|
|
Charakterizace redukce flubendazolu u člověka in vitro
Štěpánková, Jana ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Jana Štěpánková Vedoucí rigorózní práce: Prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název rigorózní práce: Charakterizace redukce flubendazolu u člověka in vitro Flubendazol (FLU) je anthelmintikum benzimidazolového typu, používané k léčbě a prevenci helmintóz hospodářských i volně žijících zvířat. FLU je také registrován pro léčbu parazitóz způsobených střevními hlísticemi u lidí. Mechanismus jeho účinku spočívá ve specifické vazbě na tubulin, která naruší strukturu a funkci mikrotubulů. Výhodou tohoto léčiva je i nízká systémová toxicita. Proto se nyní studuje i jeho aktivita protinádorová. Cílem této rigorózní práce bylo charakterizovat redukci FLU v lidských jaterních subcelulárních frakcích, protože tyto informace v dostupné literatuře dosud chybí. Byla studována stereospecifita, subcelulární lokalizace, preference koenzymů, enzymová kinetika redukce FLU a aktivita enzymů, které se redukce FLU účastní. Výsledky měření prokázaly, že FLU je více redukován v cytosolu a je preferován redukovaný koenzym nikotinamidadenindinukleotidfosfát (NADPH). Redukce FLU je u člověka striktně stereospecifická, protože FLU byl redukován pouze na (+)-enantiomer FLUR. Při studiu enzymové kinetiky redukce FLU v cytosolu,...
|
|
|
Vliv přírodních látek na transport lékovými OATP transportéry
Zemčíková, Lucie ; Trejtnar, František (vedoucí práce) ; Mičuda, Stanislav (oponent) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Kandidátka: Mgr. Lucie Zemčíková Školitel: doc. PharmDr. František Trejtnar, CSc. Název dizertační práce: Vliv přírodních látek na transport lékovými OATP transportéry Membránové transportéry ze skupiny OATP (organic anion-transporting polypetides) patří mezi přenašeče odpovědné za transport některých léčiv (např. hypolipidemik ze skupiny statinů) a dalších xenobiotik přes biologické membrány a bariéry v organismu. Tyto transportní proteiny tedy hrají důležitou úlohu při farmakokinetických procesech jako je absorpce, distribuce a eliminace. Potenciální modulace jejich transportní funkce přírodními látkami běžně se vyskytujícími v potravě rostlinného původu či potravních doplňcích může mít za následek změny koncentrací jejich substrátů (léčiv) v buňkách a tělních tekutinách, což může ovlivnit účinek i toxicitu těchto léčiv. Cílem práce bylo získat údaje o interakci vybraných přírodních látek s lidskými transportéry OATP2B1 a OATP1A2, které se podílejí na uptake léčiv na významných farmakokinetických bariérách organismu, a o jejich schopnosti ovlivnit transport lékových substrátů těmito transportéry. Pro studium byly vybrány přírodní látky ze skupiny flavonoidů a isoflavonů. Společnou charakteristikou...
|
|
|
Vliv parazita na aktivitu biotransformačních a antioxidačních enzymů ve střevě hostitele
Mládková, Zuzana ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Zuzana Mládková Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv parazita na aktivitu biotransformačních a antioxidačních enzymů ve střevě hostitele Hymenolepis diminuta, tasemnice krysí, je běžně využívána jako modelový organismus třídy Cestoda pro studium fyziologie, biochemie a metabolismu léčiv u tasemnic. V poslední době je Hymenolepis diminuta zkoumána i v souvislosti s helmintoterapií a potenciálním využitím v léčbě střevních zánětlivých chorob. Cílem této studie bylo zjistit, jak H. diminuta ovlivní aktivitu detoxikačních enzymů ve střevě hostitele. Nejdříve bylo infikováno 6 potkanů (kmene Wistar). Těm byly podány cysticerkoidy (larvální stádia tasemnice krysí) získané po předchozí izolaci z nakaženého brouka Tenebrio molitor (mezihostitel). Současně byl podán kontrolní skupině dalších 6 potkanů fyziologický roztok. Všichni potkani pak byli chováni ve vivariu po dobu 2 měsíců za střídavého světelného režimu (12 h světlo/tma). Následně byly tasemnice vyjmuty ze střev infikovaných potkanů a ze všech potkanů byla izolována střevní mukóza obsahující metabolicky aktivní enzymy. Poté byly připraveny subcelulární frakce pro následný in vitro experiment. K měření aktivity enzymů...
|
|
|
Vliv trabektedinu na buňky odvozené z kolorektálního karcinomu
Bobek, Jaroslav ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická Fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Jaroslav Bobek Školitel: Doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Školitel specialista: RNDr. Veronika Skarková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv trabektedinu na buňky odvezené z kolorektálního karcinomu Trabektedin je alkaloid, který se přirozeně vyskytuje v mořských pláštěncích Ecteinascidia turbinata. Jeho mechanismus účinku spočívá v tvorbě komplexů s DNA, transkripčními faktory a jadernými proteiny. To způsobí blokádu transkripce a poruchu funkce reparačních mechanismů DNA v buňce. Toho můžeme následně využít v léčbě některých typů nádorových onemocnění, konkrétně v této práci jsme zkoumali jeho vliv na buňky kolorektálního karcinomu. Tuto látku jsme testovali na nádorových buněčných liniích SW 480 (odvozena od primárního ložiska adenokarcinomu) a SW 620 (metastatická linie z lymfatických uzlin od stejného pacienta). Primární buněčné kultury označené 36B a 39B byly získány odběrem od pacientů ve Fakultní nemocnici Hradec Králové a jejich následnou kultivací. Primární kultury 36B a 39B byly odvozeny z primárního ložiska nádoru tlustého střeva. U všech linií byla testována cytotoxicita trabektedinu a následně vypočítány hodnoty inhibiční koncentrace IC50. U buněk 36B a 39B byly tyto hodnoty použity při zkoušce...
|
|
|
Účinek flavonoidů na vybrané biotransformační enzymy
Procházková, Eliška ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Skálová, Lenka (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Eliška Procházková Školitel: Prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Účinek flavonoidů na vybrané biotransformační enzymy Katechiny patřící mezi flavonoidy jsou v posledních letech zkoumanými polyfenolickými složkami zeleného čaje. Převážně je sledován jejich prospěšný vliv na lidský organismus. Roste popularita doplňků stravy s vysokým obsahem flavonoidů, čímž ale může docházet k ovlivnění široké řady biotransformačních enzymů a tím i metabolismu velkého množství léčiv. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jak vybrané katechiny - katechin (C), epikatechin (EC), epikatechin-3-gallát (ECG), epigallokatechin (EGC), epigallokatechin-3-gallát (EGCG) a extrakt ze zeleného čaje - polyfenon 60 (P) ovlivňují životnost Caco-2 buněk a jaký mají účinek na aktivitu a expresi vybraných biotransformačních enzymů v těchto střevních buňkách - cytochromů P450 (CYP) isoforem 1A1, 1A2 a 3A, aldehydreduktasy (AKR1A1), aldo-ketoreduktas 1C (AKR1C), karbonylreduktasy 1 (CBR1), UDP-glukuronosyltransferasy (UGT), sulfotransferasy (SULT) a glutathion-S-transferasy (GST). Testy viability (NRU test a MTT test) prokázaly, že katechiny (EGC, EGCG a P) ve vyšších koncentracích (10 µM a 25 µM) snižují životnost...
|
|
|
Vliv seskviterpenů na detoxikační enzymy v jaterních řezech
Horáčková, Hana ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Hana Horáčková Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv seskviterpenů na detoxikační enzymy v jaterních řezech Seskviterpeny jsou sekundární metabolity produkované rostlinami, bakteriemi a houbami. Zajišťují přežití a konkurenceschopnost rostliny. Jsou složené ze tří izoprenových jednotek. Vykazují protizánětlivý, antimalarický, antibakteriální, antivirový, antioxidační, analgetický, antifungální, či protimutagenní efekt. Již dlouhá léta jsou používány v lidové medicíně a jako koření. Cílem této práce bylo zjistit, jak ovlivňují vybrané seskviterpeny - α-humulen (HUM), β-karyofylen (CAR) a karyofylen-oxid (CAO) aktivitu vybraných biotransformačních enzymů - karbonylreduktasy 1 (CBR1), aldoketoreduktasy (AKR1C9), aldehydreduktasy (AKR1A1), UDP-glukuronosyltransferasy (UGT), NAD(P)H- chinonoxidoreduktasy 1 (NQO1), glutahion-S-transferasy (GST), sulfotransferasy (SULT) a cytochromu P450 1A1/2, 2B a 3A (CYP1A1/2, CYP2B/3A). Práce byla provedena na modelu ultratenkých tkáňových řezů z jater laboratorního potkana (Rattus norvegicus, kmen Wistar). Tloušťka řezu byla 200-250 μm a průměr 8 mm. Jaterní řezy byly 30 minut preinkubovány a následně inkubovány v přítomnosti seskviterpenů...
|
|
|
Purification of membrane bound enzyme DHRS7B
Mariničová, Valéria ; Novotná, Eva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Valéria Mariničová Vedúca diplomovej práce: RNDr. Eva Novotná, Ph.D. Názov diplomovej práce: Purifikácia membránovo viazaného enzýmu DHRS7B Membránovo viazaný enzým DHRS7B, pochádzajúci z nadrodiny SDR (dehydrogenázy/reduktáz s krátkym reťazcom), patrí medzi málo preskúmané proteíny ľudského organizmu. Aj napriek nedostatku informácii o jeho vlastnostiach bol pozorovaný u myší, kde sa označuje ako PexRap s lokalizáciou v peroxizomoch a endoplazmatickom retikule (ER). Ide teda o peroxizomálny redukujúci proteín, ktorý ako kofaktor využíva NADPH. V myšacom organizme sa prejavila jeho aktivita na biosyntéze peroxizomálnych éterových lipidov počas adipogenézy. O úlohe ľudského DHRS7B v bunke, a prípadne niektorých ochoreniach, sa doposiaľ iba špekuluje a preto sa stáva predmetom výskumov. Cieľom práce bolo získať čistý rekombinantný ľudský enzým DHRS7B pripravený v Sf9 bunkách. Keďže je to membránový proteín bolo potrebné nájsť vhodný detergent, ktorý dokáže enzým DHRS7B vyňať z fosfolipidickej membrány a zároveň zachovať jeho aktivitu. Najvhodnejším sa javil detergent DDM v koncentrácii 1:1 (w/w) proteín:detergent. Ďalšími krokmi bola purifikácia, afinitná chromatografia pri ktorej sa získal čistý proteín...
|
|
|
Jaterní řezy - modelový systém pro studium vlivu seskviterpenů na detoxikační enzymy
Slavíčková, Zlata ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Ambrož, Martin (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Zlata Slavíčková Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Název diplomové práce: Jaterní řezy - modelový systém pro studium vlivu seskviterpenů na detoxikační enzymy Seskviterpeny se přirozeně vyskytují převážně ve vyšších rostlinách jako sekundární metabolity, společně s monoterpeny jsou hlavní součástí rostlinných silic. Seskviterpeny jsou biologicky aktivní sloučeniny, mezi jejich biologické vlastnosti patří protizánětlivý, protirakovinný, antioxidační, antibakteriální a antifungální účinek. Cílem této diplomové práce bylo zjistit vliv tří strukturně podobných acyklických seskviterpenů cis-nerolidolu (CNER), trans-nerolidolu (TNER) a farnesolu (FAR) na aktivitu vybraných biotransformačních enzymů - aldo-ketoreduktasa (AKR1A1 a AKR1C9), karbonylreduktasa 1 (CBR1), NAD(P)H-chinonoxidoreduktasa 1 (NQO1), cytochrom P450 (CYP1A1, CYP1A2, CYP2B CYP3A), sulfotranferasa (SULT), glutathion-S-transferasa (GST), UDP-glukuronosyltransferasa (UGT) v játrech potkana. Vliv seskviterpenů na vybrané enzymy byl studován na ultratenkých precizních řezech o přibližné tloušťce 200-250 µm a průměru 8 mm. Tkáňové řezy byly získány z jater laboratorního potkana (Rattus norvegicus, kmen Wistar). Jaterní řezy byly po dobu 8...
|
|
|
Vliv albendazolu na aktivitu vybraných enzymů u tasemnice Hymenolepis diminuta
Krejzová, Andrea ; Vokřál, Ivan (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Andrea Krejzová Školitel: PharmDr. Ivan Vokřál, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv albendazolu na aktivitu vybraných enzymů u tasemnice Hymenolepis diminuta Účinnost anthelmintik, používaných pro terapii onemocnění způsobených helminty, není vždy dostačující a v některých případech se setkáváme přímo s rezistencí na tato léčiva. Helminti, mezi něž patří i tasemnice, se dokáží toxickému vlivu anthelmintik bránit pomocí řady mechanismů. Mezi tyto mechanismy patří také enzymy metabolizující xenobiotika a transportní proteiny. Jsou-li enzymy metabolizující xenobiotika indukovány, může být účinnost terapie významně snižována. Vliv xenobiotika metabolizujících enzymů na vznik rezistence u řady helmintů je již znám a popsán. U tasemnic dosud tyto informace schází. Hlavním cílem této práce bylo stanovení vlivu albendazolu na aktivitu vybraných xenobiotika metabolizujících enzymů tasemnice krysí (Hymenolepis diminuta). Tasemnice byly inkubovány s albendazolem (1 μM a 10 μM) po dobu 24 hodin. Následně byly stanoveny v cytosolické, mikrosomální a mitochondriální frakci aktivity vybraných enzymů. V této práci jsme se zaměřili na aktivitu karbonylreduktasy, dvě isoformy aldoketoreduktasy (AKR1C a AKR1A1),...
|
|
|
Modulace biotransformačních a antioxidačních enzymů vybranými přírodními látkami
Lněničková, Kateřina ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Anzenbacherová, Eva (oponent) ; Trejtnar, František (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Kateřina LNĚNIČKOVÁ Školitel: prof. Ing. Barbora SZOTÁKOVÁ, Ph.D. Název disertační práce: MODULACE BIOTRANSFORMAČNÍCH A ANTIOXIDAČNÍCH ENZYMŮ VYBRANÝMI PŘÍRODNÍMI LÁTKAMI V posledních desetiletích významně stoupl zájem o různé doplňky stravy, které obsahují léčivé byliny, rostlinné extrakty či izolované účinné látky. Jejich spotřeba celosvětově roste, a protože jsou obecně považovány za bezpečné, jsou mnohdy konzumovány v nepřiměřeně velkých dávkách. Po vstupu do organismu jsou tyto látky, stejně jako jiná xenobiotika, modifikovány především prostřednictvím biotransformačních enzymů a současně mohou tyto enzymy ovlivňovat. Případná modulace aktivity (indukce nebo inhibice) biotransformačních enzymů může významně ovlivnit farmakokinetiku současně podávaných léčiv. Pro bezpečné užívání přírodních látek je tedy nezbytná znalost jejich možného působení na biotransformační enzymy. Cílem předkládané disertační práce bylo studovat účinky extraktů vybraných rostlin a jejich obsahových látek s biologickým účinkem na aktivitu a expresi biotransformačních a antioxidačních enzymů. Zaměřili jsme se na studium účinků extraktů a obsahových látek z brusinky velkoplodé (Vaccinium macrocarpon, Ericaceae), zeleného čaje...
|
host ::
RSS.