|
|
Modulation of human telomerase activity by nucleoside and nucleotide analogues
Hájek, Miroslav ; Votruba, Ivan (vedoucí práce) ; Fajkus, Jiří (oponent) ; Hejnar, Jiří (oponent)
CONCLUSIONS Considering human telomerase as a promising target of anti-cancer therapy, the thesis deals with the study of inhibitory potency of selected ANP diphosphates towards telomerase, and the capability of nucleoside-type DNA methylation inhibitors to inhibit hTERT expression, knowing that hTERT expression closely correlates with telomerase activity in vitro and in vivo. The results can be summarized as follows: All the purine ANP diphosphates except for (S)-PMPApp and 6-Me2PMEDAPpp show dose- dependent inhibition of human telomerase in cell-free assay, the adenine derivatives are less effective inhibitors than the guanine derivatives. The only two pyrimidine ANP diphosphates tested (PMECpp and PMETpp) do not show any significant inhibitory potency towards telomerase. Activity of tested ANPs on telomerase is limited to their diphosphates (ANPpp) only. (R)-enantiomers are more inhibitory compared to (S)-enantiomers. This indicates that absolute configuration plays an important role in the telomerase inhibition and that the enzyme distinguishes between the (R)- and (S)-enantiomers. PMEGpp is the most potent human telomerase inhibitor among all ANPs studied with the IC50 value of 12.7 ± 0.5 mol.l-1 at 125 M dNTPs. Its inhibitory potency towards telomerase is comparable to that of ddGTP (IC50...
|
|
| |
|
|
Modulation of human telomerase activity by nucleoside and nucleotide analogues
Hájek, Miroslav ; Votruba, Ivan (vedoucí práce) ; Fajkus, Jiří (oponent) ; Hejnar, Jiří (oponent)
CONCLUSIONS Considering human telomerase as a promising target of anti-cancer therapy, the thesis deals with the study of inhibitory potency of selected ANP diphosphates towards telomerase, and the capability of nucleoside-type DNA methylation inhibitors to inhibit hTERT expression, knowing that hTERT expression closely correlates with telomerase activity in vitro and in vivo. The results can be summarized as follows: All the purine ANP diphosphates except for (S)-PMPApp and 6-Me2PMEDAPpp show dose- dependent inhibition of human telomerase in cell-free assay, the adenine derivatives are less effective inhibitors than the guanine derivatives. The only two pyrimidine ANP diphosphates tested (PMECpp and PMETpp) do not show any significant inhibitory potency towards telomerase. Activity of tested ANPs on telomerase is limited to their diphosphates (ANPpp) only. (R)-enantiomers are more inhibitory compared to (S)-enantiomers. This indicates that absolute configuration plays an important role in the telomerase inhibition and that the enzyme distinguishes between the (R)- and (S)-enantiomers. PMEGpp is the most potent human telomerase inhibitor among all ANPs studied with the IC50 value of 12.7 ± 0.5 mol.l-1 at 125 M dNTPs. Its inhibitory potency towards telomerase is comparable to that of ddGTP (IC50...
|
|
|
Studium interakce antimikrobiálních peptidů s tkáňovými kulturami
Kroupová, Hilda ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Votruba, Ivan (oponent)
Česky Práce se zabývá studiem nových antimikrobiálních peptidů (AMP) Halictinů (HAL- 1, GMWSKILGHLIR-NH2 a HAL-2, GKWMSLLKHILK-NH2) a jejich strukturních analogů izolovaných z jedových váčků divokých včel Halictus sexcinctus. Struktura a antimikrobiální aktivita těchto peptidů byly popsány dřive [1]. Cílem práce bylo nalézt takový peptid, který by byl silně toxický pouze pro rakovinné buňky a netoxický vůči normálním buňkám a pomocí fluorescenčně značených peptidů získat informace o mechanismu účinku studovaných peptidů. Toxicita HAL-1 a HAL-2 a jejich analogů byla stanovována vůči 2 normálním buněčným liniím (lidské endotheliální buňky pupečníkové vény, HUVEC, a krysím střevním epiteliálním buňkám, IEC) a 2 nádorovým liniím (nádorové buňky děložního čípku, HeLa-S3a buňky karcinomu tlustého střeva, CRC SW 480) metodou MTT (stanovení hodnoty IC50). V prvé řadě jsme testovali peptidy s vysokou antimikrobiální aktivitou a nízkou hemolytickou aktivitou, pro kontrolu jsme stanovovali toxicitu i méně aktivních analogů. Zjistili jsme, že nejcitlivější vůči těmto peptidům jsou buňky HeLa S3. Nejtoxičtější peptidy (HAL-1/9, HAL-1/18, HAL-2/2) usmrcují 50% buněk v testu již v koncentracích 2,5 - 10 µM. Vůči ostatním liniím buněk je třeba k docílení stejného efektu 5-10 krát vyšší koncentrace peptidů. Peptidy...
|
|
| |
|
|
Efficient one-pot synthesis of polysubstituted 6-[(1H-1,2,3-triazol-1-yl)methyl]uracils through the "click" protocol
Jansa, Petr ; Špaček, Petr ; Holý, Antonín ; Votruba, Ivan ; Janeba, Zlatko
Synthesis of triazoloacyclic nucleosides and nucleoside phosphonates was developed as the one-pot Cu(I)-catalyzed azide alkyne Huisgen "click" cycloaddition. A novel Cu(I)-catalyzed decarboxylation reaction of 1-substituted 1H-1,2,3-triazole-4-carboxylates at room temperature was observed and used for the preparation of 1-substituted 1H-1,2,3-triazoles.
|
|
|
Nukleosidy a nukleotidy obsahující 8-aza-7,9-dideazaxanthin
Mařák, David ; Otmar, Miroslav ; Dračínský, Martin ; Votruba, Ivan ; Holý, Antonín
8-Aza-7,9-dideazaxanthin byl připraven pomocí TosMIC a 1,3-dibenzyluracilu. Postup byl vylepšen užitím AlCl3 pro finální debenzylaci. 8-Alkyl-8-aza-7,9-dideazaxanthiny byly připraveny reakcí 6-dibromomethyl-5-formyluracilu s benzyl-, 4 methoxybenzyl-, a 1 adamantylaminem. Bylo zjištěno že N1- a N8-(8-fosfonooktyl)-8-aza-7,9-dideazaxanthin jsou učinnými inhibitory thymidin fosforylasy (V79 buňky, lidská placenta, Escherichia coli). Hodnoty IC50 3–27 .mu.M.
|
|
| |
|
| |
|
| |
host ::
RSS.