Název:
Fibroblastový aktivační protein a lokální imunosuprese v glioblastomu
Překlad názvu:
Fibroblast activation protein and local immunosuppression in glioblastoma
Autoři:
Ternerová, Nikola ; Stollinová Šromová, Lucie (vedoucí práce) ; Drbal, Karel (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2020
Jazyk:
eng
Abstrakt: [eng][cze] Glioblastomas (GBMs) are one of the most common malignant tumors in the central nervous system. The tumor microenvironment of GBMs contains malignant and non-malignant stromal cells, whose interactions contribute to several GBMs characteristics, including aberrant angiogenesis, high proliferation rate, and systemic and local immunosuppression. Fibroblast activation protein α (FAP) is a membrane serine protease that is sparsely expressed in healthy tissues but is upregulated in solid tumors, including GBMs. FAP can be expressed by both malignant and non- malignant stromal cells in the tumor microenvironment, and its expression in stromal cells has frequently been linked to impaired anti-tumor immune response. The role of FAP and FAP expressing stromal cells in the infiltration of immune subpopulations into the GBM microenvironment is still unclear. This diploma thesis aimed to develop a flow cytometry protocol for the analysis of immune cell subpopulations present within the tumor microenvironment in wild-type and FAP knockout mouse syngeneic glioblastoma model. Four methods combining mechanical and enzymatic dissociation were evaluated for their ability to preserve cell viability and expression of studied surface molecules using mouse non-tumorous and GBM tissue. The most suitable method for mouse...Glioblastomy (GBM) jsou jedním z nejčastějších maligních nádorů v centrální nervové soustavě. Mikroprostředí GBM obsahuje maligní a nemaligní stromální buňky, jejichž vzájemné interakce přispívají k řadě charakteristik GBM, včetně aberantní angiogeneze, vysoké rychlosti proliferace a systémové a lokální imunosuprese. Fibroblastový aktivační protein α (FAP) je membránová serinová proteáza, která je minimálně exprimována ve zdravých tkáních, ale je upregulována u solidních nádorů, včetně GBM. FAP může být v nádorovém mikroprostředí exprimován maligními i stromálními buňkami, přičemž jeho exprese ve stromálních buňkách je často spojena s narušenou protinádorovou imunitní odpovědí. Význam FAP a FAP exprimujících stromálních buněk v infiltraci imunitních subpopulací do mikroprostředí GBM není jasný. Tato diplomová práce se zaměřila na vývoj postupu využívajíciho průtokovou cytometrii k identifikaci subpopulací imunitních buněk přítomných v nádorovem mikroprostředí v modelu syngenního glioblastomu u myší divokého kmene a myší s genovou inaktivací FAP. Byly vyhodnoceny čtyři metody kombinující mechanickou a enzymatickou disociaci z hlediska jejich schopnosti zachovat životaschopnost buněk a expresi studovaných povrchových molekul s použitím nenádorové tkáně a tkáně myšího GBM. Jako nejvhodnější metodu pro...