|
Analýza inhibitorů jaderného exportu a importu rostlin
Haltuf, Josef ; Schwarzerová, Kateřina (vedoucí práce) ; Angelini, Jindřiška (oponent)
Eukaryotické buňky mají jádro, kde je uložena DNA Transport mezi jádrem a cytoplazmou je nesmírně důležitý pro zajištění genové exprese i pro kontrolu a regulaci jaderných procesů a Během interfáze jsou do a z jádra transportovány skrze jaderné póry tisíce ukleocytoplasmatický transport je nezbytný pro životaschopnost eukaryotických organismů Transport mezi jádrem a cytoplazmou je přísně regulován a pro této regulace se využívají specifické inhibitory jaderného transportu Zatímco ve výzkumu živočišných buněk jsou inhibitory jaderného transportu hojně studovány, aktivita většiny z nich nebyla testována v rostlinných buňkách. této práci jsou proto testovány jaderného exportu Leptomycin B a inhibitory jaderného importu Importazol v kořenech rostlin izolovaných buňkách tabáku BY Součástí této práce je též testování vhodných markerů pro transport mezi jádrem nejlepší se ukázaly být GFP GFP, protože jsou stabilní a mohou samovolně difundovat skrze jaderné póry. Díky těmto markerům jsem stanovil účinné kořenů 50 nM u izolovaných buněk) a IMZ μM u kořenů IVR se ukázal být na jaderný import neúčinný
|
|
Translokace virů přes jaderný pór do buněčného jádra
Išler, Lukáš ; Forstová, Jitka (vedoucí práce) ; Přikryl, David (oponent)
Pro replikační cyklus většiny DNA a některých RNA virů je životně důležité, aby pronikly do jádra hostitelské buňky. Při tomto kroku však musejí překonat jadernou membránu, kterou lze v interfázi buněčného cyklu projít pouze prostřednictvím jaderných póru. Jednotlivé virové čeledi vyvinuly odlišné strategie, jak přes jaderný pór proniknout. V této práci, shrnující poznatky o průniku virů přes jaderný pór je ukázáno, že kromě interakce s transportními receptory interagují virové částice i přímo s některými proteiny jaderného póru neboli nukleoporiny (NUPs). Interakcí s virovými částicemi se účastní konkrétně jedna ze skupin nukleoporinů, tzv. FG NUPs, jejichž sekvence obsahuje přirozeně neuspořádané domény bohaté na repetice fenylalanin-glycin (FG), které vytvářejí selektivní bariéru jaderného póru. Jedná se hlavně o nukleoporiny NUP153, NUP214 a NUP358. Interakce virových částic s těmito nukleoporiny jim umožní tuto bariéru překonat a dopravit tak virový genom do jádra hostitelské buňky. Jedná se tedy o esenciální krok v rané fázi virového infekčního cyklu. Klíčová slova: buněčné jádro, jaderný transport, jaderný pór, nukleoporiny, vstup viru do jádra, NUP153, NUP214, NUP358
|
|
Role importinů v reprodukci
Mertová, Irem ; Frolíková, Michaela (vedoucí práce) ; Bubeníčková, Filipa (oponent)
Importiny jsou proteiny ze skupiny karyoferinů, které zajišťují transport proteinů z cytoplazmy do jádra, a to jak v somatických buňkách, tak v gametách. V gametách hraje transport specifických transkripčních faktorů a jiných proteinů do jádra významnou roli a během reprodukce savců ovlivňuje klíčové děje. U savců je reprodukce zprostředkována procesem pohlavního rozmnožování. V rámci tohoto děje dochází u každého z rodičů ke vzniku haploidní gamety, ty později během finální fáze oplození splývají a dávají vzniknout diploidní zygotě. Genová exprese v gametách se odgenové exprese somatických buněk významně liší. V gametách dochází k pozastavení translace a specifické proteiny jsou exprimovány jen v určitých stádiích vývoje buňky. Proteiny určené k transportu do jádra obsahují odlišné jaderné lokalizační signály, ty jsou rozeznávány různými druhy importinů. Na základě studia rozdílů v expresi jednotlivých druhů importinů v různých fázích vývoje gamet, tak lze vyvozovat jejich role v těchto procesech. Role importinů byla prokázána jak v gametogenezi, tak v diferenciaci kmenových buněk a maturaci zárodečných buněk. Navíc se ukazuje, že importiny mají úlohu i v obraně samčích pohlavních buněk proti oxidativnímu stresu.
|