|
|
Příprava luciferázových konstruktů pro promotor genu DHRS3
Voborová, Lucie ; Malátková, Petra (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Řešitel: Lucie Voborová Školitel: PharmDr. Petra Malátková, Ph.D. Název diplomové práce: Příprava luciferázových konstruktů pro promotor genu DHRS3 Membránově vázané reduktázy, mezi které patří i DHRS3, představují málo prozkoumanou oblast. Předpokládá se, že DHRS3 má svou roli v metabolismu retinoidů, kde se podílí na udržování rovnováhy signalizace all-trans-retinové kyseliny (ATRA) a tímto reguluje tvorbu osy těla. Genová regulace DHRS3 prostřednictvím retinoidů ale doposud nebyla popsána. Proto jsme se rozhodli genovou regulaci DHRS3 zkoumat. Její objasnění může napovědět více o funkci DHRS3. Pro provedení promotorové analýzy bylo potřebné připravit luciferázové konstrukty obsahující různě dlouhou oblast promotoru DHRS3. V přípravě byly použity kroky amplifikace, restrikce, ligace, transformace, "colony PCR", kontrolní a zpětná restrikce a sekvenace. Jednotlivé kroky byly optimalizovány pro konkrétní konstrukty tak, aby došlo k jejich správnému sestavení. Díky vhodně zvoleným postupům a jejich optimalizacím se podařilo připravit konstrukty v dostatečném množství a kvalitě. Mohou tak být použity při luciferázové analýze jako součást promotorové analýzy. Klíčová slova: Klonování, dehydrogenáza/reduktáza,...
|
|
|
Příprava luciferázových konstruktů pro promotor genu DHRS3
Voborová, Lucie ; Malátková, Petra (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Řešitel: Lucie Voborová Školitel: PharmDr. Petra Malátková, Ph.D. Název diplomové práce: Příprava luciferázových konstruktů pro promotor genu DHRS3 Membránově vázané reduktázy, mezi které patří i DHRS3, představují málo prozkoumanou oblast. Předpokládá se, že DHRS3 má svou roli v metabolismu retinoidů, kde se podílí na udržování rovnováhy signalizace all-trans-retinové kyseliny (ATRA) a tímto reguluje tvorbu osy těla. Genová regulace DHRS3 prostřednictvím retinoidů ale doposud nebyla popsána. Proto jsme se rozhodli genovou regulaci DHRS3 zkoumat. Její objasnění může napovědět více o funkci DHRS3. Pro provedení promotorové analýzy bylo potřebné připravit luciferázové konstrukty obsahující různě dlouhou oblast promotoru DHRS3. V přípravě byly použity kroky amplifikace, restrikce, ligace, transformace, "colony PCR", kontrolní a zpětná restrikce a sekvenace. Jednotlivé kroky byly optimalizovány pro konkrétní konstrukty tak, aby došlo k jejich správnému sestavení. Díky vhodně zvoleným postupům a jejich optimalizacím se podařilo připravit konstrukty v dostatečném množství a kvalitě. Mohou tak být použity při luciferázové analýze jako součást promotorové analýzy. Klíčová slova: Klonování, dehydrogenáza/reduktáza,...
|
host ::
RSS.