples. Male infertility is the primary or contributing cause in 60% of these cases. Consequently, application of methods of assisted reproduction is increasing. These methods would benefit from extended evaluation of the sperm quality. For this purpose, we analyzed sperm proteins in men with normal spermiograms and with asthenozoospermia. Ejaculates of both groups were tested with a set of well-characterized monoclonal antibodies (MoAbs) to human sperm. No statistically significant differences were found between normospermics and asthenospermics in the expression of sperm surface proteins clusterin, evaluated by Hs-3 MoAb, and semenogelin, evaluated by Hs-9 MoAb. On the other hand, flow cytometry revealed quantitative differences between normozoospermic and asthenozoospermic men in GAPDHS (glyceraldehyde phosphate dehydrogenase human sperm-specific glycolytic enzyme), evaluated by Hs-8 MoAb, VCP (valosin-containing protein), detected with Hs-14 MoAb, and PRKAR2A (cAMP-dependent protein kinase type II – alpha regulatory subunit) detected by MoAb Hs-36. Asthenozoospermic men displayed significantly reduced expression of intra-acrosomal proteins with a likely decrease in sperm quality, and thus a negative impact on successful reproduction.
|
|
|
Parametry motility spermií ryb a celkové proteinové profily semenné plasmy během in vivo a in vitro uchování
KOLEŠOVÁ, Anna
Vlivu uchování gamet na kvalitu spermatu byla věnována značná pozornost v průběhu několika předchozích let. Předchozí studie ukázaly, že spermie uchovávané po delší dobu in vivo či in vitro mohou ztrácet pohyblivost a fertilizační schopnost. Mimoto bylo dokázáno, že fertilizační potenciál samců je vysoce závislý nejen na parametrech pohyblivosti spermií, ale také na složení proteinů semenné plazmy. Pro vývoj a zdokonalení metod umělé reprodukce ryb je nezbytné získat další poznatky o vlivu in vivo a in vitro uchovávání na parametry kvality spermatu a na proteinové složení semenné plazmy. Tato práce byla zaměřena na studium vlivu in vivo a in vitro uchování na pohyblivost spermií, integritu DNA, oxidativní stres a v neposlední řadě také na složení semenné plazmy. Výsledky této studie poskytují ucelený pohled na kvalitativní a kvantitativní parametry spermatu chrupavčitých a kostnatých druhů ryb s ohledem na jeho in vivo a in vitro uchovávání. Tyto výsledky by měly být přínosem pro zdokonalení akvakulturního chovu výše zmíněných druhů. Získaná data potvrdila, že proteinové složení semenné plazmy se v průběhu uchování spermatu in vivo mění v závislosti na době jeho odběru. Dále je pravděpodobné, že na regulaci pohybu spermií se podílejí proteinové změny enzymatických drah. Výsledky prezentované v této studii by měly napomoci optimalizovat postupy a protokoly umělé reprodukce ryb.
|
|
| |
|
| |
|
|
The effect of low dose of vinclozolin on reproductive tract development in CD1 outbred mice
Elzeinová, Fatima ; Pěknicová, Jana ; Nováková, Vendula ; Buckiová, Daniela ; Kubátová, Alena
The effect of a low dose of vinclozolin within the development of the reproductive tract during gestation (VIN-GD 15-22) and puberty (VIN-PND 23-44) in CD1 mice was tested. We found a decrease in the anogenital distance, prostate weight and pathology of testes in both experimental groups. Sperm counts decreased to 46% (VIN-GD) and to 81% (VIN-PND), and also the acrosomal state (evaluated by antiacrosomal antibody) decreased in both groups to 89% in comparison to the control group (100%). Sperm head abnormalities increased by approximately 18% and 13%, respectively. In this connection, the expression of some genes was changed (arosome-related gene (Acr), apoptosis related genes (p53, p21)). In conclusion, a low dose of vinclozolin affected the reproductive tract, sperm parameters and expression of selected genes in both experimental groups.
|
|
|
The effect of low dose of vinclozolin on reproductive tract development in CD1 outbred mice
Pěknicová, Jana ; Elzeinová, Fatima ; Nováková, Vendula ; Buckiová, Daniela ; Kubátová, Alena
The effect of a low dose of vinclozolin within the development of the reproductive tract during gestation (VIN-GD 15-22) and puberty (VIN-PND 23-44) in CD1 mice was tested. We found a decrease in the anogenital distance, prostate weight and pathology of testes in both experimental groups. Sperm counts decreased to 46% (VIN-GD) and to 81% (VIN-PND), and also the acrosomal state (evaluated by antiacrosomal antibody) decreased in both groups to 89% in comparison to the control group (100%). Sperm head abnormalities increased by approximately 18% and 13%, respectively. In this connection, the expression of some genes was changed (arosome-related gene (Acr), apoptosis related genes (p53, p21)). In conclusion, a low dose of vinclozolin affected the reproductive tract, sperm parameters and expression of selected genes in both experimental groups.
|
|
| |
|
|
Role povrchových proteinů v reprodukci
Jonáková, Věra ; Postlerová, Pavla ; Tichá, M. ; Pěknicová, Jana
Během ejakulace se proteiny semenné plasmy navazují na povrch spermie a tvoří povrchové proteiny spermie, které mohou změnit vazebné vlastnosti spermie. DQH povrchový protein spermie vykazuje afinitu k oviduktálnímu epitelu a glykoproteinům zona pellucida (ZP). DQH mRNA byla detekována v semenných vacích (SV). DQH byl imunodetekován monoklonálními protilátkami (Mabs)v extraktu a tekutině i na tkáňových řezech SV vaků a na plasmatické membráně akrosomu ejakulovaných spermií. Výsledky potvrzují schopnost DQH proteinu se vázat na povrch spermie při ejakulaci, účast při tvorbě rezervoáru spermií v prasečím oviduktu. Spermie preinkubované s Mabs proti DQH proteinu před koinkubací s vajíčkem redukují vazbu spermie k vajíčku. Pro primární vazbu spermie s ZP glykoproteiny vajíčka je důležitý intaktní DQH protein na povrchu spermie.
|
|
|
Dynamic and role of cytosekeletal proteins in mammalian sperm cells
Paleček, J. ; Dvořáková, K. ; Pěknicová, Jana ; Kubátová, Alena ; Moore, H. D. M.
The cytoskeleton of sperm head consists of resistant structural proteins of the nucleus and of perinuclear theca, which are largely rosponsible for the shaping of the nucleus. three mahjor cyteskeletal proteins, actin, tzubnulin and spectrin, are present in the head of mammalian spermatohzoa. Maoreober, the mictotubular cytoskeleton also contains other dynamic proteins, which have a morphological function within the cell and which are responsible for cell signalling processes.
|
|
| |
host ::
RSS.