|
|
Studium aktivity enzymových a nízkomolekulárních antioxidačních systémů
Macuchová, Simona ; Kráčmar, Stanislav (oponent) ; Čertík, Milan (oponent) ; Márová, Ivana (vedoucí práce)
Oxidační procesy hrají v buňce důležitou roli ve fyziologických i patologických procesech. Rovnováha těchto procesů je zajišťována vzájemně kooperujícími antioxidačními systémy, pro jejichž správnou činnost v organismu je nutný dostatečný obsah látek s antioxidačními účinky. Předložená práce je zaměřena na vývoj a optimalizaci metod stanovení významných neenzymových a enzymových antioxidantů a testování celkové antioxidační kapacity vybraného biologického materiálu. Byly optimalizovány metody extrakce a stanovení obsahu vitaminu E a karotenoidů a stanovení aktivit superoxiddismutasy, katalasy, peroxidasy a lipoxygenasy ve sladovnickém ječmeni a ve sladu. Pro analýzu obsahu vitaminu E, fenolických sloučenin a karotenoidů byly použity RP-HPLC a HPLC/ESI-MS, ke stanovení enzymových aktivit byly zvoleny spektrofotometrické metody. Pro analýzu aktivit katalasy a lipoxygenasy byly vyvinuty nové kolorimetrické metody a porovnány s přímými metodami v UV oblasti. Aktivita SOD byla stanovována komerčním diagnostickým setem. Pro peroxidasu byla zavedena kolorimetrická metoda. U enzymových metod byly stanoveny některé kinetické parametry. Optimalizované metody byly použity při analýzách antioxidantů v rostlinném materiálu – v ječmeni a ve sladu – v souborech vzorků o šesti odrůdách, pěstěných na čtyřech různých lokalitách po dobu dvou let. Obsah individuálních antioxidantů se lišil v závislosti na odrůdě, většinou však nebyly nalezeny významné rozdíly v hladinách v závislosti na pěstební lokalitě. Patrně největší vliv na hladiny nízkomolekulárních i enzymových antioxidantů mají klimatické podmínky v dané lokalitě; oxidační procesy jsou ovliňovány jednak množstvím vláhy, jednak slunečním svitem, který indukuje oxidační procesy v pěstovaných rostlinách. Aktivita antioxidantů v obilkách ječmene prudce narůstá během procesu sladování; za zvýšené teploty a vlhkosti dochází nejprve k aktivaci enzymových systémů včetně těch antioxidačních. V obilce probíhá zvýšená metabolická aktivita, během níž lze předpokládat zvýšenou tvorbu radikálů; za tímto účelem mohou být aktivovány ostatní antioxidační systémy, aby ochránily buňky před poškozením oxidačním stresem. V další části práce byly zavedené metody využity při klinických studiích hodnotících vliv exogenně přijímaných antioxidantů na metabolický a antioxidační status lidského organismu. První klinická studie byla zaměřena na sledování vlivu suplementace potravinovým doplňkem obsahujícím nenasycené mastné kyseliny a vitamin E na metabolismus jedinců s hyperlipidemií. Po tříměsíčním podávání preparátu došlo ke zlepšení profilu parametrů metabolismu lipidů a ke zvýšení hladin sérových antioxidantů. Druhá studie sledovala hladiny enzymových a neenzymových antioxidantů u zdravých jedinců po dočasně zvýšeném příjmu potravin bohatých na antioxidanty. Po dvouměsíční suplementaci došlo k mírnému nárůstu obsahu fenolických látek v plazmě. Celková antioxidační kapacita ani aktivity enzymových antioxidantů nebyly ovlivněny. Z výsledků klinických studií je patrné, že doplňování antioxidantů v přirozené formě nebo ve formě potravinového doplňku neovlivňuje výrazně metabolismus zdravých jedinců, ale u jedinců trpících chronickými civilizačními chorobami může vhodně zvolená suplementace pozitivně ovlivnit jejich zdravotní stav. Výsledky práce potvrzují, že zavedené metody jsou dobře použitelné k analýze parametrů posuzujících antioxidační stav organismu a jsou vhodné i k monitoringu exogenního příjmu antioxidantů.
|
|
| |
|
|
Studium aktivity enzymových a nízkomolekulárních antioxidačních systémů
Macuchová, Simona ; Kráčmar, Stanislav (oponent) ; Čertík, Milan (oponent) ; Márová, Ivana (vedoucí práce)
Oxidační procesy hrají v buňce důležitou roli ve fyziologických i patologických procesech. Rovnováha těchto procesů je zajišťována vzájemně kooperujícími antioxidačními systémy, pro jejichž správnou činnost v organismu je nutný dostatečný obsah látek s antioxidačními účinky. Předložená práce je zaměřena na vývoj a optimalizaci metod stanovení významných neenzymových a enzymových antioxidantů a testování celkové antioxidační kapacity vybraného biologického materiálu. Byly optimalizovány metody extrakce a stanovení obsahu vitaminu E a karotenoidů a stanovení aktivit superoxiddismutasy, katalasy, peroxidasy a lipoxygenasy ve sladovnickém ječmeni a ve sladu. Pro analýzu obsahu vitaminu E, fenolických sloučenin a karotenoidů byly použity RP-HPLC a HPLC/ESI-MS, ke stanovení enzymových aktivit byly zvoleny spektrofotometrické metody. Pro analýzu aktivit katalasy a lipoxygenasy byly vyvinuty nové kolorimetrické metody a porovnány s přímými metodami v UV oblasti. Aktivita SOD byla stanovována komerčním diagnostickým setem. Pro peroxidasu byla zavedena kolorimetrická metoda. U enzymových metod byly stanoveny některé kinetické parametry. Optimalizované metody byly použity při analýzách antioxidantů v rostlinném materiálu – v ječmeni a ve sladu – v souborech vzorků o šesti odrůdách, pěstěných na čtyřech různých lokalitách po dobu dvou let. Obsah individuálních antioxidantů se lišil v závislosti na odrůdě, většinou však nebyly nalezeny významné rozdíly v hladinách v závislosti na pěstební lokalitě. Patrně největší vliv na hladiny nízkomolekulárních i enzymových antioxidantů mají klimatické podmínky v dané lokalitě; oxidační procesy jsou ovliňovány jednak množstvím vláhy, jednak slunečním svitem, který indukuje oxidační procesy v pěstovaných rostlinách. Aktivita antioxidantů v obilkách ječmene prudce narůstá během procesu sladování; za zvýšené teploty a vlhkosti dochází nejprve k aktivaci enzymových systémů včetně těch antioxidačních. V obilce probíhá zvýšená metabolická aktivita, během níž lze předpokládat zvýšenou tvorbu radikálů; za tímto účelem mohou být aktivovány ostatní antioxidační systémy, aby ochránily buňky před poškozením oxidačním stresem. V další části práce byly zavedené metody využity při klinických studiích hodnotících vliv exogenně přijímaných antioxidantů na metabolický a antioxidační status lidského organismu. První klinická studie byla zaměřena na sledování vlivu suplementace potravinovým doplňkem obsahujícím nenasycené mastné kyseliny a vitamin E na metabolismus jedinců s hyperlipidemií. Po tříměsíčním podávání preparátu došlo ke zlepšení profilu parametrů metabolismu lipidů a ke zvýšení hladin sérových antioxidantů. Druhá studie sledovala hladiny enzymových a neenzymových antioxidantů u zdravých jedinců po dočasně zvýšeném příjmu potravin bohatých na antioxidanty. Po dvouměsíční suplementaci došlo k mírnému nárůstu obsahu fenolických látek v plazmě. Celková antioxidační kapacita ani aktivity enzymových antioxidantů nebyly ovlivněny. Z výsledků klinických studií je patrné, že doplňování antioxidantů v přirozené formě nebo ve formě potravinového doplňku neovlivňuje výrazně metabolismus zdravých jedinců, ale u jedinců trpících chronickými civilizačními chorobami může vhodně zvolená suplementace pozitivně ovlivnit jejich zdravotní stav. Výsledky práce potvrzují, že zavedené metody jsou dobře použitelné k analýze parametrů posuzujících antioxidační stav organismu a jsou vhodné i k monitoringu exogenního příjmu antioxidantů.
|
|
|
Zdravotně sociální rizika u dětí s predispozicí k metabolickému syndromu
SLADKÁ, Alena
Metabolický syndrom , (MS) byl poprvé definován v roce 1988 Reavenem ten jej definoval jako hormonálně-metabolický syndrom X se symptomy inzulínové rezistence (IR), hyperinzulinismu, hypertenze , s laboratorně prokázanou vyšší hodnotou lipoproteidů VLDL, nižší hodnotou HDL cholesterolu a nižší hodnotou LDL cholesterolu. Manifestace MS v dospělosti bývá celou řadou odborníků spojována s obezitou v době dětství a dospívání. V oblasti sociálních vztahů mají obézní děti značné problémy. Obézní děti bývají často terčem škádlení, posměchu, verbální šikany, vztahové šikany, fyzické šikany, sexuálního obtěžování, kyberšikany. Prvním cílem práce je zjistit, zda obezita ( androidního typu) v dětském a adolescenčním věku (10 - 18 let) BMI vyšším než 28, s obvodem pasu u chlapců 103 a u dívek 93, celkovým cholesterolem 6,5 a krevním tlakem 130/70 jsou predispozice manifestace MS v dospělosti a jaké jsou zdravotní a sociální dopady obezity a rozvíjejícího se MS v dětském věku. Druhým cílem práce je zjistit u pacientů s již rozvinutým MS, zda měli již od dětství predispozici k manifestaci onemocnění, jaké jsou zdravotní a sociální dopady MS na jejich život. První výzkumný soubor tvořilo deset dětí ve věku od 10- 18 let s predispozicí k manifestaci MS. Metody, jenž vedly k určeným cílům práce: Sepsání zdravotní a rodinné anamnézy. U všech deseti dětí ve věku od 10- 18 let, byla opakovaně v průběhu 6. měsíců kontrolována tělesná hmotnost, opakovaně bylo prováděno měření obvodu pasu, měření krevního tlaku a hladiny celkového cholesterolu v krvi. Naměřené hodnoty byly zapisovány do tabulek. Ve strukturovaném rozhovoru se zjišťovalo, jaké mají obézní děti s postupně se rozvíjejícím MS vztahy s vrstevníky, zda jsou terčem posměchu a šikany a jaké mají další problémy spojené se svým onemocněním. Součastně byly v dotazníkovém šetření s rodiči dětí zjišťovány stravovací zvyklosti a životní styl rodiny. V metabolické poradně bylo pomocí dotazníkového šetření a strukturovaných rozhovorů zjišťováno, kdy se u pacientů objevily první manifestace MS, zda byli obézní již v dětství a jaké zdravotní a sociální dopady má MS na jejich současný život. Výzkumný soubor tvořilo 10 pacientů z metabolické poradny. Po analýze všech zjištěných dat a po rozboru zdravotní anamnézy byla prokázána u 60% dětí z výzkumného souboru vyšší nemocnost ( potíže s dýcháním, častější infekce horních cest dýchacích, snadnější únava při fyzické námaze). 60% dětí z uvedeného výzkumného souboru má vážné problémy s navazováním vztahů s vrstevníky, trpí verbální i fyzickou šikanou. U dospělých pacientů z metabolické poradny bylo zjištěno, že 40% dotazovaných osob mělo problémy s nadváhou již v dětství. Diabetem 2. typu trpí všichni dotazovaní. Dva z dotazovaných jsou kvůli MS v invalidním důchodu. 90% dotazovaných uvedla, že pravidelně navštěvují lékaře a musí pravidelně užívat léky. Tyto skutečnosti mají za následek i zhoršenou finanční situaci dotazovaných ( nižší příjem, zvýšené výdaje za léky, náklady na cestu k lékaři) Dva respondenti uvedli, že byli kvůli svému onemocnění diskriminováni i ze strany zdravotnického personálu, neuvedli však o jaký druh diskriminace se jednalo. Z dotazníkového šetření mezi dospělými s MS bylo zjištěno, že pouze 1 dotazovaná považuje příčinu vzniku MS svůj předchozí životní styl. Velikost výzkumného zůstal u 10 dětí a 10 dospělých s MS, neboť výzkumnou technikou "sněhové koule" nebyly v tomto souboru zjištěny žádné další nové skutečnosti, které by bylo nutné ověřovat u dalších osob.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.