|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II.
Malý, Lukáš ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Malý, L.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 49 s. Získaný diethyetherový extrakt Fumaria officinalis L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu. Preparativní TLC a krystalizace vedla k izolaci 5 alkaloidů ze zadané frakce. Alkaloidy byly identifikovány na základě GC-MS, 1 H a 13 C NMR spekter, optické otáčivosti a teploty tání jako protopin, kryptopin, (-)-fumaricin, (+)-fumarilin a (+)-parfumidin. Izolované alkaloidy byly testovány na jejich inhibiční aktivitu vůči acetyl- a butyrylcholinesterase a vůči prolyloligopeptidase a tyto aktivity IC50 byly porovnány se standardy. Nejzajímavější aktivitu oproti standardu galanthaminu (IC50 AChE 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BuChE 42,30 ± 1,30 µM) vykazoval protopin (IC50 AChE 345,4 ± 24 µM, IC50 BuChE 239,6 ± 22,3 µM) a kryptopin (IC50 AChE 477,71 ± 47,33 µM, IC50 BuChE 270,82 ± 39,12 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nedosahuje takové inhibiční aktivity jako použité standardy. Nejvyšší inhibiční aktivitu POP vykazoval (+)-parfumidin (IC50 POP 99,2 µM), dosahující vyšší aktivity než přírodní...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin V. Alkaloidy Vinca minor L.
Bouz, Lukáš ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Bouz L.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin V. Alkaloidy Vinca minor L. Diplomová práce, Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie. Hradec Králové 2016. Ze suché nati Vinca minor L. (Apocynaceae) byl získán sumární extrakt, který byl rozdělen sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu na 531 frakcí. Dalším dělením frakcí, následnou preparativní tenkovrstvou chromatografií a krystalizací, byly získány 2 látky alkaloidní povahy s označením LB-2 a LB-3. Látky byly identifikovány pomocí GC/MS, 1 H- a 13 C-NMR spekter a za použití fyzikálně-chemických metod. Z analýzy látek vyplynulo, že se jedná o indolové alkaloidy (+)-vinkaminorein (LB-2) a (+)-vinkamin (LB-3). Obě látky byly podrobeny testování na inhibiční aktivitu vůči lidským cholinesterasám. (+)-vinkamin nevykazoval v porovnání se standardy (galanthamin IC50 AChE: 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BChE: 42,30 ± 1,30 µM; huperzin A IC50 AChE: 0,033 ± 0,001 µM) prakticky žádnou aktivitu. Naopak (+)-vinkaminorein ukázal relativně vysokou selektivní inhibici BChE (IC50 = 8,71 ± 0,49 µM), na AChE nepůsobil. Klíčová slova: Vinca minor L., indolové alkaloidy, vinkamin, vinkaminorein, Alzheimerova nemoc, acetylcholinesterasa, butyrylcholinesterasa
|
|
|
Testování účinnosti potencionálních léčiv Alzheimerovy choroby
Dolejšová, Adéla ; Herink, Josef (vedoucí práce) ; Vopršalová, Marie (oponent)
Adéla Dolejšová Testování účinnosti potencionálních léčiv Alzheimerovy choroby Diplomová práce Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Farmacie Cílem této práce bylo zjistit, zda již zavedená Ellmanova metoda, která je využívána pro stanovení irreverziblních inhibitorů AChE, bude vhodnou metodou pro měření inhibitorů reverzibilních. Dále byla stanovena účinnost nově nasyntetizovaných inhibitorů AChE, které by mohly být v budoucnu použity na léčbu AD či jako profylaxe před nervově paralytickými látkami. Navíc bylo porovnáváno ovlivnění účinnosti inhibitorů AChE po intramuskulárním a intraperitoneálním způsobem podání. Testování probíhalo in vivo na potkanech kmene Wistar. V prvním pokusu byly aplikovány standardní inhibitory AChE (takrin, 7-MEOTA, donepezil, rivastigmin) k ověření metody. Ve druhém pokusu byly podávány nově nasyntetizované inhibitory AChE (K 298, K 344, K 474). Výsledky potvrdily účinnost testované metody na standardně používaných inhibitorech jako je donepezil a rivastigmin. Z nově nasyntetizovaných inhibitorů K 298, K 344 a K 474 neprokázal žádný z nich výraznou inhibiční aktivitu. Klíčová slova: acetylcholinesterasa, inhibitory acetylcholinesterasy, Alzheimerova choroba, cholinergní systém, Ellmanova metoda
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) I.
Kostelník, Jan ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Kostelník J.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) I. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 63 s. Cílem diplomové práce bylo izolační zpracování spojené frakce č. 55-67 (A2) získané ze sumárního alkaloidního extraktu rostliny Fumaria officinalis L. (Fumariaceae). Za pomoci chromatografických metod byly izolovány tři alkaloidy, které byly dále identifikovány pomocí strukturní analýzy (GC-MS, NMR). Tyto tři alkaloidy byly určeny běžnými chromatografickými metodami a poté byly identifikovány na základě strukturní analýzy, optické otáčivostí a teploty tání jako (-)-O-methylfumarofycin, (-)-sinaktin a (-)-stylopin. U izolovaných látek byla stanovena inhibiční aktivita vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase, lidské sérové butyrylcholinesterase a prolyl oligopeptidase. Naměřené hodnoty byly vyjádřeny jako hodnoty IC50 ((-)-stylopin: IC50 AChE a IC50 BuChE > 1000 μM, IC50 POP > 1000 mM; (-)-O-methylfumarofycin: IC50 AChE = 963,10 ± 135,98 µM, IC50 BuChE = 1771,0 ± 380,94 µM, IC50 POP - neměřena; (-)-sinaktin IC50 AChE = 632,0 ± 68,12 µM, IC50 BuChE = 8154,3 ± 981,42 µM, IC50 POP = 52,9 ± 1,8 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nevykazoval...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II.
Malý, Lukáš ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Malý, L.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Fumaria officinalis L. (Fumariaceae) II. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2014, 49 s. Získaný diethyetherový extrakt Fumaria officinalis L. byl rozdělen na frakce sloupcovou chromatografií za použití lékařského benzínu, chloroformu a ethanolu. Preparativní TLC a krystalizace vedla k izolaci 5 alkaloidů ze zadané frakce. Alkaloidy byly identifikovány na základě GC-MS, 1 H a 13 C NMR spekter, optické otáčivosti a teploty tání jako protopin, kryptopin, (-)-fumaricin, (+)-fumarilin a (+)-parfumidin. Izolované alkaloidy byly testovány na jejich inhibiční aktivitu vůči acetyl- a butyrylcholinesterase a vůči prolyloligopeptidase a tyto aktivity IC50 byly porovnány se standardy. Nejzajímavější aktivitu oproti standardu galanthaminu (IC50 AChE 1,710 ± 0,065 µM, IC50 BuChE 42,30 ± 1,30 µM) vykazoval protopin (IC50 AChE 345,4 ± 24 µM, IC50 BuChE 239,6 ± 22,3 µM) a kryptopin (IC50 AChE 477,71 ± 47,33 µM, IC50 BuChE 270,82 ± 39,12 µM). Žádný z izolovaných alkaloidů nedosahuje takové inhibiční aktivity jako použité standardy. Nejvyšší inhibiční aktivitu POP vykazoval (+)-parfumidin (IC50 POP 99,2 µM), dosahující vyšší aktivity než přírodní...
|
|
|
Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae)I.
Adamcová, Markéta ; Chlebek, Jakub (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Adamcová, M.: Studium biologické aktivity alkaloidů izolovaných z Argemone grandiflora (Papaveraceae) I. Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015. Cílem této práce byla izolace obsahových látek ze sumárního diethyletherového alkaloidního extraktu z Argemone grandiflora Sweet, jejich identifikace a určení inhibiční aktivity vůči lidské acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase a prolyloligopeptidase. S využitím chromatografických metod byly získány 4 alkaloidy, které byly identifikovány jako (+)- laudanosin, protopin, (-)-argemonin a (-)-platycerin. Tyto látky byly testovány na jejich inhibiční aktivitu IC50: (+)-laudanosin (IC50 AChE = 617,00 ± 46,55 μM, IC50 BuChE = 644,77 ± 55,52 μM, IC50 POP = dosud nezměřeno); protopin (IC50 AChE = 229,98 ± 21,02 μM, IC50 BuChE = 208,87 ± 17,67 μM, IC50 POP ˃ 1000 μM); (-)-argemonin (IC50 AChE = 4677,75 ± 1241,08 μM, IC50 BuChE = 885,45 ± 119,50 μM, IC50 POP = 337 ± 83,1 μM); (-)-platycerin (IC50 AChE = 223,65 ± 19,61 μM, IC50 BuChE = 1651,25 ± 327,7 μM, IC50 POP = 687 ± 74 μM). V porovnání se standardy galanthaminem (IC50 AChE = 1,710 ± 0,065 μM, IC50 BuChE = 42,30 ± 1,30 μM) a huperzinem A (IC50 AChE = 0,033 ± 0,001 μM, IC50 BuChE > 1000 μM)...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin III. Alkaloidy Narcissus tazetta L.
Panchartková, Markéta ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Opletal, Lubomír (oponent)
Panchartková, M.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin III. Alkaloidy Narcissus tazetta L., Diplomová práce, Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové, 2015, 67s. Rostliny čeledi Amaryllidaceae obsahují alkaloidy, které mají rozmanité biologické účinky. Je popsán efekt antivirový, protinádorový, antibakteriální, antimalaritický a antifungální. Významná je také inhibiční aktivita lidských ChE. Cílem této diplomové práce byla příprava sedmi alkaloidních extraktů jednotlivých kultivarů rodu Narcissus a jejich GC/MS analýza, díky které byly identifikovány různé strukturní typy alkaloidů čeledi Amaryllidaceae. Nejčastěji identifikované alkaloidy byly homolykorinového, lykorinového, tazettinového a galantaminového typu. Dále byla změřena biologická aktivita vůči lidské acetylcholinesteráze (HuAChE) a butyrylcholinesteráze (HuBuChE). Nejvyšší inhibibiční aktivitu IC50 měl alkaloidní extrakt Narcissus jonquilla cv. New baby s hodnotami vůči HuAChE 13,78 ± 1,48 a vůči HuBuChE 96,12 ± 9,55. Důvodem byl nejspíše nejvyšší obsah galantaminu ze všech kultivarů, který jak je známo, vykazuje vysoké inhibiční aktivity. Inhibiční aktivity ostatních kultivarů byly velmi nízké. Bylo u nich identifikováno pouze nízké...
|
|
|
Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L.
Nováková, Dana ; Ločárek, Miroslav (vedoucí práce) ; Chlebek, Jakub (oponent)
Nováková D.: Biologická aktivita sekundárních metabolitů rostlin I. Alkaloidy Narcissus jonquilla L. Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové, Katedra Farmaceutické botaniky a ekologie, Hradec Králové 2015, 70 s. Předmětem diplomové práce byla příprava alkaloidního extraktu, za účelem identifikace alkaloidních obsahových látek a stanovení inhibičních aktivit. Tato aktivita má využití v léčbě Alzheimerovy nemoci. Alkaloidní extrakty ze sedmi variet (Sundial, Sundisc, Sweetness, Waterperry, Simplex, Twinkling Yellow, Yazz) rostliny Narcissus jonquilla L. (Amaryllidaceae) byly testovány na acetylcholinesterázovou (HuAChE) a butyrylcholinesterázovou (HuBuChE) inhibiční aktivitu a alkaloidní obsahové látky. 23 alkaloidů bylo stanoveno metodou GC/MS a 10 z nich bylo identifikováno pomocí hmotnostního spektra a retenčních časů. Všechny vzorky vykazovaly obsah galanthaminu, většina vzorků obsahovala lykorin a tazettin. Nadějná inhibiční aktivita vůči HuAChE byla prokázána u Narcissus jonquilla L. cv. Waterperry s hodnotami IC50 6,53 ± 0,88 μg/ml. Nejvyšší inhibiční aktivitu proti HuBuChE vykázal extrakt rostliny Narcissus jonquilla L. cv. Sundisc s hodnotou IC50 5,09 ± 0,64 μg/ml. Klíčová slova: Alzheimerova choroba, Amaryllidaceae, narcis, GC/MS, alkaloidy, acetylcholinesteráza,...
|
|
|
Biologická aktivita obsahových látek rostlin XXIII. Alkaloidy Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE a jejich účinek na acetylcholinesterasu a butyrylcholinesterasu.
Kaluzsná, Blanka ; Opletal, Lubomír (vedoucí práce) ; Cahlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmaceutické botaniky a ekologie Kandidát: Bc. Blanka Kaluzsná Školitel: Prof. RNDr. Lubomír Opletal, CSc. Název diplomové práce: Biologická aktivita obsahových látek rostlin XXIII. alkaloidy Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE a jejich účinek na acetylcholinesterasu a butyrylcholinesterasu Ze suchých hlíz Corydalis cava (L.) SCHWEIGG. et KOERTE byl připraven diethyletherový extrakt, který obsahoval terciární bazické alkaloidy. Sloupcovou chromatografií a následnou krystalizací byla získána podfrakce značená 2/B, ze které byly preparativní TLC izolovány 3 alkaloidy, které byly na základě výsledků GC/MS a 1 H a 13 C NMR analýzy stanoveny jako (+)-kanadin, (+)-tetrahydropalmatin, domestin. Izolované alkaloidy byly testovány spektrofotometrickou Ellmanovou metodou na inhibiční aktivitu vůči lidské erytrocytární acetylcholinesterase (HuAChE) a plazmatické butyrylcholinesterase (HuBuChE). Z izolovaných alkaloidů vykazoval (+)-kanadin, ve srovnání s referenčními látkami, relativně vysokou inhibiční aktivitu vůči HuAChE (12,4 µM). (+)-Tetrahydropalmatin a (+)-domestin nevykazovaly v tomto směru žádnou významnou inhibiční aktivitu, jak vůči HuAChE, tak HuBuChE. Klíčová slova: Corydalis cava, (+)-kanadin, (+)-tetrahydropalmatin,...
|
|
|
Magnetické částice jako reverzibilní nosič pro enzymové elektrody
Janíček, Zdeněk ; Žeravík,, Jiří (oponent) ; Skládal,, Petr (vedoucí práce)
Diplomová práce obsahuje informace o používaných enzymech, biosenzorech, enzymových biosenzorech a magnetických částicích. Cholinesterasa (ChE) je obecné označení pro dva příbuzné enzymy, vzájemně se lišící výskytem a biologickou funkcí. Acetylcholinesterasa (AChE) je nezbytná při přenosu nervového vzruchu. Nachází se na cholinergních synapsích, kde působí hydrolýzu neurotransmiteru acetylcholinu a tím i terminaci nervového vzruchu. Příbuzná je butyrylcholinesterasa (BChE) přítomná v séru. Experimentální část byla zaměřena na elektrochemické enzymové biosenzory s cholinesterasou využívající magnetické částice pro reversibilní obnovu biorekogniční vrstvy. Imobilizace cholinesterasy na magnetické částice byla provedena kovalentní vazbou po aktivaci glutaraldehydem. Měření aktivity probíhalo s acetylthiocholinem jako substrátem v průtočném systému, magnetické částice byly zachyceny před platinovou elektrodou a produkovaný thiocholin se detekoval amperometricky. Cílem bylo měřit inhibici AChE. Významná je inhibice ChE způsobovaná některými léky a pesticidy na bázi organofosfátů. Zde byla testována inhibice AChE pesticidem dichlorvosem. Důraz byl kladen na nalezení vhodných experimentálních podmínek pro vytvoření automatizovaného postupu k měření aktivity AChE, který byl založen na autoinjektoru a pumpách firmy Gilson spolu s programem 735 pro definici pracovní konfigurace, přípravu měřících skriptů a provádění aplikačních metod.
|
host ::
RSS.