Název:
Úloha CCH domény pro lokalizaci a signalizaci adaptorového proteinu CAS
Překlad názvu:
Role of CCH domain in localization and signaling of an adaptor protein CAS
Autoři:
Braniš, Jaroslav ; Rösel, Daniel (vedoucí práce) ; Gregor, Martin (oponent) Typ dokumentu: Diplomové práce
Rok:
2015
Jazyk:
cze
Abstrakt: [cze][eng] Fokální adheze jsou buněčné struktury, které se vytváří při kontaktu buňky s okolním prostředím. Buňka dostává prostřednictvím fokálních adhezí důležité informace o chemickém složení okolního prostředí. Kromě toho jsou fokální adheze nezbytné pro přenos sil, které se vytváří uvnitř buňky a sil, které ovlivňují buňku z vnějšku. CAS je protein fokálních adhezí, u něhož byla prokázána schopnost regulovat aktinový cytoskelet a tím schopnost buněk generovat síly, které jsou potřebné pro deformaci okolního prostředí a migraci buněk. Protein CAS je navíc molekulárním mechanosensorem, který snímá mechanické síly a mění je do biochemické informace, která je přenášena dále do buňky. Lokalizace proteinu CAS ve fokálních adhezích je proto nezbytným předpokladem pro jeho fungování. Pro tuto práci jsme připravili sérii variant proteinu CAS, které jsou pozměněny v oblastech, kde se nachází N- koncová SH3 doména a C-koncová CCH doména, které hrají roli tzv. kotevních domén. Varianty proteinu CAS pak byly použity pro objasnění úlohy kotevních domén pro lokalizaci a dynamiku ve fokálních adhezích a pro schopnost buněk generovat trakční síly. Klíčová slova: CAS, SH3 doména, CCH doména, FAT doména, fokální adheze, lokalizace, dynamikaFocal adhesions are cell structures that are formed between cell and the surrounding environment. The cell receives through focal adhesions important information about the chemical composition of the surrounding environment. In addition, focal adhesions are crucial for the transmission of forces that are generated inside the cell and the forces that affect the cell from the outside. CAS is the focal adhesion protein, which has been shown to regulate the actin cytoskeleton and the ability of the cells to generate forces needed for the surrounding environment deformation and cell migration. CAS is additionally molecular mechanosensor which senses mechanical forces and convert them into biochemical information, which is transmitted further into the cell. Localization of CAS in focal adhesions is necessary for its functioning. For this work, we have prepared a set of variants of CAS protein which was mutated in regions where are situated the N-terminal SH3 domain and a C-terminal CCH domain, which play the role of so-called anchoring domains. CAS protein variants were used to elucidate the role of anchoring domains for the localization and dynamics of CAS in focal adhesions and for the ability of the cells to generate traction forces. Keywords: CAS, SH3 domain, CCH domain, FAT domain, focal adhesions,...