|
|
Nově syntetizované permanentně pozitivně nabité monosubstituované deriváty beta-cyklodextrinu jako chirální selektory v kapilární elektroforéze.
Havlíková, Martina ; Bosáková, Zuzana (vedoucí práce) ; Čabala, Radomír (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá využitím dvou permanentně kladně nabitých monosubstituovaných β-cyklodextrinových derivátů (PEMEDA-β-CD a PEMPDA-β- CD) jako chirálních selektorů v kapilární elektroforéze. Použití PEMPDA-β- cyklodextrinu v kapilární elektroforéze nebylo dosud v odborné literatuře uvedeno. Vlastnosti PEMEDA-β-cyklodextrinu byly již dřívě známé, ale jeho použití pro separaci enantiomerů aminokyselin a jejich derivátů ještě publikováno nebylo. Cyklodextrinové deriváty byly testovány jako aditivum v různých pufrech o různém pH s případnými přídavky organického modifikátoru. Jako vhodný základní elektrolyt, byl zvolen 15 mmol·l-1 borátový pufr o pH = 9,5 bez přídavku organického modifikátoru. Dále byl sledován vliv koncentrace chirálního selektoru na separaci a případnou enantioseparaci vybraných analytů. Přídavky cyklodextrinových derivátů se pohybovaly v rozmezí koncentrací 0,0 - 5,0 mmol·l-1 . Bylo otestováno čtrnáct anionogenních analytů, mezi ně patřily nativní aminokyseliny, N-blokované aminokyseliny a profeny, které byly detekovány pomocí UV-VIS detektoru při optimálních vlnových délkách 214, 254 nebo 280 nm. Oba chirální selektory byly vhodné pro enantioseparaci N-boc-D,L-tryptofanu, který se dělil na základní linii již při 0,5 mmol·l-1 koncentraci chirálního selektoru. U...
|
|
|
Charakterizace nových chirálních separačních systémů pro použití v HPLC
Vozka, Jiří ; Tesařová, Eva (vedoucí práce) ; Sýkora, David (oponent) ; Petr, Jan (oponent)
Souhrn Dizertační práce je zaměřena na fyzikálně-chemickou charakterizaci interakčních mechanizmů chirálních stacionárních fází na bázi derivatizovaných cyklofruktanů. Správná interpretace retenčních a enantiodiskriminačních interakcí usnadní vývoj, validaci a optimalizaci enantioselektivních metod využívajících tyto fáze. Nejdříve byly studovány interakční mechanizmy tří komerčně dostupných chirálních stacionárních fází na bázi derivatizovaných cyklofruktanů v podmínkách normálního separačního módu kapalinové chromatografie. Jednalo se o stacionární fáze na bázi dimethylfenyl karbamátu cyklofruktanu 7, R-naftylethyl karbamátu cyklofruktanu 6 a izopropyl karbamátu cyklofruktanu 6. Jako výchozí přístup byl zvolen model lineárních vztahů volných energií. Na základě tohoto modelu byly jako hlavní interakce přispívající v různé míře k retenci ve všech separačních systémech s cyklofruktanovými stacionárními fázemi určeny: schopnost poskytovat vodík pro tvorbu vodíkové interakce a dipolarita/polarizibilita, disperzní interakce pak retenci v různé míře snižují. Pro objasnění vlivu sacharidového skeletu na chirální separace byly následně cyklofruktanové stacionární fáze porovnány s cyklodextrinovými analogy. Cyklofruktanové chirální stacionární fáze prokázaly v podmínkách normálního módu mimořádnou...
|
|
|
Chirální a achirální separace na připravené β-cyklodextrinové koloně, porovnání s komerční β-cyklodextrinovou kolonou
Procházková, Hana ; Kalíková, Květa (vedoucí práce) ; Kozlík, Petr (oponent)
Předkládaná bakalářská práce je zaměřena na přípravu nové chirální stacionární fáze dynamickým "coatingem" PEMPDA-β-cyklodextrinu (N1 , N1 , N3 , N3 , N3 - pentametylpropan-1,3-diamin-β-cyklodextrin) na iontově výměnnou stacionární fázi, otestování separačních schopností a selektivity této kolony na chirální i achirální sadě analytů, zjištění stability připravené kolony a porovnání separačních vlastností s komerční β-cyklodextrinovou chirální stacionární fází (kolona Astec Cyclobond I 2000). Sada testovaných chirálních analytů byla tvořena pěti strukturně odlišnými analyty - lorazepam, oxazepam, BNP, HDDP a Cl-HDDP. Sada testovaných směsí achirálních analytů byla tvořena šesti skupinami, z nichž každá obsahovala strukturně podobné analyty. Pro analýzu byl použit reverzní separační mód vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Mobilní fáze byly tvořeny metanolem a 10mM octanovým pufrem o pH 4,00 v různých objemových poměrech. Na připravené PEMPDA-β-cyklodextrinové chirální stacionární fázi byly nalezeny podmínky pro separaci na základní linii pro enantiomery oxazepamu a pět směsí achirálních analytů. Částečná separace byla pozorována u dvou chirálních analytů (HDDP a Cl-HDDP) a jedné směsi achirálních analytů. Při použití kolony Astec Cyclobond I 2000 byly nalezeny podmínky pro separaci na základní...
|
|
|
Chirální separace nově syntetizovaných aminokyselin metodou HPLC
Kučerová, Gabriela ; Kalíková, Květa (vedoucí práce) ; Riesová, Martina (oponent)
Tato diplomová práce je zaměřena na nalezení optimálních podmínek pro chirální separace nově syntetizovaných aminokyselin pomocí metody vysokoúčinné kapalinové chromatografie. Soubor studovaných látek obsahuje čtyři N-blokované deriváty D,L- Fenylalaninu, tři N-neblokované deriváty D,L-Fenylalaninu, D,L-Fenylalanin, jeden methylovaný derivát D,L-Tyrosinu a D,L-Tyrosin. Pro analýzu byly použity dva separační módy - reverzní mód a polárně-organický mód na dvou chromatografických kolonách - Chirobiotic® T a Chirobiotic® T2, jejichž stacionární fáze jsou tvořeny makrocyklickým antibiotikem teikoplaninem vázaným na silikagelový nosič. V reverzním módu na koloně Chirobiotic® T byla použita mobilní fáze složená z methanolu a octanového pufru. Jako nejvhodnější koncentrace a pH octanového pufru se ukázala koncentrace 20 mM a pH 4,00. Ze souboru deseti studovaných enantiomerů se při výše uvedených podmínkách podařilo nalézt optimální podmínky pro osm z nich. Polárně- organický mód na koloně Chirobiotic® T byl vhodný pouze pro tři N-blokované deriváty D,L-Fenylalaninu při použití mobilní fáze složené z methanolu s malými přídavky triethylaminu a kyseliny octové. Kolona Chirobiotic® T2 při použití reverzního módu nebyla příliš vhodná pro separaci daného souboru látek. Došlo zde pouze k částečné separaci...
|
|
|
Využití chirálních stacionárních fází na bázi teikoplaninu a teikoplanin aglykonu pro enantioseparaci FMOC- derivatizovaných aminokyselin.
Repko, Pavel ; Bosáková, Zuzana (vedoucí práce) ; Tesařová, Eva (oponent)
V této práci byla vyvíjena a následně optimalizována enantioselektivní HPLC metoda s UV a fluorimetrickou detekcí pro chirální sparaci čtyř aminokyselin (D/L- alanin, D/L-valin, D/L-leucin, D/L-isoleucin) v nativní a zejména derivatizované podobě s důrazem na enantioseparaci D-analogů. Retenční a enantioseparační chování studovaných analytů bylo sledováno na třech chirálních stacionárních fázích založených na bázi teikoplaninu (Chirobiotic T, Chirobiotic T2) a teikoplanin aglykonu (Chirobiotic TAG). Na koloně Chirobiotic T byly provedeny enantioseparace nederivatizovaných aminokyselin za UV detekce při 205 nm v mobilní fázi methanol/voda v různém objemovém poměru a bylo dosaženo úplného rozlišení L- a D-forem až na základní linii avšak s velmi nízkou citlivostí detekce. Pro její zvýšení byla provedena derivatizace aminokyselin pomocí 9-fluorenylmethylchloromravenčanu (FMOC-Cl). Průběh derivatizačního postupu byl sledován na koloně Chirobiotic T s fluorimetrickou detekcí (λEx = 254 nm, λEm = 314 nm) v pufrované mobilní fázi methanol/0,5% triethylamoniumoctanový (TEAA) pufr, pH 6,0 40/60 (v/v). Z hlediska derivatizace se jako nejvhodnější jevil objemový poměr 1/1 D/L-aminokyselina/derivatizační činidlo s desetinásobně vyšší koncentrací derivatizačního činidla. Pro studium retenčního a enantioseparačního...
|
|
|
Enantioselective separation systems in capillary electrophoresis
Svobodová, Jana ; Gaš, Bohuslav (vedoucí práce) ; Foret, František (oponent) ; Kenndler, Ernst (oponent)
Chirálními separačními systémy v kapilární zónové elektroforéze se zabývá řada vědeckých týmů po celém světě. Z tohoto důvodu je nezbytné vyvíjet i vhodné teoretické modely, pomocí kterých by bylo možno vysvětlit jevy spojené s chirální separací, či by umožňovaly optimalizovat separační podmínky. V této dizertační práci je navrženo několik teoretických modelů, které plně splňují tyto požadavky. První část práce je zaměřena na určování rychlostních konstant interkonverze pomocí dynamické kapilární elektroforézy. Byl navržen matematický model, který umožňuje určovat rychlostní konstanty interkonverze v systémech obsahujících směs chirálních selektorů. Takovéto systémy jsou velmi oblíbené, jelikož nabízejí lepší enantioseparační schopnosti. Z toho důvodu byl námi navržený teoretický model použit k objasnění separačního mechanismu v systémech se směsí chirálních selektorů a k ověření zavedených postupů pro optimalizaci chirálních separačních podmínek. Současně byl také ověřen separační mechanismus pro systémy se simultánní komplexací s boráty a cyklodextriny. Na závěr byl představen kompletní matematický model elektromigrace pro systémy s komplexujícími složkami. Tento model byl implementován do našeho simulačního programu Simul 5 Complex. Model byl ověřen experimentálně a použit k objasnění...
|
|
|
Enantiomery pesticidů ve vodě
Šlechtová, Tereza ; Lokajová, Jana (oponent) ; Tesařová, Eva (vedoucí práce)
Bakalářská práce se zabývá chirálním herbicidem mecopropem a jeho stanovením metodou vysoce účinné kapalinové chromatografie s použitím chirální stacionární fáze na bázi teikoplaninu. Teoretická část je zaměřena na obecná fakta o chiralitě, chirálních pesticidech, o problematice jejich používání a vlivu na životní prostředí. Také se zabývá jejich stanovením výše zmíněnou metodou a uvádí několik příkladů předchozích separací. Experimentální část je založena na optimalizaci enantioseparační metody a sledování změn v enantiomerním poměru mecopropu v různých vzorcích vody při různém způsobu skladování.
|
|
|
Stanovení enantiomerů aminokyselin metodou HPLC
Michalčíková, Regina ; Janečková, Lucie (oponent) ; Tesařová, Eva (vedoucí práce)
Abstakt Bakalářská práce se zabývá stanovením enantiomerů aminokyselin, v praktické části konkrétně alaninu, pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie za využití chirálních stacionárních fází na bázi teikoplaninu. Rešeršní část je zaměřena na shrnutí základní problematiky chirality a chirálních aminokyselin v potravinách, na charakteristiku vysokoúčinné kapalinové chromatografie, jako jedné z nejvhodnějších metod k enantioseparaci aminokyselin, a popis metod derivatizace, jež se využívají ke zvýšení citlivosti stanovení enantiomerů aminokyselin. Experimentální část se pak zabývá separací jednotlivých enantiomerních forem alaninu, volbou vhodného separačního systému pro tuto separaci a stanovením D- a L- alaninu v ovocném džusu.
|
|
|
Posouzení aplikovatelnosti nepřímé fotometrické detekce k chirálním separacím vybraných karboxylových kyselin v mlékárenských výrobcích
Dvořák, Miloš ; Zemanová, Jana (oponent) ; Vespalcová, Milena (vedoucí práce)
V této diplomové práci je ověřována možnost aplikace nepřímé fotometrické detekce pro chirální separace kyseliny mléčné a beta-hydroxymáselné kapilární elektroforézou. Jako chirální selektor je zkoušen vankomycin. Ověřila se jeho schopnost částečné separace kyseliny mléčné na enantiomery při použití kyseliny pikrové jako absorbující aniont v základním elektrolytu. Použita byla pokrytá kapilára. Aplikace nepřímé fotometrické detekce je úspěšná. Chirální separace kyseliny beta-hydroxymáselné nebyla úspěšná. Zaobírá se výběrem vhodných vizualizujících aniontů pro účely nepřímé fotometrické detekce. Jsou měřeny jejich elektroforetické a spektrofotometrické vlastnosti, pro zjištění kompatibility použití v kapilární elektroforéze ve spojení s nepřímou fotometrickou detekcí. Ze změřených údajů byly vytipovány nejvhodnější vizualizující anionty pro další experimenty. Dle zjištěných a měřených vlastností se ukazují být nejvhodnější eosin rozpustný v alkoholu a bromfenolová modř.
|
|
|
Chiralita a její význam v environmentální organické analýze
Svobodová, Dagmar ; Friedl, Zdeněk (oponent) ; Čáslavský, Josef (vedoucí práce)
Tato bakalářská práce je vypracována jako literární rešerše zaměřená na charakterizaci chirality a jejím významem pro životní prostředí. Tato práce také podává přehled metod používaných pro chirální separaci a analýzu organických polutantů ve složkách životního prostředí. Ze získaných informací vyplývá, že význam chirality na enviromentální působení je značný. Jednotlivé enantiomery chirálních polutantů vykazují v životním prostředí rozdílnou toxicitu a biologickou aktivitu a je tedy nutné je v prostředí sledovat pomocí metod chirální analýzy.
|
host ::
RSS.