|
|
Vplyv vybraných endokrinných disruptorov na metabolismus lipidov v pečeňových bunkových modeloch
Konopová, Veronika
Endokrinní disruptory (EDC) jsou exogenní sloučeniny, které zasahují do endokrinního systému a následně vyvolávají toxické účinky. Jedním z možných důsledků jejich působení v organismu je také negativní ovlivnění metabolických procesů, vedoucí k rozvoji metabolických onemocnění, zahrnujících i steatózu jater. Pro výzkum v této oblasti je stále důležitější dostupnost vhodných buněčných modelů in vitro. V rámci této práce byla posuzována možnost využití buněčného modelu imortalizovaných lidských hepatocytů, buněčné linie MIHA, pro detekci aktivace jaderných receptorů PXR, LXRa a PPARa, které jsou možným cílem některých EDC. Byla studována především indukce exprese cílových genů těchto receptorů, CYP3A4, SCD, PDK4, CPTT1A, s cílem porovnat citlivost buněk MIHA s běžně používaným buněčným modelem jaterních buněk, linií HepaRG. Výsledky ukázaly, že i když je v buňkách MIHA po působení některých EDC, či modelových ligandů jaderných receptorů pozorována indukce některých cílových genů některých jaderných receptorů, obecně se tento buněčný model jeví jako méně vhodný pro studium účinků EDC než buněčná linie HepaRG. Linie MIHA však umožňuje studium látek aktivujících receptor PPARa, který je významným regulátorem metabolismu mastných kyselin v jaterní tkáni.
|
|
|
Screening of selected alkaloids of Fumariaceae and Amaryllidaceae families on Farnesoid X receptor and the G protein-coupled bile acid receptor 1
Hutníková, Miriama ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študent/ka: Miriama Hutníková Školiteľ: prof. PharmDr. Petr Pávek, PhD. Názov diplomovej práce: Skríning aktivity vybraných alkaloidov z čeľadí Fumariaceae a Amaryllidaceae na Farnezoidný X receptor a Receptor žlčových kyselín spojený s G proteínom 1 Farnesoidní X receptor (FXR) a receptor žlučových kyselin spojený s G proteinem 1 (TGR5) výrazně ovlivňují metabolické děje v lidském organismu. Byla objevena i role FXR při neuronální apoptóze u Alzheimerovy choroby (AD). Možná strukturní podobnost malých lipofilních molekul vážících se na tyto receptory a alkaloidů vyskytujících se v rostlinách Corydalis cava a Narcissus pseudonarcissus, a zároveň bohaté využití těchto rostlin v lidové medicíně, představuje potenciální terapeutický cíl těchto molekul. V našich skríningových metodách jsme provedli testy pomocí luciferázové genové reportérové eseje na určení schopnosti zkoumaných alkaloidů interagovat s FXR a TGR5 receptory v buněčné linii HepG2. Mnoho derivátů prokázalo silnou schopnost antagonizovat FXR a TGR5 aktivovaný kyselinou obeticholovou (OCA), resp. litocholovou (LCA) v této eseji. Naopak některé testované látky prokázaly schopnost potencovat účinky OCA nebo LCA. Testy na cytotoxicitu byly provedeny k...
|
|
|
Screening of selected alkaloids of Fumariaceae and Amaryllidaceae families on Farnesoid X receptor and the G protein-coupled bile acid receptor 1
Hutníková, Miriama ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakológie a toxikológie Študent/ka: Miriama Hutníková Školiteľ: prof. PharmDr. Petr Pávek, PhD. Názov diplomovej práce: Skríning aktivity vybraných alkaloidov z čeľadí Fumariaceae a Amaryllidaceae na Farnezoidný X receptor a Receptor žlčových kyselín spojený s G proteínom 1 Farnesoidní X receptor (FXR) a receptor žlučových kyselin spojený s G proteinem 1 (TGR5) výrazně ovlivňují metabolické děje v lidském organismu. Byla objevena i role FXR při neuronální apoptóze u Alzheimerovy choroby (AD). Možná strukturní podobnost malých lipofilních molekul vážících se na tyto receptory a alkaloidů vyskytujících se v rostlinách Corydalis cava a Narcissus pseudonarcissus, a zároveň bohaté využití těchto rostlin v lidové medicíně, představuje potenciální terapeutický cíl těchto molekul. V našich skríningových metodách jsme provedli testy pomocí luciferázové genové reportérové eseje na určení schopnosti zkoumaných alkaloidů interagovat s FXR a TGR5 receptory v buněčné linii HepG2. Mnoho derivátů prokázalo silnou schopnost antagonizovat FXR a TGR5 aktivovaný kyselinou obeticholovou (OCA), resp. litocholovou (LCA) v této eseji. Naopak některé testované látky prokázaly schopnost potencovat účinky OCA nebo LCA. Testy na cytotoxicitu byly provedeny k...
|
|
|
Interakce polymorfismů genu PPARG se složkami diety v patogenezi diabetu mellitu 2. typu
Petrů, Karolína ; Šeda, Ondřej (vedoucí práce) ; Schierová, Michaela (oponent)
Diabetes mellitus 2. typu je multifaktoriální onemocnění, na jehož patogenezi se podílejí interakce mezi dědičnými dispozicemi a faktory vnějšího prostředí. Mezi geny, významně ovlivňujícími patofyziologické procesy vedoucí k manifestaci diabetu mellitu 2. typu, patří i nukleární receptor PPARG (peroxisome proliferator-activated receptor gamma). Z metaanalýz lidských studií vyplynulo, že několik běžných polymorfismů tohoto genu je zapojeno do interakcí s faktory prostředí, především dietou, fyzickou aktivitou a medikací. Cílem této bakalářské práce je shrnutí dosavadních poznatků o nutrigenetických interakcích, kterých se účastní polymorfismy v genu PPARG a konkrétní kvalitativní a kvantitativní parametry diety ve vztahu k patogenezi diabetu mellitu 2. typu.
|
|
|
Attempts on chromatin immunoprecipitation with \kur{C. elegans} nuclear receptor NHR-25
POSPĚCH, Alexandr
The aim of the work presented in this thesis was to establish chromatin immunoprecipitation method in our laboratory as a tool to study target genes of the nuclear receptor NHR-25 in C. elegans. Once the method is established, it will be also useful for studies of other DNA binding proteins. ChIP was performed in transiently transfected cells HEK293 and analyzed using PCR and qPCR. Although ChIP is typically used to find authentic target genes in the cell or in organisms, testing protein-DNA interactions by ChIP in transient transfection system (by transfecting both the expression vector of the protein of interest and a vector containing potential binding sequence/promoter of the protein) can be useful as it serves as a relatively quick tool to confirm the direct binding. Since the detection is by PCR, this method is sensitive yet less costly non radioactive method to analyze protein-DNA interaction. For the first step towards ChIP in C. elegans; pulling down tagged protein directly from the worm was also performed as a preparation for in vivo analysis of NHR-25 regulated genes.
|
host ::
RSS.