|
|
Cytotoxicita semisyntetických derivátů prenylflavonoidů v buňkách prsního karcinomu
Hupák, Martin ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Martin Hupák Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Martin Ambrož, Ph.D. Název diplomové práce: Cytotoxicita semisyntetických derivátů prenylflavonoidů v buňkách prsního karcinomu Podstatná část úmrtí v lidské populaci je způsobena nádorovými onemocněními. V České republice je karcinom prsu u žen nejvíce zastoupeným nádorovým onemocněním. Farmakologická léčba nádorových onemocnění je často provázena vznikem rezistence, proto jsou stále hledány nové možnosti léčby a jedním ze zdrojů nových struktur jsou přírodní látky. Prenylflavonoidy obsažené v chmelu otáčivém (Humulus lupulus, Cannabaceae), např. xanthohumol, isoxanthohumol, 8-prenylnaringenin, 6-prenylnaringenin, mají široké spektrum biologických účinků. Jedním z nich je účinek protinádorový. Tato diplomová práce se zabývala určením cytotoxického potenciálu semisyntetických prenylovaných derivátů flavonoidu naringeninu v buněčné linii prsního karcinomu MCF-7. Mezi metody, které byly použity, patřilo sledování cytotoxicity metodou s neutrální červení, analýza apoptózy a nekrózy pomocí průtokové cytometrie, stanovení mitochondriálního membránového potenciálu pomocí sondy JC-1 a analýza morfologických změn buněk pomocí konfokální...
|
|
|
Optimalizace přípravy jaterních sferoidů
Vojtěchová, Tereza ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Bc. Tereza Vojtěchová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Martin Ambrož, Ph.D. Název diplomové práce: Optimalizace přípravy jaterních sféroidů V preklinickém hodnocení léčiv hrají nezastupitelnou roli různé jaterní in vitro modely. Jedním z nich jsou multicelulární jaterní sféroidy. Jedná se o 3D buněčné agregáty, které vznikají procesem buněčné agregace. Jsou využívány ve vývoji léčiv a představují slibný nástroj pro identifikaci nových cílů a screening léčiv na různá jaterní onemocnění. Cílem této diplomové práce bylo zavést a optimalizovat přípravu jaterních sféroidů metodou "forced- floating". Pro izolaci hepatocytů a přípravu sféroidů byly použity játra samců a samic potkana kmene Wistar. Při izolaci hepatocytů jsme čelili problémům s jejich nízkou viabilitou, proto jsme se postup izolace snažili optimalizovat. Přesto se nám podařilo získat pouze malé množství hepatocytů s dostatečnou viabilitou k následnému vytvoření sféroidů. Vytvořené sféroidy jsme inkubovali po dobu 7 a 14 dnů s různými lipogenními činidly a sledovali jsme jejich viabilitu pomocí měření produkce adenosintrifosfátu (ATP). Při inkubaci sféroidů s lipogenními substráty po dobu 7 dnů nedošlo k zásadním...
|
|
|
Cytotoxicita semisyntetických derivátů prenylflavonoidů v buňkách prsního karcinomu
Hupák, Martin ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Martin Hupák Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: PharmDr. Martin Ambrož, Ph.D. Název diplomové práce: Cytotoxicita semisyntetických derivátů prenylflavonoidů v buňkách prsního karcinomu Podstatná část úmrtí v lidské populaci je způsobena nádorovými onemocněními. V České republice je karcinom prsu u žen nejvíce zastoupeným nádorovým onemocněním. Farmakologická léčba nádorových onemocnění je často provázena vznikem rezistence, proto jsou stále hledány nové možnosti léčby a jedním ze zdrojů nových struktur jsou přírodní látky. Prenylflavonoidy obsažené v chmelu otáčivém (Humulus lupulus, Cannabaceae), např. xanthohumol, isoxanthohumol, 8-prenylnaringenin, 6-prenylnaringenin, mají široké spektrum biologických účinků. Jedním z nich je účinek protinádorový. Tato diplomová práce se zabývala určením cytotoxického potenciálu semisyntetických prenylovaných derivátů flavonoidu naringeninu v buněčné linii prsního karcinomu MCF-7. Mezi metody, které byly použity, patřilo sledování cytotoxicity metodou s neutrální červení, analýza apoptózy a nekrózy pomocí průtokové cytometrie, stanovení mitochondriálního membránového potenciálu pomocí sondy JC-1 a analýza morfologických změn buněk pomocí konfokální...
|
|
| |
|
|
Účinek flubendazolu na glioblastoma multiforme in vitro a in vivo.
Šteigerová, Monika ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Macháček, Miloslav (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Monika Šteigerová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D., RNDr. Veronika Skarková, Ph.D. Název diplomové práce: Účinek flubendazolu na glioblastoma multiforme in vitro a in vivo. Glioblastoma multiforme (GBM) představuje nejčastější maligní gliom centrální nervové soustavy. Průměrná doba přežití se i přes systematickou komplexní terapii pohybuje okolo 14 měsíců. Anthelmintikum flubendazol (FLU), potencionální protinádorové léčivo, je nyní pro své antiproliferační účinky zkoumáno na několika typech nádorových buněk (1). Cílem našeho projektu bylo vyhodnotit vliv FLU na buněčné linie GBM U118MG (stabilizovaná buněčná linie) a GBM69 (primolinie) in vitro, na růst nádorů in vivo, a jeho efekt na úrovni mRNA a proteinů vybraných markerů epitelo-mesenchymální tranzice (EMT) a markerů rezistence. Jako pozitivní kontrola bylo použito cytostatikum první volby, temozolomid (TMZ). Obě testované buněčné linie byly v porovnání s TMZ citlivější na FLU. FLU u těchto linií také oproti TMZ způsobil výraznější morfologické změny. FLU signifikantně ovlivňoval hladiny mRNA a proteinů E-kadherinu, N-kadherinu, vimentinu a stejně tak i MGMT a MRP-1. Subkutánní ektopická implantace buněk U118MG do imunodeficitního...
|
|
|
Epigenetické změny vyvolané obezitou a jejich dědičnost
Roušová, Lucie ; Skálová, Lenka (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Obezita, chronické onemocnění charakterizované ukládáním nadměrného množství tuku v těle, je příčinou vzniku mnoha dalších komorbidit. V posledních letech se toto onemocnění objevuje u čím dál mladších lidí. Na rozvoji obezity se podílí jak genetické, tak enviromentální faktory. Pojítkem mezi těmito faktory by mohly být epigenetické modifikace. Epigenetické změny jsou změny ve fenotypu člověka beze změny jeho genotypu. Tyto změny, mezi které se řadí methylace DNA a modifikace histonů, tedy ovlivňují expresi a funkci genů, beze změn sekvence DNA. Cílem mé rešeršní bakalářské práce bylo vyhledat, které epigenetické změny jsou spojeny s obezitou a jaké geny jsou takto ovlivněny. Zaměřila jsem se jak na změny, které obezita vyvolává, tak na změny, které zapřičiňují vznik obezity. Dále jsem se snažila najít informace o tom, zda jsou tyto modifikace genomu dědičné a kolik generací je jimi případně ovlivněno. Z dostupných informací je zřejmé, že existuje spoustu epigenetických modifikací, které jsou nějakým způsobem spojeny s obezitou. Například byly zjištěny změny v genech proopiomelanokortinu, tapsinu či inzulínu podobnému růstovému faktoru 2. Některé modifikace jsou spojeny s otcovskou obezitou (např. gen hypoxií indukovatelného faktoru 3 alfa), ale mnohem více jich vzniká v důsledku mateřské obezity,...
|
|
|
Biological activity of antioxidant compounds in monocytes THP-1
Hájek, Jan ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Univezita Roma Tre Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biologie Katedra biochemických věd Kandidát: Jan Hájek Školitel: PharmDr. Iva Boušová, PhD. Prof. Sandra Incerpi, Prof. Jens Z. Pedersen Název diplomové práce: Biologická aktivita antioxidačních látek v monocytech THP-1 Tato práce byla vytvořena na základě pokusů provedených v Laboratoři fyziologie na Univerzitě Roma Tre v Římě pod vedením prof. Sandry Incerpi. Tým laboratoře se zabývá studiem antioxidantů s různou strukturou a hodnocením jejich schopnosti zabránit tvorbě reaktivních forem kyslíku (ROS). Tyto reaktivní sloučeniny jsou nezbytné v mnoha fyziologických pochodech, ale mohou mít také škodlivé účinky a podílet se na rozvoji rozličných onemocnění. V této práci jsem se zabýval studiem antioxidačních vlastností různých polyfenolických látek (mosloflavon, negletein, 5,6-dihydroxyflavon, bajkalein, kyselina galová a sloučenina 1625) v buněčné kultuře lidských monocytů THP-1 a také v in vitro testu. Použil jsem tři různé metody: stanovení intracelulárních ROS (dichlorofluoresceinový test), test cytotoxicity a elektronovou paramagnetickou rezonanční spektroskopii (EPR). Mosloflavon neukázal žádnou vychytávací aktivitu ani v buněčné linii ani během EPR. Naproti tomu negletein měl dobrou vychytávací...
|
|
| |
|
| |
|
|
Investigation of sugar modified pyrimidine nucleosides as potential inhibitors of Thymidine (TP) and Uridine (UP) phosphorylasis
Růžičková, Markéta ; Wsól, Vladimír (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
1 Abstrakt diplomové práce RŮŽIČKOVÁ M.; STUDIUM PYRIMIDINOVÝCH NUKLEOSIDŮ MODIFIKOVANÝCH NA CUKERNÉ ČÁSTI JAKO POTENCIÁLNÍCH INHIBITORŮ TYMIDIN (TP) A URIDIN (UP) FOSFORYLÁZY Klíčová slova: uridinfosforyláza, tymidinfosforyláza, nukleosid, inhibitor, protinádorová chemoterapie, substrátová specifita Práce se zabývá studiem nových potenciálních inhibitorů rekombinantní tymidinfosforylázy a uridinfosforylázy z bakterií E. coli a Salmonella typhimurium. Hlavním předmětem studia je určení kinetických parametrů přirozených substrátů (tymidinu a uridinu) pro rekombinantní TP a UP, určení role fosfátového aniontu v enzymatické reakci a a hledání nových inhibitorů TP a UP. Studium substrátové specifity a aktivity TP a UP za různých reakčních podmínek je důležité pro získání lepšího pohledu na jejich funkce a pro vytvoření nových struktur potenciálních inhibitorů. Stanovení Michaelisovy konstanty KM a limitní rychlosti Vmax bylo provedeno s využitím spektrofotometru Varian Cary-300 Bio. Pro grafické znázornění kinetických dat jsme využili Lineweaver-Burkův diagram. Dalším bodem mé práce bylo stanovení aktivity enzymů a jejich substrátové specifity pro některé pyrimidinové analogy pomocí HPLC analýzy reakčních směsí. Testované sloučeniny, 2'-O-metyluridin, 1-(ß-D-fruktofuranosyl)uracil, 2'- deoxy-2'-fluorouridin,...
|
host ::
RSS.