|
|
Analysis of PKCα Influence on Cancer Cell Invasion.
Szabadosová, Emília ; Brábek, Jan (vedoucí práce) ; Nováková, Olga (oponent)
8 Abstrakt Proteín kináza C alfa (PKCα) patrí do rodiny serín/treonínových kináz. Jej úloha je dôležitá v regulácii bunkovej polarity, sekrécie proteínov, apoptózy, proliferácie, diferenciácie a v tumorogenéze. Jej dôležitosť bola taktiež preukázaná v regulácii migrácie a invazivity nádorových buniek. Cieľom tejto práce bolo preskúmať potenciálnu úlohu PKCα v amoeboídnej invazivite nádorových buniek a jej vplyv na nádorovú morfológiu a invazivitu. Preukázalo sa, že vyššia expresia PKCα viedla k mezenchymálno-amoeboídnej tranzícii mezenchymálnych nádorových línií K2 a MDA, ktorá bola sprevádzaná s poklesom schopnosti nádorových buniek invadovať v 3D prostredí kolagénu. Zvýšená expresia PKCα nemala žiaden efekt na morfológiu amoeboídne invadujúcej nádorovej línie A375m2, s vyššou hladinou PKCα bol však spojený trend zvýšenia invazívneho potenciálu tejto melanómovej línie. Obdobne, expresia dominantno-negatívnej formy PKCα viedla k amoeboídne-mezenchymálnemu prechodu buniek A375m2. Zníženej aktivita PKCα taktiež viedla k zníženiu invazívneho potenciálu nádorových línií K2 a MDA. V práci sme taktiež overili prepojenie regulácie PKCα kinázy s aktivitou phosphatidylinositol 3-kinázy (PI3K). Výsledky ukázali, že zvýšená hladina PKCα a jej fosforylovanej formy viedla k zníženiu aktívnej formy Akt naznačujúc možnú...
|
|
|
Studium úlohy proteinkinázy C alfa v améboidní invazivitě nádorových buněk
Vaškovičová, Katarína ; Brábek, Jan (vedoucí práce) ; Pajer, Petr (oponent)
2. Abstrakt Proteín kináza C α (PKCα) je serín/threonínová kináza regulujúca veľa rôznych signálnych kaskád v bunke. Cieľom tejto práce bolo preskúmať potenciálnu úlohu PKCα v améboidnej morfológii a invazivite nádorových buniek. Bolo pozorované, že hladina expresie PKCα a takisto hladina jej fosforylácie na Thr497 zostala nezmenená po améboidne-mezenchymálnom prechode A375m2 buniek (indukovanom inhibítorom kinázy ROCK) ako v 3D, tak aj v 2D prostredí. Ukázalo sa však, že aktivácia PKCα jej aktivátorom viedla k mezenchymálne-améboidnému prechodu K2 a MDA-MB-231 mezenchymálnych bunkových línií, hoci celková schopnosť buniek invadovať do 3D kolagénu zostala nezmenená. Treba však poznamenať, že aktivácia PKCα významne znížila schopnosť A375m2 buniek degradovať extracelulárnu matrix. Naopak, inhibícia PKCα jej inhibítorom zapríčinila améboidne-mezenchymálny prechod améboidných buniek A375m2 a tento prechod bol spojený so zníženou invazivitou všetkých použitých bunkových línií. PKCα inhibítor nemal žiadny vplyv na degradovanú plochu A375m2 buniek. V súlade s týmito pozorovaniami, špecifické umlčanie PKCα pomocou siRNA viedlo k zmene morfológie A375m2 buniek z améboidnej na mezenchymálnu a tiež k zníženej schopnosti buniek invadovať do 3D kolagénu. Navyše, schopnosti A375m2 buniek degradovať želatín boli význačne...
|
|
|
Analýza plasticity invazivity nádorových buněk
Merta, Ladislav
Schopnost nádorových buněk využívat různé invazivní módy (tzv. plasticita invazivity nádorových buněk) představuje značnou překážku v léčbě metastazujících nádorů. Nádorová invazivita zahrnuje mnoho různých způsobů migrace. Buňky se mohou pohybovat společně (se zachovanými mezibuněčnými kontakty; kolektivní invazivita) či individuálně. V rámci individuální invazivity pak rozlišujeme dva základní způsoby - mezenchymální a améboidní. Mezenchymální způsob migrace je charakterizován protáhlým tvarem buněk, proteolytickým štěpením vláken mezibuněčné hmoty a tvorbou pevných kontaktů s mezibuněčnou hmotou. Améboidní způsob je nezávislý na proteolytické aktivitě, buňky jsou charakteristické kulatým tvarem a zvýšenou kontraktilitou, kterou používají k protahování se skrze póry mezibuněčné hmoty. Tato disertační práce se zabývá analýzou plasticity invazivity nádorových buněk, konkrétně přechodů mezi individuálním améboidním a mezenchymálním migračním módem, ve 3D prostředí kolagenové matrix jakožto modelu mezibuněčné hmoty. Práce představuje modely mezenchymálně-améboidního přechodu (MAT), které zahrnují buněčné linie BLM, HT1080 a MDA-MB-231, v nichž je MAT indukováno expresí konstitutivně aktivní malé GTPázy RhoA či pomocí dasatinibu, inhibitoru kinázy Src. Rovněž byl ustanoven "nenádorový" model...
|
|
|
Analýza plasticity invazivity nádorových buněk
Merta, Ladislav
Schopnost nádorových buněk využívat různé invazivní módy (tzv. plasticita invazivity nádorových buněk) představuje značnou překážku v léčbě metastazujících nádorů. Nádorová invazivita zahrnuje mnoho různých způsobů migrace. Buňky se mohou pohybovat společně (se zachovanými mezibuněčnými kontakty; kolektivní invazivita) či individuálně. V rámci individuální invazivity pak rozlišujeme dva základní způsoby - mezenchymální a améboidní. Mezenchymální způsob migrace je charakterizován protáhlým tvarem buněk, proteolytickým štěpením vláken mezibuněčné hmoty a tvorbou pevných kontaktů s mezibuněčnou hmotou. Améboidní způsob je nezávislý na proteolytické aktivitě, buňky jsou charakteristické kulatým tvarem a zvýšenou kontraktilitou, kterou používají k protahování se skrze póry mezibuněčné hmoty. Tato disertační práce se zabývá analýzou plasticity invazivity nádorových buněk, konkrétně přechodů mezi individuálním améboidním a mezenchymálním migračním módem, ve 3D prostředí kolagenové matrix jakožto modelu mezibuněčné hmoty. Práce představuje modely mezenchymálně-améboidního přechodu (MAT), které zahrnují buněčné linie BLM, HT1080 a MDA-MB-231, v nichž je MAT indukováno expresí konstitutivně aktivní malé GTPázy RhoA či pomocí dasatinibu, inhibitoru kinázy Src. Rovněž byl ustanoven "nenádorový" model...
|
|
|
Analýza plasticity invazivity nádorových buněk
Merta, Ladislav ; Brábek, Jan (vedoucí práce) ; Šindelka, Radek (oponent) ; Staněk, David (oponent)
Schopnost nádorových buněk využívat různé invazivní módy (tzv. plasticita invazivity nádorových buněk) představuje značnou překážku v léčbě metastazujících nádorů. Nádorová invazivita zahrnuje mnoho různých způsobů migrace. Buňky se mohou pohybovat společně (se zachovanými mezibuněčnými kontakty; kolektivní invazivita) či individuálně. V rámci individuální invazivity pak rozlišujeme dva základní způsoby - mezenchymální a améboidní. Mezenchymální způsob migrace je charakterizován protáhlým tvarem buněk, proteolytickým štěpením vláken mezibuněčné hmoty a tvorbou pevných kontaktů s mezibuněčnou hmotou. Améboidní způsob je nezávislý na proteolytické aktivitě, buňky jsou charakteristické kulatým tvarem a zvýšenou kontraktilitou, kterou používají k protahování se skrze póry mezibuněčné hmoty. Tato disertační práce se zabývá analýzou plasticity invazivity nádorových buněk, konkrétně přechodů mezi individuálním améboidním a mezenchymálním migračním módem, ve 3D prostředí kolagenové matrix jakožto modelu mezibuněčné hmoty. Práce představuje modely mezenchymálně-améboidního přechodu (MAT), které zahrnují buněčné linie BLM, HT1080 a MDA-MB-231, v nichž je MAT indukováno expresí konstitutivně aktivní malé GTPázy RhoA či pomocí dasatinibu, inhibitoru kinázy Src. Rovněž byl ustanoven "nenádorový" model...
|
|
|
Analysis of PKCα Influence on Cancer Cell Invasion.
Szabadosová, Emília ; Brábek, Jan (vedoucí práce) ; Nováková, Olga (oponent)
8 Abstrakt Proteín kináza C alfa (PKCα) patrí do rodiny serín/treonínových kináz. Jej úloha je dôležitá v regulácii bunkovej polarity, sekrécie proteínov, apoptózy, proliferácie, diferenciácie a v tumorogenéze. Jej dôležitosť bola taktiež preukázaná v regulácii migrácie a invazivity nádorových buniek. Cieľom tejto práce bolo preskúmať potenciálnu úlohu PKCα v amoeboídnej invazivite nádorových buniek a jej vplyv na nádorovú morfológiu a invazivitu. Preukázalo sa, že vyššia expresia PKCα viedla k mezenchymálno-amoeboídnej tranzícii mezenchymálnych nádorových línií K2 a MDA, ktorá bola sprevádzaná s poklesom schopnosti nádorových buniek invadovať v 3D prostredí kolagénu. Zvýšená expresia PKCα nemala žiaden efekt na morfológiu amoeboídne invadujúcej nádorovej línie A375m2, s vyššou hladinou PKCα bol však spojený trend zvýšenia invazívneho potenciálu tejto melanómovej línie. Obdobne, expresia dominantno-negatívnej formy PKCα viedla k amoeboídne-mezenchymálnemu prechodu buniek A375m2. Zníženej aktivita PKCα taktiež viedla k zníženiu invazívneho potenciálu nádorových línií K2 a MDA. V práci sme taktiež overili prepojenie regulácie PKCα kinázy s aktivitou phosphatidylinositol 3-kinázy (PI3K). Výsledky ukázali, že zvýšená hladina PKCα a jej fosforylovanej formy viedla k zníženiu aktívnej formy Akt naznačujúc možnú...
|
|
|
Studium úlohy proteinkinázy C alfa v améboidní invazivitě nádorových buněk
Vaškovičová, Katarína ; Brábek, Jan (vedoucí práce) ; Pajer, Petr (oponent)
2. Abstrakt Proteín kináza C α (PKCα) je serín/threonínová kináza regulujúca veľa rôznych signálnych kaskád v bunke. Cieľom tejto práce bolo preskúmať potenciálnu úlohu PKCα v améboidnej morfológii a invazivite nádorových buniek. Bolo pozorované, že hladina expresie PKCα a takisto hladina jej fosforylácie na Thr497 zostala nezmenená po améboidne-mezenchymálnom prechode A375m2 buniek (indukovanom inhibítorom kinázy ROCK) ako v 3D, tak aj v 2D prostredí. Ukázalo sa však, že aktivácia PKCα jej aktivátorom viedla k mezenchymálne-améboidnému prechodu K2 a MDA-MB-231 mezenchymálnych bunkových línií, hoci celková schopnosť buniek invadovať do 3D kolagénu zostala nezmenená. Treba však poznamenať, že aktivácia PKCα významne znížila schopnosť A375m2 buniek degradovať extracelulárnu matrix. Naopak, inhibícia PKCα jej inhibítorom zapríčinila améboidne-mezenchymálny prechod améboidných buniek A375m2 a tento prechod bol spojený so zníženou invazivitou všetkých použitých bunkových línií. PKCα inhibítor nemal žiadny vplyv na degradovanú plochu A375m2 buniek. V súlade s týmito pozorovaniami, špecifické umlčanie PKCα pomocou siRNA viedlo k zmene morfológie A375m2 buniek z améboidnej na mezenchymálnu a tiež k zníženej schopnosti buniek invadovať do 3D kolagénu. Navyše, schopnosti A375m2 buniek degradovať želatín boli význačne...
|
host ::
RSS.