|
Biological activity of plants secondary metabolites XXX. Basic search of selected taxons on anticholinesterase activity.
Karaščáková, Diana ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Hošťálková, Anna (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutickej botaniky Kandidát: Diana Karaščáková Školiteľ: prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Názov diplomovej práce: Biologická aktivita sekundárnych metabolitov rastlín XXX.; Základný screening vybraných taxónov na anticholinesterázovú aktivitu V rámci skúmania biologickej aktivity sekundárnych metabolitov bolo vybraných 7 taxónov vyšších rastlín. Štúdia sa zaoberá základným výskumom sumárnych a alkaloidných extraktov pripravených z morfologických častí rastlín Annona muricata (listy), Leonotis leonurus (vňať), Turnera diffusa (vňať), Hamelia patens (vňať), Uncaria guianensis (kôra), Allamanda cathartica (koreň) a Morinda citrifolia (listy). Pre objasnenie zastúpenia hlavných typov sekundárnych metabolitov boli pripravené extrakty podrobené dôkazovým reakciám na TLC pomocou desiatich detekčných činidiel. Po detekcii Dragendorffovým činidlom etylacetátových extraktov boli alkaloidy vo významnejšej miere zastúpené iba v Annona muricata. Alkaloidy neboli detegované v kôre rastliny Uncaria guianensis. Pomocou Ellmanovej metódy boli extrakty testované na potenciálnu inhibičnú aktivitu voči ľudským mozgovým cholínesterázam, pre stanovenie boli použité oba rekombinantné enzýmy. Ani v jednom z meraných extraktov neboli prítomné výrazne...
|
|
Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.
Faschingbauer, Jakub ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
Faschingbauer J.: Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L.. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2019. V rámci screeningu biologicky aktivních sekundárních metabolitů rostlin, prováděné na katedře farmaceutické botaniky FAF UK, byly zkoumány vybrané taxony rodu Centaurea (Asteraceae). Tato studie se zabývá základním fytochemickým výzkumem extraktů připravených z nažek druhů Centaurea cyanus, Centaurea jacea, Centaurea scabiosa, Centaurea pseudophrygia,Centuarea stoebe, Centaurea solstitialis a Centaurea benedicta. Pro objasnění jednotlivých skupin sekundárních metabolitů byly připravené extrakty podrobené důkazovým reakcím na TLC a MS analýze (EI, ESI). Ethyl-acetátové i sumární ethanolové extrakty byly zkoumány na potenciální inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase (AChE) a plazmové butyrylcholinesterase (BChE) a cytotoxictě vůči vybraným 9 nádorovým liniím. Zajímavou cholinesterasovou aktivitu vykazoval ethyl- acetátový extrakt C. cyanus, který selektivně inhiboval BChE (IC50 BChE = 22,62 ± 3,62 µg/ml; IC50 AChE = 221,50 ± 44,56 µg/ml). Ostatní ethyl-acetátové a ethanolové extrakty dalších vybraných druhů rodu Centaurea byly vůči...
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII.
Hojgrová, Veronika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Šafratová, Marcela (oponent)
V. Hojgrová: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita VIII. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky. Počet stran 69. Tato diplomová práce se zabývá izolací alkaloidů z Vinca minor L. z čeledi Apocynaceae. Separace alkaloidů z vybrané frakce (VM 215-258), respektive z jejich podfrakcí (VM 34-41, VM 86, VM 87-113) probíhala pomocí preparativní TLC. Podařilo se izolovat dva čisté alkaloidy z podfrakce (VH 34-41). První alkaloid VH-1, který nebyl doposud izolován a druhý alkaloid VH-2: (-)-raukubainin. Alkaloidy byly identifikovány na základě EI-MS, LC-MS, NMR a optické otáčivosti a byly porovnány s daty v odborné literatuře. Izolované alkaloidy byly testovány na inhibiční aktivitu vůči acetylcholinesterase (AChE), butyrylcholinesterase (BuChE) a prolyloligopeptidase (POP) a na cytotoxicitu. Obě látky nevykazovaly po změření významnou cholinesterasovou inhibiční aktivitu IC50 vůči AChE, vůči BuChE vykazoval mírnou aktivitu pouze (-)-raukubainin (IC50 = 94 ± 7 μM), VH-1 byl shledán jako neaktivní (IC50 >100 μM). Inhibiční aktivita vůči POP byla testována zatím pouze u (-)-raukubaininu; byl shledán neaktivním (IC50 > 1000 µM). Výsledky cytotoxické aktivity alkaloidů (-)-raukubaininu a VH-1 v době odevzdávání této diplomové...
|
|
Vinca minor L. alkaloids and their biological activity II.
Pavuková, Simona ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Pavuková, S.: Alkaloidy Vinca minor L. a ich biologická aktivita II. Diplomová práca, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutickej botaniky, Hradec Králové 2021. Vinca minor L. je druh kvitnúceho polokru, pôvodom hlavne zo strednej a južnej Európy, ktorý obsahuje viac než 50 indolových alkaloidov. Pri screeningu potenciálnych rastlinných inhibítorov namierených proti ľudskej AChE a BuChE, preukázal alkaloidný extrakt zo sušených nadzemných častí Vinca minor silnú a selektívnu inhibičnú aktivitu namierenú voči BuChE s hodnotou IC50 13,60 ± 0,83 µg/ml avšak proti AChE bol neaktívny (hodnota IC50 >100 µg/ml). Vybraná frakcia VM 323 - 327 (4,72 g) bola rozdelená pomocou stĺpcovej chromatografie na silikagelu stupňovitou elúciou za použitia chloroformu a etanolu a celkovo sa získalo 7 spojených frakcií. Opakovaná preparatívna TLC na silikagelu viedla k izolácii troch zlúčenín; novo vyizolovanej látky SP-1, (-)-pikrininu (SP-2) a deacetylakuammilinu (SP-3). K objasneniu ich štruktúry bola použitá hmotnostná spektrometria (ESI), NMR a optická otáčavosť. Izolované alkaloidy boli podrobené testom inhibičných aktivít voči AChE, BuChE, POP a GSK-3β, ezýmom zohrávajúcim dôležitú úlohu v patofyziológii AD. Ukázalo sa, že všetky izolované látky boli v porovnaní so štandardmi...
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II.
Malý, Lukáš ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Malý, L.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 49 s. Získaný diethyetherový extrakt Fumaria officinalis L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu. Preparativní TLC a krystalizace vedla k izolaci 5 alkaloidů ze zadané frakce. Alkaloidy byly identifikovány na základě GC-MS, 1 H a 13 C NMR spekter, optické otáčivosti a teploty tání jako protopin, kryptopin, (-)-fumaricin, (+)-fumarilin a (+)-parfumidin. Izolované alkaloidy byly testovány na jejich inhibiční aktivitu vůči acetyl- a butyrylcholinesterase a vůči prolyloligopeptidase a tyto aktivity IC50 byly porovnány se standardy. Nejzajímavější aktivitu oproti standardu galanthaminu (IC50 AChE 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BuChE 42,30 ± 1,30 µM) vykazoval protopin (IC50 AChE 345,4 ± 24 µM, IC50 BuChE 239,6 ± 22,3 µM) a kryptopin (IC50 AChE 477,71 ± 47,33 µM, IC50 BuChE 270,82 ± 39,12 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nedosahuje takové inhibiční aktivity jako použité standardy. Nejvyšší inhibiční aktivitu POP vykazoval (+)-parfumidin (IC50 POP 99,2 µM), dosahující vyšší aktivity než přírodní...
|
|
Biological activity of plants secondary metabolites XXX. Basic search of selected taxons on anticholinesterase activity.
Karaščáková, Diana ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Hošťálková, Anna (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutickej botaniky Kandidát: Diana Karaščáková Školiteľ: prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Názov diplomovej práce: Biologická aktivita sekundárnych metabolitov rastlín XXX.; Základný screening vybraných taxónov na anticholinesterázovú aktivitu V rámci skúmania biologickej aktivity sekundárnych metabolitov bolo vybraných 7 taxónov vyšších rastlín. Štúdia sa zaoberá základným výskumom sumárnych a alkaloidných extraktov pripravených z morfologických častí rastlín Annona muricata (listy), Leonotis leonurus (vňať), Turnera diffusa (vňať), Hamelia patens (vňať), Uncaria guianensis (kôra), Allamanda cathartica (koreň) a Morinda citrifolia (listy). Pre objasnenie zastúpenia hlavných typov sekundárnych metabolitov boli pripravené extrakty podrobené dôkazovým reakciám na TLC pomocou desiatich detekčných činidiel. Po detekcii Dragendorffovým činidlom etylacetátových extraktov boli alkaloidy vo významnejšej miere zastúpené iba v Annona muricata. Alkaloidy neboli detegované v kôre rastliny Uncaria guianensis. Pomocou Ellmanovej metódy boli extrakty testované na potenciálnu inhibičnú aktivitu voči ľudským mozgovým cholínesterázam, pre stanovenie boli použité oba rekombinantné enzýmy. Ani v jednom z meraných extraktov neboli prítomné výrazne...
|
|
Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L. II.
Miklová, Veronika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Miklová V.: Cytotoxická a cholinesterasová inhibiční aktivita extraktů z vybraných druhů rodu Centaurea L. II. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020. Diplomová práce zpracovávaná na katedře farmaceutické botaniky FAF UK je součástí screeningu biologicky aktivních sekundárních metabolitů rostlin vybraných taxonů rodů Centaurea L. a Psephellus L. z čeledi Asteraceae. Sekundární metabolity jsou zodpovědné za různé účinky na lidský organismus. Studie se zabývá fytochemickým výzkumem extraktů připravených z natí druhů Centaurea cyanus L., Centaurea stoebe L., Cyanus montanus (L.) Hill, Centaurea benedicta L., Centaurea jacea L., Centaurea macrocephala Muss. Puschk. ex. Willd, Centaurea solstitialis L., Centaurea nigra L., Centaurea scabiosa L., Psephellus bellus (Trautv.) Wagenitz, Centaurea pannonica (Heuff.) Hayek a Psephellus dealbatus (Willd) K. Koch. Pro detekci jednotlivých skupin sekundárních metabolitů byly připravené ethyl-acetátové i sumární ethanolové extrakty podrobeny důkazovým reakcím na tenkovrstvou chromatografii. V souladu s dříve publikovanými výsledky byly v extraktech detekovány seskviterpeny, flavonoidy, kumariny, fenolické sloučeniny, steroidy a terpeny. U extraktů druhu Centaurea benedicta...
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita (inhibice lidských cholinesteras) V.
Vašíčková, Alžběta ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Hošťálková, Anna (oponent)
Vašíčková A.: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita (inhibice lidských cholinesteras) V. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020. Z vybrané frakce VM 215-258 byly izolovány flash chromatografií a následnou preparativní TLC nebo krystalizací 3 alkaloidy. Jejich struktura byla určena na základě hmotnostní spektroskopie, NMR a optické otáčivosti a data byla porovnána s literaturou. Striktamin a minovincinin patří mezi alkaloidy již dříve izolované, alkaloid AV-3 je nově izolovaná sloučenina. Tyto čisté alkaloidy byly testovány na schopnost inhibovat lidské cholinesterasy a jejich inhibiční aktivita byla porovnána se standardy galanthaminem a fysostigminem. Sloučenina AV-3 vykazovala mírnou inhibiční aktivitu vůči BChE (IC50 μM > 86,3 ± 2,3), jinak se jedná o neaktivní sloučeniny, jejich IC50 vůči cholinesterasám byla > než 100 μM. Klíčová slova: Vinca minor L., vinca alkaloidy, minonovincinin, striktamin, Alzheimerova demence, acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa.
|
|
Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita III.
Valová, Dominika ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Breiterová, Kateřina (oponent)
Valová, D.: Alkaloidy Vinca minor L. a jejich biologická aktivita III. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020, 75 s. Alzheimerova choroba (AD) je progresivní neurodegenerativní onemocnění a je nejčastější formou demence. Vzhledem k tomu, že tuto chorobu zatím nelze kauzálně léčit, je důležitý výzkum nových látek. Tato práce se zaměřila na izolaci alkaloidů z extraktu Vinca minor L. jako potenciálního léčiva. Příprava a sloupcová chromatografie sumárního extraktu byla provedena Ing. Miroslavem Ločárkem v rámci jeho doktorského studia. Následná preparativní TLC vedla k izolaci tří sloučenin. Chemické struktury izolovaných alkaloidů byly objasněny optickou otáčivostí, NMR a MS analýzou a porovnáním získaných dat s údaji v literatuře. Jedna ze sloučenin byla stanovena jako (-)-vincin, zbylé 2 sloučeniny jsou nové (nebyly dosud izolované). Tyto sloučeniny byly také testovány na jejich biologickou aktivitu. Vincin, DV-1 a DV-3 byly testovány na schopnost inhibovat acetylcholinesterasu (AChE) a butyrylcholinesterasu (BuChE). Dále byla také testována inhibiční aktivita vincinu a DV-3 vůči prolyl oligopeptidase (POP) a glykogensyntase kinase 3β (GSK-3β). Všechny izolované alkaloidy byly téměř neaktivní vůči AChE a...
|
|
Alkaloidy Centaurea cyanus L. (Asteraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě
Drabbová, Adriana ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Drabbová, A.: Alkaloidy Centaurea cyanus L. (Asteraceae) a jejich biologická aktivita vztažená k Alzheimerově chorobě. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky, Hradec Králové 2020 Z nažek Centaurea cyanus L. byly připraveny ethyl-acetátové a chloroformové alkaloidní extrakty. Z ethyl-acetátového alkaloidního výtřepku byl běžnými chromatografickými metodami (sloupcovou chromatogarfií a preparativní TLC) izolován úplně nový alkaloid AD-1 (Adrabbin). Identifikace alkaloidu byla provedena hmotnostní spektrometrií, NMR analýzou a optickou otáčivostí. Sloučenina AD-1 (Adrabbin) má unikátní indolovou cyklickou strukturu. V rámci diplomové práce byla provedena i LC-MS analýza frakcí získaných flash chromatografií. V těchto frakcích, pozitivně reagujících s Dragendorffovým činidlem, byly detekovány látky odpovídající molekulovým hmotnostem alkaloidů dříve izolovaných z nažek některých druhů rodu Centaurea L. Alkaloid AD-1 (Adrabbin) byl testován na inhibici lidských cholinesteras a prolyloligopeptidasy. Vůči lidským cholinesterasám je látka považována za neaktivní (IC50 > 100 µM), prolyloligopeptidasu alkaloid AD-1 (Adrabbin) inhiboval srovnatelným způsobem jako známý inhibitor berberin (AD-1: IC50 143,0 ± 6,0 µM; berberin: IC50 142,0 ±...
|