Original title: Voltametrie a kapalinová chromatografie cholesterolu, jeho prekurzorů a oxidačních produktů
Translated title: Voltammetry and liquid chromatography of cholesterol, its precursors, and oxidation products
Authors: Kubešová, Jana ; Schwarzová, Karolina (advisor) ; Baluchová, Simona (referee)
Document type: Master’s theses
Year: 2024
Language: cze
Abstract: [cze] [eng]
Steroly patří mezi obtížně elektrochemicky detekovatelné látky. Diplomová práce se věnuje studiu voltametrického chování oxysterolů 25-hydroxycholesterolu a 7-ketocholesterolu na borem dopované diamantové elektrodě a vývoji separační HPLC metody pro směs sterolů se spektrofotometrickou a elektrochemickou detekcí. Studium voltametrického chování zmíněných látek bylo prováděno pomocí cyklické voltametrie a diferenční pulzní voltametrie. Jako nejvhodnější prostředí pro oxidaci obou oxysterolů byla po provedení měření v různých základních elektrolytech zvolena 0,1 mol l−1 kyselina chloristá v acetonitrilu (obsah vody 0,55 %), protože v tomto prostředí poskytují oba oxysteroly nejvyšší a stabilní proudové odezvy. Při potenciálu +1500 mV 25-hydroxycholesterol a při potenciálu +1900 mV 7-ketocholesterol. Tuto látku lze i elektrochemicky redukovat, ale odezva není v prostředí 0,1 mol l−1 kyseliny chloristé reprodukovatelná. Stabilita oxysterolů v tomto prostředí byla potvrzena pomocí UV−VIS spekter. Metodou diferenční pulsní voltametrie byl získán limit detekce 0,82 µmol l−1 pro 25-hydroxycholesterol a 0,66 µmol l−1 pro 7-ketocholesterol. Ve druhé části práce byla vyvinuta metoda pro dělení směsi sterolů na reverzní C18 fázi v mobilní fázi obsahující 50 mmol l−1 chloristan sodný v acetonitrilu s obsahem... Electrochemical detection of sterols is difficult. This thesis aims to study the voltammetric behaviour of selected oxysterols, i.e. 25-hydroxycholesterol and 7-ketocholesterol on the boron-doped diamond electrode. Further, an HPLC method with spectrophotometric and electrochemical detection was developed for separation of selected sterols. The study was performed using cyclic and differential pulse voltammetry. 0.1 mol l−1 perchloric acid in acetonitrile (water content 0.55 %) was chosen as the most suitable electrolyte. 25- hydroxycholesterol provides anodic signal at the potential of +1500 mV and 7-ketocholesterol at +1900 mV in that media. Electrochemical reduction of 7-ketocholesterol was also studied. However, the observed cathodic signal isn't reproducible. The stability of oxysterols in the presence of perchloric acid was confirmed by UV-VIS spectroscopy. Calibration dependence of oxysterols was measured using differential pulse voltammetry and resulted in the limit of detection of 0.82 µmol l−1 for 25-hydroxycholesterol and 0.66 µmol l−1 for 7-ketocholesterol. In the second part of the thesis, an HPLC method was developed for the separation of a sterol mixture on a reversed-phase C18 column using a mobile phase containing 50 mmol l−1 sodium perchlorate in acetonitrile with 0% or 6% water...
Keywords: 25-hydroxycholesterol; 7-ketocholesterol; boron-doped diamond electrode; cholesterol; high performance liquid chromatography; oxysterols; voltammetry; 25-hydroxycholesterol; 7-ketocholesterol; borem dopovaná diamantová elektroda; cholesterol; oxysteroly; voltametrie; vysokoúčinná kapalinová chromatografie

Institution: Charles University Faculties (theses) (web)
Document availability information: Available in the Charles University Digital Repository.
Original record: http://hdl.handle.net/20.500.11956/189670

Permalink: http://www.nusl.cz/ntk/nusl-620243


The record appears in these collections:
Universities and colleges > Public universities > Charles University > Charles University Faculties (theses)
Academic theses (ETDs) > Master’s theses