|
Vliv perinatální hypoxie na motorický vývoj laboratorního potkana a možnosti ovlivnění
Vachovcová, Sylva ; Mareš, Pavel (vedoucí práce) ; Stuchlík, Aleš (oponent)
Závažná perinatální hypoxie tvoří podstatnou příčinu mozkového poškození u narozených dětí. Rešeršní část této Diplomové práce pojednává o krátkodobých a dlouhodobých motorických projevech laboratorního potkana, o motorických testech, pomocí kterých se motorika potkanů hodnotí, o hypoxickém působení na nezralý centrální nervový systém a o působení látek na adenosinové A1 receptory v mozku. Cílem experimentální části Diplomové práce bylo hodnocení pozdních motorických projevů u potkanů ovlivněných perinatální hypoxií. Perinatální hypoxie byla provedena tak, že březí samice potkana byly umístěny do normobarické hypoxické komory (10 % O2) jedenáctý den březosti, kde porodily a expozice hypoxie byla ukončena 6. den po narození mláďat. Pro hodnocení motorického vývoje byla využita baterie koordinačně náročných motorických testů vždy adekvátních pro příslušný vývojový stupeň potkana. Perinatální hypoxie a její následky dále byly ovlivněny jednorázovou aplikací látky 2-chloro-N(6)-cyclopentyladenosin (CCPA), agonistou adenosinového A1 receptoru, 14. den po narození potkanů. Postižení potkani vykazovali motorické deficity a zpoždění v motorickém vývoji ve 3 ze 4 zvolených motorických testů v porovnání s potkany z kontrolní skupiny. Tyto motorické odchylky však již nebyly zaznamenány ve vývojovém stupni...
|
| |
|
Anti-oxidative stress response in Drosophila melanogaster - The role of adipokinetic hormone and adenosine
ZEMANOVÁ, Milada
In this thesis, the phenomena of the oxidative stress (OS) and anti oxidative stress responses in insects are described in a comprehensive review, and the outcomes of the experimental work are presented. The focus of the work was on defence reactions and their putative control by the adipokinetic hormone (AKH) and adenosine in the Drosophila melanogaster model. For this purpose, we studied the effect of the paraquat (oxidative stressor) treatment on adult flies and larvae carrying mutations in Akh (Akh1) and adenosine receptor (AdoR1) genes, and in both these genes together (Akh1 AdoR1 double mutant). The initial mortality tests revealed the double mutant Akh1 AdoR1 was more sensitive to OS than either of the single mutants. The AKH synthesis under the OS condition seems to be out of the gene expression control, since the increase of an AKH amount in CNS was not linked with the stimulation of Akh gene expression after a paraquat treatment. Further, the gene expression of the antioxidant enzyme glutathione S transferase D1 (GstD1) increased rapidly with OS, though the enzyme activity increased negligibly regardless of both the OS and mutations. Interestingly, the relative expression of GstD1 gene was minimal in the double Akh1 AdoR1 mutant; thus, it was concluded that both AKH and adenosine are employed in the GstD1 gene expression control. Similarly, AKH and adenosine seem to act in tandem in glutathione (GSH) regeneration, since the GSH level was significantly lower in all untreated deficient flies with the maximal effect in the Akh1 AdoR1 double mutant; accordingly, the reduction in the GSH level was enhanced by paraquat treatment. Altogether, the important roles of both AKH and adenosine in the anti oxidative stress response in D. melanogaster were demonstrated.
|
|
Efekt ADGF-A RNAi na imunitní odpověď \kur{Drosophily melanogaster} po infekci parazitickou vosou
ŠNEBERGEROVÁ, Pavla
V minulých studiích se extracelulární adenosin ukázal jako důležitá signální molekula řídící dynamiku imunitní odpovědi u Drosophily melanogaster. Komplikovanost adenosinové signalizace u savců značně ztěžuje její výzkum in vivo, a tak i identifikaci této kaskády v regulaci imunitní odpovědi. Jelikož je mezi savci a bezobratlými jistá genetická a evoluční konzervovanost, Drosophila tak představuje jednoduchý systém, jak tyto složitější regulace studovat in vivo. Mutace adenosinového receptoru ve všech buňkách, stejně tak snížení exprese ENT2 v imunitních buňkách, zapříčinily snížení rezistence imunitního systému Drosophily vůči parazitoidovi. Cílem mé bakalářské práce bylo zjistit, jaký efekt na imunitní odpověď bude mít RNAi cílená proti mRNA adenosin deaminázy (ADGF-A), která za přirozených podmínek e-Ado odbourává.
|
| |
| |
|
Role of extracellular adenosine in Drosophila
FENCKOVÁ, Michaela
This thesis describes several aspects of the role for extracellular adenosine in Drosophila. Reverse genetic, molecular and microscopic methods together with the most forefront Drosophila research techniques have been applied to elucidate the role of adenosine signaling in the regulation of development, physiology and metabolism of Drosophila larvae. The thesis helps to establish the model for extracellular adenosine as a stress-signal for the release of energy stores. It also describes the elucidation of Drosophila extracellular adenosine production pathway by functional characterization of extracellular ATP/adenosine converting enzymes. Further, this thesis describes the attempt to study adenosine signaling by creation of tissue specific knock-down mutation of Drosophila adenosine receptor. Finally, it provides results of the utilization of in vivo fluorescent reporters for studying of the localization, function and interaction of enzymes implicated in adenosine signaling pathway.
|
|
Genetický screening dominantních supresorů adgf-a mutantního fenotypu u drozofily
HARTMANN, David
Extracelulární adenozin je důležitou signální molekulou mnoha fyziologických procesů. Pokud není jeho hladina řádně regulována, dochází k různým onemocněním, např. k těžké kombinované imunodeficienci. Pro zkoumání účinků zvýšené hladiny extracelulárního adenozinu byl na octomilce vytvořen genetický model s mutovaným genem pro ADGF-A (Adenosine Deaminase-related Growth Factor A), jenž má hlavní adenozin deaminázovou aktivitu. Tato práce navazuje na rozsáhlý screening dominantních supresorů adgf-a mutantního fenotypu a podrobněji zkoumá 3 oblasti, které podle tohoto screeningu dominantní supresory obsahují.Extracelulární adenozin je důležitou signální molekulou mnoha fyziologických procesů. Pokud není jeho hladina řádně regulována, dochází k různým onemocněním, např. k těžké kombinované imunodeficienci. Pro zkoumání účinků zvýšené hladiny extracelulárního adenozinu byl na octomilce vytvořen genetický model s mutovaným genem pro ADGF-A (Adenosine Deaminase-related Growth Factor A), jenž má hlavní adenozin deaminázovou aktivitu. Tato práce navazuje na rozsáhlý screening dominantních supresorů adgf-a mutantního fenotypu a podrobněji zkoumá 3 oblasti, které podle tohoto screeningu dominantní supresory obsahují.
|
| |
| |