|
|
Otěrové částice polyethylenu v okolí kloubních náhrad - jejich vlastnosti, distribuce a možný mechanizmus jejich nežádoucího biologického působení
Zolotarevová, Eva
Tato dizertační práce v podstatě uzavírá okruh otázek, který vznikl zadáním problému před více lety (Doc. RNDr. Zdeněk Horák, CSc., soukromé sdělení). Podařilo se optimalizovat původní izolační postup vyvinutý v naší laboratoři pro polyethylenové otěrové částice, přizpůsobit ho pro izolace ve velkém měřítku, poznat jejich fyzikálně- chemické vlastnosti a podle toho s nimi zacházet. Umožnilo to mimo jiné kvantifikovat otěrové částice nejen relativně, ale i absolutně. Bylo také třeba vyvrátit názor některých pracovníků, kteří nemají zkušenosti s centrifugací, že použití centrifugace může ovlivňovat morfologii izolovaných částic. Otázka distribuce polyethylenových částic v okolí endoprotéz kyčelního kloubu byla vlastně řešena na dvou úrovních. Na "makroskopické" úrovni bylo ukázáno, ve kterých zónách okolo endoprotézy se vyskytuje nejvíce otěrových částic (tyto výsledky nejsou součástí dizertace). Dále se na "mikroskopické" úrovni sledovala jejich distribuce v granulomové tkáni ze zón v okolí endoprotéz, kde částic bylo nejvíce. Proto tam granulomová tkáň vznikala. Ukázalo se, že mezi ortopedy běžný výraz "osteoagresivní granulom" je poněkud zavádějící. Granulom není vůči kostní tkáni agresivní. Naopak, vznik granulomu snižuje efektivní množství otěrových částic s negativními biologickými vlastnostmi....
|
|
|
Otěrové částice polyethylenu v okolí kloubních náhrad - jejich vlastnosti, distribuce a možný mechanizmus jejich nežádoucího biologického působení
Zolotarevová, Eva ; Gallo, Jiří (vedoucí práce) ; Rauch, Pavel (oponent) ; Horák, Zdeněk (oponent)
UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA KATEDRA BIOCHEMIE OTĚROVÉ ČÁSTICE POLYETHYLENU V OKOLÍ KLOUBNÍCH NÁHRAD - JEJICH VLASTNOSTI, DISTRIBUCE A MOŽNÝ MECHANISMUS JEJICH NEŽADOUCÍHO PŮSOBENÍ SOUHRN DIZERTAČNÍ PRÁCE Eva Zolotarevová Školitel: Doc. MUDr. Jiří Gallo, PhD. Školitel - konzultant: Prof. RNDr. Gustav Entlicher, CSc. PRAHA 2010 Tato práce byla vypracována v rámci Grantového projektu Národního programu výzkumu II. č.: 2B06096 s názvem "Sledování a minimalizace otěru polymeru UHMWPE v kloubních náhradách" poskytnutého Ministerstvem školství, mládeže a tělovýchovy ČR. Obr. titulní strany: Polyethylenová otěrová částice izolovaná z granulomové tkáně z okolí endoprotézy kyčelního kloubu; snímek z elektronového mikroskopu; velikost částice cca 90 x 80 µm; dobarveno PRAHA 2010 Eva Zolotarevová Úvod Úvod Pro mnoho lidí na celém světě je náhrada nevratně poškozeného kloubu implantátem často jedinou cestou, jak se vrátit do běžného života bez bolesti a omezení v pohybu. V současné době jsou kladeny čím dál větší nároky na kvalitu všech komponent náhrad, a to zejména ve smyslu kvality použitých materiálů, jelikož biomechanické vlastnosti kyčelních a kolenních klubů patří dnes již k vyřešeným otázkám. Pro výrobu kloubních náhrad se nejčastěji používají slitiny kovů (Cr, Co, Mo, Ti), keramika,...
|
|
|
Analýza variability genomů Nepovirů (GFLV a ArMV) v produkčních vinicích vinařské oblasti Morava
Eichmeier, Aleš
Disertační práce byla zaměřena na studium genomů nepovirů GFLV a ArMV, zejména na studium variability těchto genomů. Dále se práce zabývá charakteristikou izolátů těchto nepovirů a charakteristikou jejich nepříliš prozkoumaných genomových částí z oblasti RNA1, konkrétně oblastí kódujících proteiny 1BHel a 1EPol. Určeným cílem této disertační práce bylo jednoznačně identifikovat rostliny révy vinné, které byly infikovány nepoviry GFLV a ArMV. Na základě navržení specifických primerových kombinací byla determinována sekvenční homologie kódujících sekvencí, a tím prokázán stupeň variability. Jedním z cílů práce bylo také standardizovat a adaptovat diagnostický systém k detekci nepovirů GFLV a ArMV v podmínkách laboratoře ústavu Mendeleum na ZF Mendelu v Lednici. Práce byla založena na hypotéze, že variabilita obou zkoumaných nepovirů je v rámci jednotlivých genomových částí nepovirů GFLV a ArMV značná. Výsledky práce byly získány zejména na základě sekvenačních analýz, provedených na jednokapilárovém automatickém sekvenátoru ABI-PRISM 310 (Applied Biosystems, Carlsbad, USA), které byly vyhodnocovány pomocí software CLC Main Workbench 5 (CLC Bio, Aarhus, Dánsko). Pomocí téhož software byl navržen real-time PCR TaqMan multiplex systém, pomocí něhož je možné detekovat a zároveň kvantifikovat nepoviry GFLV a ArMV simultánně. V práci byly sekvencovány a analyzovány genetické kódy na úrovni nukleotidů pro proteiny 2BMP, 2CCP, 1BHel a 1EPol. První z výčtu byl hodnocen zejména kvůli důležitosti pro navržení diagnostického real-time PCR TaqMan multiplex systému, v tomto případě bylo osekvencována genomová porce 290 pb 14ti izolátů GFLV a ArMV, stupeň variability byl stanoven jako sekvenční homologie v rámci nukleotidů na 71,7-97,6%. Parciální genetický kód pro 2CCP byl hodnocen v rámci 6ti izolátů GFLV a variabilita se v rámci 935 pb úseku pohybovala v rozmezí od 83% do 86% na úrovni nukleotidů a 81 až 91% na úrovni aminokyselin. Parciální genetický kód pro 1BHel byl osekvencován v rámci 6ti izolátů GFLV a variabilita kódu o velikosti 379 pb byla v rámci všech dostupných GFLV a ArMV izolátů stanovena v rámci nukleotidů 86,4-98,9% a v rámci aminokyselin 96-100%. Parciální genetický kód pro 1EPol byl hodnocen v rámci 6ti izolátů GFLV a variabilita kódu o velikosti přibližně 365 pb byla v rámci všech dostupných GFLV a ArMV izolátů stanovena na 79,5-100% a 91,4-100% na úrovni nukleotidů a na úrovni aminokyselin. Všechny získané sekvence delší než 300 pb byly uloženy do databáze GenBank/NCBI. Získané parciální kódy pro proteiny 1BHel a 1EPol kódované molekulou RNA1 jsou unikátní. Prakticky práce poskytuje výsledky, které přímo sloužily jako podklady pro vytvoření různých vektorů určených k přípravě transgenního rostlinného materiálu, který by měl vykazovat rezistenci vůči nepoviru GFLV. Dále na základě výsledků této práce byla vytvořena certifikovaná metodika popisující nově navržený real-time PCR TaqMan multiplex systém, který slouží jako účinný diagnostický nástroj k simultánní detekci nepovirů GFLV a ArMV. V neposlední řadě byl tento systém úspěšně srovnán s metodou ELISA, což by mohlo být zajímavé zejména pro diagnostické laboratoře, které se zabývají certifikací množitelského materiálu.
|
|
|
Bezkontrastní MRI perfuzní zobrazování
Kruml, Ondřej ; Jiřík, Radovan (oponent) ; Krátká, Lucie (vedoucí práce)
Tato bakalářská práce je zaměřena na bezkontrastní techniky magnetické rezonance pro kvantitativní hodnocení prokrvení tkáně. Práce obsahuje popis základních funkčních principů magnetické rezonance a je zaměřena především na techniky Arterial Spin Labeling (ASL). Princip této metody spočívá ve využití protonů molekul vody v tepenné krvi jako nitrotělní kontrastní látky. Pomocí této metody je možné vytvořit mapu prokrvení libovolného orgánu bez použití invazivních technik a kontrastních látek. V této práci byla ke kvantifikaci prokrvení zvolena technika FAIR-RARE, jedna z technik z široké skupiny pulsního ASL.
|
|
|
Hodnocení migrace značených buněk v tkáni
Solař, Jan ; Skopalík, Josef (oponent) ; Čmiel, Vratislav (vedoucí práce)
Tato diplomová práce se zabývá rozborem moderních detekčních metod vizualizace, sledování a kvantifikace buněk v 3D prostoru. První část práce se zabývá optickými metodami detekce buněk. Je zde detailní rozbor problematiky fluorescenčního značení buněk a jejich detekce na konfokálním mikroskopu. Je zde popis vyvinutého algoritmu pro kvantifikaci celého buněčného objemu z mikroskopického obrazu. Díky tomu se porovnal signál fluorescence buněk v čase a podle jejich tvaru. Dále došlo k optimalizaci vizualizace vyvinutých tkáňových fantomů. Porovnaly se možnosti detekce buněk v těchto fantomech pomocí konfokální mikroskopie a OCT. Byl rovněž implementován algoritmus pro kvantifikaci buněk z OCT obrazů. Kromě konfokálního mikroskopu a OCT se buňky rovněž analyzovaly dalšími metodami. V poslední části je konkluze výsledků a srovnání jednotlivých použitých metod.
|
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.