|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) I.
Kostelník, Jan ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Kostelník J.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) I. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 63 s. Cílem diplomové práce bylo izolační zpracování spojené frakce č. 55-67 (A2) získané ze sumárního alkaloidního extraktu rostliny Fumaria officinalis L. (Fumariaceae). Za pomoci chromatografických metod byly izolovány tři alkaloidy, které byly dále identifikovány pomocí strukturní analýzy (GC-MS, NMR). Tyto tři alkaloidy byly určeny běžnými chromatografickými metodami a poté byly identifikovány na základě strukturní analýzy, optické otáčivostí a teploty tání jako (-)-O-methylfumarofycin, (-)-sinaktin a (-)-stylopin. U izolovaných látek byla stanovena inhibiční aktivita vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase, lidské sérové butyrylcholinesterase a prolyl oligopeptidase. Naměřené hodnoty byly vyjádřeny jako hodnoty IC50 ((-)-stylopin: IC50 AChE a IC50 BuChE > 1000 μM, IC50 POP > 1000 mM; (-)-O-methylfumarofycin: IC50 AChE = 963,10 ± 135,98 µM, IC50 BuChE = 1771,0 ± 380,94 µM, IC50 POP - neměřena; (-)-sinaktin IC50 AChE = 632,0 ± 68,12 µM, IC50 BuChE = 8154,3 ± 981,42 µM, IC50 POP = 52,9 ± 1,8 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nevykazoval...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II.
Malý, Lukáš ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Malý, L.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 49 s. Získaný diethyetherový extrakt Fumaria officinalis L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu. Preparativní TLC a krystalizace vedla k izolaci 5 alkaloidů ze zadané frakce. Alkaloidy byly identifikovány na základě GC-MS, 1 H a 13 C NMR spekter, optické otáčivosti a teploty tání jako protopin, kryptopin, (-)-fumaricin, (+)-fumarilin a (+)-parfumidin. Izolované alkaloidy byly testovány na jejich inhibiční aktivitu vůči acetyl- a butyrylcholinesterase a vůči prolyloligopeptidase a tyto aktivity IC50 byly porovnány se standardy. Nejzajímavější aktivitu oproti standardu galanthaminu (IC50 AChE 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BuChE 42,30 ± 1,30 µM) vykazoval protopin (IC50 AChE 345,4 ± 24 µM, IC50 BuChE 239,6 ± 22,3 µM) a kryptopin (IC50 AChE 477,71 ± 47,33 µM, IC50 BuChE 270,82 ± 39,12 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nedosahuje takové inhibiční aktivity jako použité standardy. Nejvyšší inhibiční aktivitu POP vykazoval (+)-parfumidin (IC50 POP 99,2 µM), dosahující vyšší aktivity než přírodní...
|
|
|
Neurotropní a antioxidační aktivita vybraných druhů jednoděložných alkaloidních rostlin. VIII.
Breiterová, Kateřina ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Ločárek, Miroslav (oponent)
Autor: Kateřina Breiterová Název: Neurotropní a antioxidační aktivita vybraných druhů jednoděložných alkaloidních rostlin. VIII. Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie 2015, 101 s. Více než 50 % všech případů demence je způsobeno Alzheimerovou chorobou (AD). Jedná se o progresivní neurodegenerativní onemocnění působící postupnou ztrátu paměti, poruchy orientace i chování, jež zasahují do pacientova sociálního i pracovního života. AD je charakterictická ztrátou neuronů v určitých oblastech mozku - na příklad v hipokampu či kůře. Etiopatogeneze vzniku AD není ještě zcela známa, proto je léčba pouze symptomatická. Důležitou roli hraje vznik extracelulárních plaků proteinu β amyloidu (Aβ) okolo neuritů, což vede k jejich degeneraci a následné buněčné smrti. Aβ se podporuje vznik volných kyslíkových radikálů, což vede ke smrti neuronů, stejně jako intracelulárně vznikající uzlíky τ proteinu. Dalším z problémů je nerovnováha glutamátergního systému, jehož fyziologická funkce je nezbytná pro správnou tvorbu paměti. U pacientů s AD dochází k přílišné aktivaci tohoto systému, což vede ke vzniku šumů mezi neurony a ztížení přenosu nervového vzruchu, excitotoxicitě a apoptóze neuronů. U pacientů trpících AD je také snížena...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae)I.
Adamcová, Markéta ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Adamcová, M.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae) I. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015. Cílem této práce byla izolace obsahových látek ze sumárního diethyletherového alkaloidního extraktu z Argemone grandiflora Sweet, jejich identifikace a určení inhibiční aktivity vůči lidské acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase a prolyloligopeptidase. S využitím chromatografických metod byly získány 4 alkaloidy, které byly identifikovány jako (+)- laudanosin, protopin, (-)-argemonin a (-)-platycerin. Tyto látky byly testovány na jejich inhibiční aktivitu IC50: (+)-laudanosin (IC50 AChE = 617,00 ± 46,55 μM, IC50 BuChE = 644,77 ± 55,52 μM, IC50 POP = dosud nezměřeno); protopin (IC50 AChE = 229,98 ± 21,02 μM, IC50 BuChE = 208,87 ± 17,67 μM, IC50 POP ˃ 1000 μM); (-)-argemonin (IC50 AChE = 4677,75 ± 1241,08 μM, IC50 BuChE = 885,45 ± 119,50 μM, IC50 POP = 337 ± 83,1 μM); (-)-platycerin (IC50 AChE = 223,65 ± 19,61 μM, IC50 BuChE = 1651,25 ± 327,7 μM, IC50 POP = 687 ± 74 μM). V porovnání se standardy galanthaminem (IC50 AChE = 1,710 ± 0,065 μM, IC50 BuChE = 42,30 ± 1,30 μM) a huperzinem A (IC50 AChE = 0,033 ± 0,001 μM, IC50 BuChE > 1000 μM)...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin III. Alkaloidy Narcissus tazetta L.
Panchartková, Markéta ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Panchartková, M.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin III. Alkaloidy Narcissus tazetta L., Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové, 2015, 67s. Rostliny čeledi Amaryllidaceae obsahují alkaloidy, které mají rozmanité biologické účinky. Je popsán efekt antivirový, protinádorový, antibakteriální, antimalaritický a antifungální. Významná je také inhibiční aktivita lidských ChE. Cílem této diplomové práce byla příprava sedmi alkaloidních extraktů jednotlivých kultivarů rodu Narcissus a jejich GC/MS analýza, díky které byly identifikovány různé strukturní typy alkaloidů čeledi Amaryllidaceae. Nejčastěji identifikované alkaloidy byly homolykorinového, lykorinového, tazettinového a galantaminového typu. Dále byla změřena biologická aktivita vůči lidské acetylcholinesteráze (HuAChE) a butyrylcholinesteráze (HuBuChE). Nejvyšší inhibibiční aktivitu IC50 měl alkaloidní extrakt Narcissus jonquilla cv. New baby s hodnotami vůči HuAChE 13,78 ± 1,48 a vůči HuBuChE 96,12 ± 9,55. Důvodem byl nejspíše nejvyšší obsah galantaminu ze všech kultivarů, který jak je známo, vykazuje vysoké inhibiční aktivity. Inhibiční aktivity ostatních kultivarů byly velmi nízké. Bylo u nich identifikováno pouze nízké...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L.
Nováková, Dana ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Nováková D.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015, 70 s. Předmětem diplomové práce byla příprava alkaloidního extraktu, za účelem identifikace alkaloidních obsahových látek a stanovení inhibičních aktivit. Tato aktivita má využití v léčbě Alzheimerovy nemoci. Alkaloidní extrakty ze sedmi variet (Sundial, Sundisc, Sweetness, Waterperry, Simplex, Twinkling Yellow, Yazz) rostliny Narcissus jonquilla L. (Amaryllidaceae) byly testovány na acetylcholinesterázovou (HuAChE) a butyrylcholinesterázovou (HuBuChE) inhibiční aktivitu a alkaloidní obsahové látky. 23 alkaloidů bylo stanoveno metodou GC/MS a 10 z nich bylo identifikováno pomocí hmotnostního spektra a retenčních časů. Všechny vzorky vykazovaly obsah galanthaminu, většina vzorků obsahovala lykorin a tazettin. Nadějná inhibiční aktivita vůči HuAChE byla prokázána u Narcissus jonquilla L. cv. Waterperry s hodnotami IC50 6,53 ± 0,88 μg/ml. Nejvyšší inhibiční aktivitu proti HuBuChE vykázal extrakt rostliny Narcissus jonquilla L. cv. Sundisc s hodnotou IC50 5,09 ± 0,64 μg/ml. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, Amaryllidaceae, narcis, GC/MS, alkaloidy, acetylcholinesteráza,...
|
|
|
Biologická aktivita obsahových látek rostlin XXIII. Alkaloidy Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE a jejich účinek na acetylcholinesterasu a butyrylcholinesterasu.
Kaluzsná, Blanka ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Kandidát: Bc. Blanka Kaluzsná Školitel: Prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Název diplomové práce: Biologická aktivita obsahových látek rostlin XXIII. alkaloidy Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE a jejich účinek na acetylcholinesterasu a butyrylcholinesterasu Ze suchých hlíz Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE byl připraven diethyletherový extrakt, který obsahoval terciární bazické alkaloidy. Sloupcovou chromatografií a následnou krystalizací byla získána podfrakce značená 2/B, ze které byly preparativní TLC izolovány 3 alkaloidy, které byly na základě výsledků GC/MS a 1 H a 13 C NMR analýzy stanoveny jako (+)-kanadin, (+)-tetrahydropalmatin, domestin. Izolované alkaloidy byly testovány spektrofotometrickou Ellmanovou metodou na inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase (HuAChE) a plazmatické butyrylcholinesterase (HuBuChE). Z izolovaných alkaloidů vykazoval (+)-kanadin, ve srovnání s referenčními látkami, relativně vysokou inhibiční aktivitu vůči HuAChE (12,4 µM). (+)-Tetrahydropalmatin a (+)-domestin nevykazovaly v tomto směru žádnou významnou inhibiční aktivitu, jak vůči HuAChE, tak HuBuChE. Klíčová slova: Corydalis cava, (+)-kanadin, (+)-tetrahydropalmatin,...
|
|
|
Magnetické částice jako reverzibilní nosič pro enzymové elektrody
Janíček, Zdeněk ; Žeravík,, Jiří (oponent) ; Skládal,, Petr (vedoucí práce)
Diplomová práce obsahuje informace o používaných enzymech, biosenzorech, enzymových biosenzorech a magnetických částicích. Cholinesterasa (ChE) je obecné označení pro dva příbuzné enzymy, vzájemně se lišící výskytem a biologickou funkcí. Acetylcholinesterasa (AChE) je nezbytná při přenosu nervového vzruchu. Nachází se na cholinergních synapsích, kde působí hydrolýzu neurotransmiteru acetylcholinu a tím i terminaci nervového vzruchu. Příbuzná je butyrylcholinesterasa (BChE) přítomná v séru. Experimentální část byla zaměřena na elektrochemické enzymové biosenzory s cholinesterasou využívající magnetické částice pro reversibilní obnovu biorekogniční vrstvy. Imobilizace cholinesterasy na magnetické částice byla provedena kovalentní vazbou po aktivaci glutaraldehydem. Měření aktivity probíhalo s acetylthiocholinem jako substrátem v průtočném systému, magnetické částice byly zachyceny před platinovou elektrodou a produkovaný thiocholin se detekoval amperometricky. Cílem bylo měřit inhibici AChE. Významná je inhibice ChE způsobovaná některými léky a pesticidy na bázi organofosfátů. Zde byla testována inhibice AChE pesticidem dichlorvosem. Důraz byl kladen na nalezení vhodných experimentálních podmínek pro vytvoření automatizovaného postupu k měření aktivity AChE, který byl založen na autoinjektoru a pumpách firmy Gilson spolu s programem 735 pro definici pracovní konfigurace, přípravu měřících skriptů a provádění aplikačních metod.
|
|
|
Šípové jedy, jejich využití v toxikologii a medicíně
BÁRTOVÁ, Lucie
Abstrakt Pro léčbu v anesteziologii bylo velkou změnou zavedení nových fyziologicky i terapeuticky účinných preparátů. Jejich objevení tak přispělo k minimalizaci škodlivých účinků na živý organismus. Anestezie se díky nim stala snáze říditelná a bezpečnější. I pro pacienta to znamená značné zvýšení komfortu během anestezie a jeho rychlé zotavení, čímž se následně zkracuje i doba hospitalizace. Výzkum stále nových fyziologicky i terapeutických účinných látek tak přináší možnost kvalitnější péči o pacienta. Do pozadí se tak dostávají starší látky, které se pro své nežádoucí účinky přestávají používat, např. Alkuronium a Gallamin. Dnes tyto látky ve většině případů plně nahradí látky s intermediálním účinkem, např. Rokuronium a Cisatrakurium, které mají ve srovnání s Alkuroniem a Gallaminem minimum nežádoucích účinků. V současné době zůstává jedním z hlavních cílů farmaceutického výzkumu nalezení náhrady Sukcinylcholinu, který má zatím své nezastupitelné místo v urgentní intubaci i přes své známe vedlejší účinky, které jej tak omezují pro použití v ambulantní praxi a u vybraných kategorií pacientů. Snad se v budoucnu náhrady S9ukcinylcholinu dočkáme a definitivně se tak vyřeší i problém vedlejších účinků omezujících jeho aplikaci.
|
|
|
Izolace a chromosomální lokalizace genů pro acetylcholinesterázu u obaleče jablečného \kur{(Cydia pomonella)}
SÝKOROVÁ, Miroslava
The codling moth, Cydia pomonella (Lepidoptera; Tortricoidea) is a major pest of pome fruitand walnut orchards in the world. Due to the intensive chemical control C. pomonella has developed a high resistance to various insecticides. One of the mechanisms of the resistance is acetylcholinesterase insensitivity to carbamates and organophosphates. The insensitivity is based on mutations in one of two genes for acetylcholinesterase. This study deals with testing a hypothesis suggesting that one gene coding for acetylcholinesterase in the codling moth was translocated to the Z sex chromosome. The hypothesis has been latersupported by sex-linked inheritance of insecticide resistance in a related species, Grapholita molesta, and also by a large size of sex hromosomes in the codling moth.
|
host ::
RSS.