|
|
Inhibitory lidského enzymu akr1C3 rostlinného původu
Lojdová, Kateřina ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Kateřina Lojdová Školitel: RNDr. Eva Novotná, Ph.D. Konzultant: RNDr. Lucie Zemanová, Ph.D. Název rigorózní práce: Inhibitory lidského enzymu AKR1C3 rostlinného původu Enzym AKR1C3 je součástí rozsáhlé nadrodiny aldo-ketoreduktas. Jedná se o hydroxysteroiddehydrogenasu, která se v lidském těle podílí mimo jiné na metabolismu steroidních hormonů, ale i na aktivaci a deaktivaci některých léčiv. Zvýšená exprese tohoto enzymu je spojena s vyšší agresivitou některých nádorových onemocnění a horší prognózou jejich léčby, např. u nádorového onemocnění prostaty. To z něj dělá zajímavý cíl pro farmaceutický a lékařský výzkum. Nalezení silného a selektivního inhibitoru AKR1C3 je prvním krokem k léčivu, které by mohlo ovlivnit metabolismus nádoru a obnovit jeho citlivost k léčbě. V této práci bylo testováno 32 přírodních látek ze skupin flavonoidů a alkaloidů. Cílem bylo stanovit inhibiční účinnost vybraných látek na enzym AKR1C3. K měření byla využita redukce potenciálního protinádorového léčiva oracinu na dihydrooracin, výsledky byly hodnoceny pomocí HPLC analýzy. U látek s významnějším inhibičním efektem byla stanovena poloviční inhibiční koncentrace (IC50).
|
|
|
Neuroprotective and antioxidant effects of a series of coumarins in vitro Alzheimer's disease models.
Pospěchová, Lucie ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Jirkovská, Anna (oponent)
1 Abstrakt Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka : Mgr. Lucie Pospěchová Školitel : Doc. PharmDr. Andrea Tarozzi, CSc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název rigorózní práce : Neuroprotektivní a antioxidační efekty látek ze skupiny kumarinů na in vitro modelech Alzherimerovy nemoci Oxidativní stres je jedním z významných faktorů, které vedou k poškození a smrti neuronálních buněk. Děje se tak v důsledku vzniku reaktivních kyslíkatých radikálů, které se podílejí na patogenezi neurodegenerativních onemocnění, např. Alzheimerovy choroby (AD). Vědecké studie dokazují, že přírodní kumariny vykazují antioxidační vlastnosti, a mohly by tudíž představovat nové možnosti léčby neurodegenerativních chorob. Esculetin (ESC), scopoletin (SCOP), fraxetin (FRAX) a daphnetin (DAPH) patří do skupiny fenolických kumarinů a vzhledem ke katecholové skupině a α-pyronovém kruhu vykazují značné antioxidační vlastnosti. V této práci jsme se zabývali antioxidačními a neuroprotektivními vlastnostmi ESC, SCOP, FRAX a DAPH na lidských neuronálních buňkách (SH-SY5Y). Zkoumali jsme aktivitu proti 2,2-difenyl-1-pikrylhydrazylu (DPPH), vzniku reaktivních kyslíkatých radikálů a cytotoxicitě způsobené terc-butyl hydroperoxidem (t-BuOOH). Dále byla testována schopnost ESC...
|
|
|
Investigating the role of zinc transporter ZIP 6 and STAT3 in mitosis
Burgetová, Lenka ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Lenka Burgetová Školitel: PharmDr. Martina Čečková PhD. Školitel specialista: Dr. Kathryn Taylor PhD. Název diplomové práce: Studium role zinkového transportéru ZIP 6 a STAT3 v mitóze Bylo prokázáno, že STAT3 (přenašeč signálu a aktivátor transkripce 3) se podílí na vzniku rakoviny. ZIP6 je cílem tohoto transkripčního faktoru. Větší část dosavadního výzkumu byla zaměřena jen na aktivaci STAT3 po fosforylaci tyrosinu, zatímco fosforylace serinu zůstala relativně neprozkoumána. Domníváme se, že fosforylace serinu je aktivována v průběhu mitózy tamoxifen-rezistentních prsních nádorových buněk (TamR), a že zinkový transportér ZIP6 a na serinu fosforylovaný STAT3 jsou zahrnuty v zinkem zprostředkovaném mechanismu mitózy. Při použití nocodazolu pro navození zástavy mitózy, jsme pozorovali snížení exprese na tyrosinu fosforylovaného STAT3, zatímco exprese STAT3 fosforylovaného na serinu byla u mitotických buněk zvýšena. Přidání zinku mělo za následek vyrušení účinku nocodazolu, obnovení buněčného cyklu a proteolytické štěpení STAT3, což svědčí pro nový mechanizmus úniku z mitózy. Dále jsme objevili, že ZIP6 je v průběhu mitózy štěpen na N-terminálním úseku a přemístěn z endoplazmatického...
|
|
|
MRP transportní proteiny v placentě
Dvořáková, Marie ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
V současné době zahrnují MRP membránové proteiny, které patří do rodiny ABC transportérů, 9 členů. MRP transportní proteiny jsou exprimovány v různých tkáních organismu, včetně placenty. Hlavní rolí MRP proteinů je transport mnoha endogenních a exogenních látek, včetně léčiv, přes buněčnou membránu. V této práci jsou shrnuty aktuální informace o expresi a funkci MRP transportérů v placentě a v ostatních tkáních v organismu. Bylo zjištěno, že v placentě je dosud popsáno jen 5 MRP transportérů, a to MRP1, MRP2, MRP3, MRP5 a MRP8. Exprese všech těchto proteinů je v průběhu těhotenství variabilní. MRP transportéry pomáhají chránit plod před potenciálně toxickými látkami, řadě látek ale naopak přestup přes placentu usnadňují. Některé MRP mají v placentě specifické fyziologické funkce. MRP1 například ovlivňuje apoptózu, MRP5 se v plodových cévách podílí na vazodilataci zprostředkované oxidem dusnatým.
|
|
|
Interakce vybraných protinádorových látek ze skupiny inhibitorů MAPK/ERK signalizační kaskády s ABC lékovými transportéry
Slatinský, Lukáš ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Hofman, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Student: Lukáš Slatinský Školitel: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název diplomové práce: Interakce vybraných protinádorových látek ze skupiny inhibitorů MAPK/ERK signalizační kaskády s ABC lékovými transportéry ABCB1 (Pgp, P-glycoprotein) a ABCG2 (BCRP, breast cancer resistance protein) patří mezi membránové efluxní transportéry závislé na ATP, tzv. ATP-binding cassettes (ABC). Fyziologicky jsou exprimovány v buněčné membráně a chrání tkáně před potencionálně toxickými xenobiotiky, včetně léčiv. Tím, že jsou schopny odčerpávat širokou škálu cytotoxických léčiv, představují také jeden z obranných mechanismů nádorových buněk, což vede k selhávání léčby. BRAF protein má důležitou regulační a signální roli v MAPK/ERK signalizační kaskádě ovlivňující buněčné dělení, diferenciaci a sekreci. Mutace BRAF vedou k nadměrné aktivitě MAPK/ERK kaskády v mnoha nádorových buňkách a stávají se tak cílem protinádorové terapie. Kobimetinib a dabrafenib jsou relativně nové protinádorové látky, inhibují uvedenou signální dráhu a používají se v léčbě melanomu s mutacemi BRAF. Cílem této práce bylo zjistit, jestli inhibitory kináz kobimetinib a dabrafenib mohou inhibovat efluxní transportéry ABCB1 a ABCG2 a překonávat tak...
|
|
|
The effect of lipid signaling pathway interference on sorafenib cytotoxic efficacy and function of efflux transporters in mouse hepatocellular carcinoma cells
Sagandykova, Aigul ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Aigul Sagandykova Školitel: PharmDr. Martina Čečková Ph.D. Konzultant: Dr. Mikko Gynther Ph.D. Název diplomové práce: Efekt interference v lipidové signální cestě na cytotoxicitu sorafenibu a funkci efluxních transportérů u buněk myšího hepatocelulárního karcinomu. Nádorová onemocnění představují i v současné době jednu z celosvětově nejvýznamnějších terapeutických výzev. Chemoterapie dosud zůstává základním přístupem v léčbě maligních onemocnění. Její léčebné výsledky nicméně komplikuje mnohočetná léková rezistence (MDR), fenomén popsaný jako ztráta citlivosti nádorových buněk vůči širokému spektru chemoterapeutických léčiv. Dobře známou příčinou MDR je zvýšení exprese a/nebo zvýšení aktivity efluxních lékových transportérů ATP-dependentní transportérové rodiny (tzv. ABC transportérů), jež byly nalezeny v mnoha typech nádorů. V posledním desetiletí stále větší množství vědecké literatury věnuje pozornost novému znaku nádorových buněk - zánětu. Zánětlivé mikroprostředí potencuje tumorigenezi a up regulaci transportérů. Navíc řada pozorování potvrzuje, že ABC transportéry zprostředkovávají přenos signálních lipidů. Tento nový pohled vede k možnosti volby protizánětlivé léčby jako nového přístupu v...
|
|
|
Interakce vybraných anti-HCV léčiv s placentárním OCTN2 transportním proteinem
Machalová, Vanda ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Smutná, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študentka: Mgr. Vanda Machalová Školiteľ: doc. PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Názov rigoróznej práce: Interakcie vybraných anti-HCV liečiv s placentárnym OCTN2 transportným proteínom. Cieľom tejto rigoróznej práce bolo otestovať interakciu paritapreviru a daclatasviru, s placentárnym transportérom OCTN2, ktorý sprostredkováva transport L-karnitínu ako kofaktoru procesu oxidácie mastných kyselín pre získanie dostatočnej energie na správny vnútromaternicový rast plodu. Na liečbu chronickej hepatitídy C v tehotenstve zatiaľ nie sú schválené žiadne liečivá tejto skupiny, preto testovaním ich vplyvu na transport L-karnitínu cez OCTN2 tak pomôže vytvárať obraz ohľadom ich bezpečnosti pre plod i matku. V prvej časti štúdie sa testoval transport radioaktívne značeného L-karnitínu cez monovrstvu buniek BeWo b30 v prítomnosti paritapreviru a daclatasviru a stanovila sa zároveň aj koncentrácia radioaktívne značeného L-karnitínu vo vnútri bunkovej vrstvy. V druhej časti práce sme sa zamerali na hodnotenie vplyvu prítomnosti paritapreviru a daclatasviru na génovú expresiu karnitínových transportérov OCTN1 a OCTN2 (resp. ich kódujúcich génov SLC22A4 a SLC22A5) pomocou qRT-PCR. Výsledky transportných štúdií iba naznačili...
|
|
|
Sledování exprese ABC - transportérů na transkripční úrovni
Kalmanová, Milada ; Štaud, František (vedoucí práce) ; Čečková, Martina (oponent)
Lidská ABC (ATP-binding cassette) rodina aktivních transportů obsahuje asi 50 funkčně rozdílných transmembránových proteinů. Využívají energii z hydrolýzy ATP a transportují různé druhy endogenních a exogenních sloučenin přes membrány proti koncentračnímu spádu. ABC transportéry hrají důležité role v absorpci, distribuci a exkreci léků. Některé jsou také schopné udělit mnohočetnou lékovou rezistenci nádorovým buňkám. Sledovat expresi ABC transportérů na transkripční úrovni lze v dnešní době několika metodami. Patří mezi ně Northern blotting, "RNase protection assay", real-time RT-PCR a microarray analýza. V této práci jsou shrnuty aktuální informace o kvantifikaci ABC transportérů, které transportují léky. Bylo zjištěno, že ABC transportéry jsou exprimovány v játrech, ledvinách, gastrointestinálním traktu, hematoencefalické bariéře, placentě a dalších tkáních.
|
|
|
Studium interakce platinových cytostatik s BCRP lékovým transportérem pomocí MTT cytotoxicitního testu
Horká, Markéta ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
AAbbssttrraakktt Rezistence onkologických onemocnění na léčbu cytostatiky patří mezi nejzávažnější problémy protinádorové terapie. Jedním z možných mechanismů vzniku rezistence vůči cytostatikům je zvýšení exprese efluxních transportérů, které snižují koncentraci použitých léčiv v buňkách. Tato práce je zaměřena na studium interakce klinicky používaných platinových cytostatik (cisplatina, karboplatina a oxaliplatina) s buněčným transportérem BCRP, který je považován za velmi důležitý z hlediska vzniku rezistence nádorových buněk vůči cytostatické léčbě. Testování bylo provedeno na buněčné linii MDCKII (parentní linie bez BCRP) a na linii MDCKII-BCRP, která byla transfekovaná genem pro BCRP. Při prvním testování bylo zjištěno, že při použití oxaliplatiny není životaschopnost buněk přítomností BCRP výrazněji ovlivněna. Transportér projevil důležitou roli v testech s cisplatinou a karboplatinou, protože buňky transfekované genem pro BCRP vykazovaly signifikantně vyšší životaschopnost než buňky bez tohoto transportéru. Inhibice transportéru specifickým inhibitorem BCRP fumitremorginem C však neměla na životaschopnost buněk MDCKII-BCRP vliv. Z těchto výsledků tedy vyplývá, že rezistence transfekovaných buněk vůči csplatině a karboplatině je způsobena jiným mechanismem. Zvýšená rezistence může být způsobena EGFP,...
|
|
|
Studium vlivu EGFP na cytotoxicitu platinových cytostatik
Musilová, Markéta ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Štaud, František (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Mgr. Markéta Musilová Rigorózní práce Studium vlivu EGFP na cytotoxicitu platinových cytostatik Abstrakt Tato práce je zaměřena na studium role EGFP v rezistenci nádorových buněk vůči platinovým cytostatikům (cisplatině, karboplatině a oxaliplatině). Práce navazuje na předchozí výsledky experimentů s BCRP lékovým efluxním transportérem, které naznačily, že zvýšená rezistence nádorových buněk vůči platinovým cytostatikům je patrně způsobena spíše přítomností EGFP než vlivem efluxního transportéru. Pro potvrzení této hypotézy byla s uvedenými platinovými cytostatiky provedena série MTT cytotoxicitních testů na parentní buněčné linii Hep2 a linii Hep2-EGFP transferované pro expresi EGFP. Výsledky prokázaly vyšší toleranci buněk exprimujících EGFP vůči působení platinových cytostatik oproti buňkám parentním. Dle získaných výsledků usuzujeme, že k interakci mezi EGFP a platinovými cytostatiky skutečně dochází, což může vést ke zkresleným interpretacím výsledků cytotoxicitních studií.
|
host ::
RSS.