|
|
Genetické interakce genu Prdm9
Šebestová, Lenka ; Trachtulec, Zdeněk (vedoucí práce) ; Král, Jiří (oponent)
Gen Prdm9 (PR domain containing 9, Meisetz, Hybrid sterility 1) kóduje enzym, který trimethyluje histon 3 na lysinech 4 a 36. Tyto metylační značky určují pozice budoucích dvouřetězcových zlomů DNA, které jsou pak opraveny meiotickou homologní rekombinací. V této práci byly zjišťovány interakce Prdm9 se dvěma geny důležitými pro spermatogenezi - Mili (Piwil2) účastnícím se biogeneze piRNA a Mybl1 kódujícím transkripční faktor regulující expresi genů důležitých pro průběh meiotické profáze I včetně piRNA prekurzorů. Křížením laboratorních myší nesoucích mutovanou alelu Prdm9 s myšmi heterozygotními pro mutaci v genu Mybl1 nebo Mili jsme vytvořili samce dvojitě heterozygotní a pro Mybl1 i dvojitě homozygotní. U těchto myší jsme stanovili hmotnost těla a parametry fertility (hmotnost varlat, počet spermií v nadvarlatech, procento malformovaných spermií, podíl semenotvorných kanálků obsahujících spermatocyty a procento abnormálních jader pachytenních spermatocytů) a porovnali je s kontrolami. Zkoumali jsme také vliv mutací v Mybl1 a Mili na plodnost F1 mezipoddruhových hybridů. Výsledky odhalily možnou interakci Prdm9 a Mybl1 u laboratorních myší. Snížená dávka genu Mybl1 redukovala fertilitu mezipoddruhových F1 hybridů. Interakci genu Prdm9 s Mili jsme zatím neprokázali ani u laboratorních myší ani u...
|
|
|
Úloha kohezinových genů během samčí meiózy myši domácí
Šebestová, Lenka ; Trachtulec, Zdeněk (vedoucí práce) ; Král, Jiří (oponent)
Kohezinové geny hrají důležitou roli v buněčném dělení. Zajišťují správnou segregaci chromozomů během mitózy i meiózy. Tato práce se zaměřuje na roli kohezinových genů při meióze u modelového organismu myši domácí (Mus musculus). V práci jsou nejprve uvedeny klíčové procesy savčí meiózy. Dále je popsána struktura kohezinového komplexu. Ten se skládá z heterodimeru SMC proteinů - SMC3 a SMC1α nebo SMC1β, který je uzavřen do kruhu štěpitelnou podjednotkou RAD21, RAD21L nebo REC8. S ní pak dále asociuje čtvrtá podjednotka - STAG protein (STAG1, STAG2 nebo STAG3). Dále jsou podrobně rozebrány funkce čtyř proteinů specifických pro meiózu (SMC1β, RAD21L, REC8 a STAG3) odvozené od projevů deficiencí jejich genů u myších samců. Všechny čtyři geny jsou nezbytné pro mnoho procesů v rámci meiózy - např. udržení koheze sesterských chromatid, synapsi nebo rekombinaci. STAG3, SMC1β, a REC8 jsou nutné k udržení centromerické koheze sesterských chromatid. STAG3 a RAD21L jsou důležité pro asociaci ostatních kohezinových podjednotek. Nejdůležitějším projevem deficience těchto čtyř genů je meiotická zástava v profázi I. Proto je výzkum kohezinů důležitou součástí studia příčin sterility u savců. klíčová slova: kohezin, meióza, spermatogeneze, myš, Smc1b, Rec8, Rad21l, Stag3
|
|
|
Biologicky aktivní metabolity rostlin III. Alkaloidy Chelidonium majus L. a jejich neurotropní a antioxidační aktivita
Šebestová, Lenka ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Kandidát: Mgr. Lenka Šebestová Konzultant: Ing. Lucie Cahlíková, PhD. Název rigorózní práce: Biologicky aktivní metabolity rostlin. III. Alkaloidy Chelidonium majus L. a jejich neurotropní a antioxidační aktivita. Cílem této práce bylo dopracování výtřepku benzofenanthridinových alkaloidů z Chelidonium majus, izolace minimálně jednoho alkaloidu v čisté formě a stanovení jeho anticholinesterázové a antioxidační aktivity. Z výtřepku byly v rámci této práce pomocí sloupcové chromatografie izolovány dva alkaloidy. První látka LŠ3 byla na základě MS a NMR studií identifikována jako 6-ethoxydihydrosanguinarin a druhá látka LŠ4 byla stejným způsobem identifikována jako 6-ethoxydihydrochelerythrin. Obě izolované látky byly podrobeny studiím na jejich inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesteráze a lidské sérové butyrylcholinesteráze. Byly stanoveny hodnoty IC50 (6-ethoxydihydrosanguinarin: IC50 (HuAChE) = 3,25 ± 0,24 µM, IC50 (HuBuChE) = 4,51 ± 0,31 µM, 6-ethoxydihydrochelerythrin: IC50 (HuAChE) = 0,83 ± 0,04 µM, IC50 (HuBuChE) = 4,20 ± 0,19 µM). Izolované alkaloidy vykázaly vyšší inhibiční aktivitu vůči oběma cholinesterázám, nežli terapeuticky využívaný standart...
|
|
|
Genetické interakce genu Prdm9
Šebestová, Lenka ; Trachtulec, Zdeněk (vedoucí práce) ; Král, Jiří (oponent)
Gen Prdm9 (PR domain containing 9, Meisetz, Hybrid sterility 1) kóduje enzym, který trimethyluje histon 3 na lysinech 4 a 36. Tyto metylační značky určují pozice budoucích dvouřetězcových zlomů DNA, které jsou pak opraveny meiotickou homologní rekombinací. V této práci byly zjišťovány interakce Prdm9 se dvěma geny důležitými pro spermatogenezi - Mili (Piwil2) účastnícím se biogeneze piRNA a Mybl1 kódujícím transkripční faktor regulující expresi genů důležitých pro průběh meiotické profáze I včetně piRNA prekurzorů. Křížením laboratorních myší nesoucích mutovanou alelu Prdm9 s myšmi heterozygotními pro mutaci v genu Mybl1 nebo Mili jsme vytvořili samce dvojitě heterozygotní a pro Mybl1 i dvojitě homozygotní. U těchto myší jsme stanovili hmotnost těla a parametry fertility (hmotnost varlat, počet spermií v nadvarlatech, procento malformovaných spermií, podíl semenotvorných kanálků obsahujících spermatocyty a procento abnormálních jader pachytenních spermatocytů) a porovnali je s kontrolami. Zkoumali jsme také vliv mutací v Mybl1 a Mili na plodnost F1 mezipoddruhových hybridů. Výsledky odhalily možnou interakci Prdm9 a Mybl1 u laboratorních myší. Snížená dávka genu Mybl1 redukovala fertilitu mezipoddruhových F1 hybridů. Interakci genu Prdm9 s Mili jsme zatím neprokázali ani u laboratorních myší ani u...
|
|
|
Úloha kohezinových genů během samčí meiózy myši domácí
Šebestová, Lenka ; Trachtulec, Zdeněk (vedoucí práce) ; Král, Jiří (oponent)
Kohezinové geny hrají důležitou roli v buněčném dělení. Zajišťují správnou segregaci chromozomů během mitózy i meiózy. Tato práce se zaměřuje na roli kohezinových genů při meióze u modelového organismu myši domácí (Mus musculus). V práci jsou nejprve uvedeny klíčové procesy savčí meiózy. Dále je popsána struktura kohezinového komplexu. Ten se skládá z heterodimeru SMC proteinů - SMC3 a SMC1α nebo SMC1β, který je uzavřen do kruhu štěpitelnou podjednotkou RAD21, RAD21L nebo REC8. S ní pak dále asociuje čtvrtá podjednotka - STAG protein (STAG1, STAG2 nebo STAG3). Dále jsou podrobně rozebrány funkce čtyř proteinů specifických pro meiózu (SMC1β, RAD21L, REC8 a STAG3) odvozené od projevů deficiencí jejich genů u myších samců. Všechny čtyři geny jsou nezbytné pro mnoho procesů v rámci meiózy - např. udržení koheze sesterských chromatid, synapsi nebo rekombinaci. STAG3, SMC1β, a REC8 jsou nutné k udržení centromerické koheze sesterských chromatid. STAG3 a RAD21L jsou důležité pro asociaci ostatních kohezinových podjednotek. Nejdůležitějším projevem deficience těchto čtyř genů je meiotická zástava v profázi I. Proto je výzkum kohezinů důležitou součástí studia příčin sterility u savců. klíčová slova: kohezin, meióza, spermatogeneze, myš, Smc1b, Rec8, Rad21l, Stag3
|
|
|
Biologicky aktivní metabolity rostlin III. Alkaloidy Chelidonium majus L. a jejich neurotropní a antioxidační aktivita
Šebestová, Lenka ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra: Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Kandidát: Mgr. Lenka Šebestová Konzultant: Ing. Lucie Cahlíková, PhD. Název rigorózní práce: Biologicky aktivní metabolity rostlin. III. Alkaloidy Chelidonium majus L. a jejich neurotropní a antioxidační aktivita. Cílem této práce bylo dopracování výtřepku benzofenanthridinových alkaloidů z Chelidonium majus, izolace minimálně jednoho alkaloidu v čisté formě a stanovení jeho anticholinesterázové a antioxidační aktivity. Z výtřepku byly v rámci této práce pomocí sloupcové chromatografie izolovány dva alkaloidy. První látka LŠ3 byla na základě MS a NMR studií identifikována jako 6-ethoxydihydrosanguinarin a druhá látka LŠ4 byla stejným způsobem identifikována jako 6-ethoxydihydrochelerythrin. Obě izolované látky byly podrobeny studiím na jejich inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesteráze a lidské sérové butyrylcholinesteráze. Byly stanoveny hodnoty IC50 (6-ethoxydihydrosanguinarin: IC50 (HuAChE) = 3,25 ± 0,24 µM, IC50 (HuBuChE) = 4,51 ± 0,31 µM, 6-ethoxydihydrochelerythrin: IC50 (HuAChE) = 0,83 ± 0,04 µM, IC50 (HuBuChE) = 4,20 ± 0,19 µM). Izolované alkaloidy vykázaly vyšší inhibiční aktivitu vůči oběma cholinesterázám, nežli terapeuticky využívaný standart...
|
|
|
Biologicky aktivní metabolity rostlin. 3. Alkaloidy Chelidonium majus L. a jejich inhibiční aktivita vůči acetylcholinesteráze
Šebestová, Lenka ; Siatka, Tomáš (oponent) ; Cahlíková, Lucie (vedoucí práce)
Šebestová L.: Biologicky aktivní metabolity rostlin 3. Alkaloidy Chelidonium majus L. a jejich inhibiční aktivita vůči acetylcholinesteráze. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2010, 68 s. Cílem této práce bylo zpracování výtřepku benzofenanthridinových alkaloidů z Chelidonium majus, izolace alespoň jednoho alkaloidu v čisté formě a stanovení jeho anticholinesterázové, antiprotozoální a antioxidační aktivity. V rámci této práce byly z daného výtřepku pomocí sloupcové chromatografie izolovány dva alkaloidy. První izolovaná látka byla označena jako LŠ1 a na základě NMR a MS studií identifikována jako stylopin. Druhá látka LŠ2 byla stejným způsobem identifikována jako chelidonin. Oba izolované alkaloidy byly podrobeny studii inhibice lidské erytrocytární acetylcholinesterázy a lidské sérové butyrylcholinesterázy. U stylopinu byly stanoveny hodnoty: IC50 (AChE) = 114 ± 2,9 µM, IC50 (BuChE) = >1000 µM. Tyto hodnoty jsou výrazně vyšší nežli u použitého standartu a proto se nepředpokládá jeho budoucí využití v terapii Alzheimerovy choroby. U chelidoninu byly stanoveny tyto hodnoty: IC50 (AChE) = 26,84 ± 1,2 µM, IC50 (BuChE) = 31,86 ± 1,4 µM. Zajímavá je především jeho aktivita vůči BuChE, která je...
|
host ::
RSS.