Název:
Analýza molekulárních drah a interraktomu FUBP3
Překlad názvu:
Analysis of the molecular pathways and interactome of FUBP3
Autoři:
Brychta, David ; Jirkovský, Eduard (vedoucí práce) ; Karahoda, Rona (oponent) Typ dokumentu: Rigorózní práce
Rok:
2023
Jazyk:
eng
Abstrakt: [eng][cze] Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Pharmacology and Toxicology Candidate: David Brychta Supervisor: Assist. Prof. Eduard Jirkovský, PharmD, PhD.; Assist. Prof. Nika M. Lovšin, M.Chem., PhD Title of Diploma Thesis: Analysis of the molecular pathways and interactome of FUBP3 The far upstream element-binding protein 3 (FUBP3) has been recognized by genome-wide association studies to be associated with a higher risk of osteoporotic fracture. The knowledge about this protein and its role in bone biology is quite limited, though. Therefore, we aimed to broaden the horizons and created an overview of FUBP3 protein-protein interactors and possible pathway involvement. The interacting proteins were gathered across multiple databases. Their association with osteoporosis (OP) and bone mineral density (BMD) was assessed using an online tool - OpenTargets Platform. Twelve hits associated with either were then used for qPCR analysis to investigate the influence of FUBP3 knockout. Among FUBP3 interactors were also proteins of cytosolic membraneless organelles - stress granules (SG). Stress conditions were induced and co-localization of SG markers PABPC1 and G3BP1 was carried out using immunostaining and fluorescence microscopy. We were able to identify 75 protein interactors...Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát: David Brychta Školitel: PharmDr. Eduard Jirkovský, PhD.; Nika M. Lovšin, M. Chem., PhD Název diplomové práce: Analýza molekulárních drah a interaktomu FUBP3 Far upstream element-binding protein 3 (FUBP3) byl pangenomickými asociačními studiemi spojován s vyšším rizikem osteoporotických fraktur. Znalosti o tomto proteinu a jeho roli v biologii kostí jsou však značně omezené. Proto jsme si vytyčili za cíl rozšířit obzory a vytvořit přehled proteinů interagujících s FUBP3 a zmapovat možné zapojení do buněčných drah. Interagující proteiny byly shromážděny z různých databázích. Jejich asociace s osteoporózou (OP) a kostní minerální hustotou (BMD) byla hodnocena pomocí online nástroje - OpenTargets Platform. Několik z nich pak bylo použito pro qPCR analýzu k posouzení vlivu knockoutu FUBP3. Mezi interaktory FUBP3 se objevovaly i proteiny cytosolických bezmembránových organel - stresových granulí (SG). Vytvořili jsme stresové podmínky a byla provedena co-lokalizace SG markerů PABPC1 a G3BP1 pomocí imunobarvení a fluorescenční mikroskopie. Podařilo se nám identifikovat 75 proteinů interagujících s FUBP3 spojených buď s OP nebo BMD, z nichž 8 bylo vybráno pro qPCR analýzu. Zjistili jsme, že osteocalcin,...
Klíčová slova:
FUBP3; interaktom; molekulární dráhy; FUBP3; interactome; molecular pathways
host ::
