|
Vývoj HPLC metody stanovení vitamínu D v biologickém materiálu
Vlčková, Alena ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
V diplomové práci byla vyvinuta nová HPLC metoda pro stanovení vitamínů D (vitamín D2, D3) a jeho metabolitů (1,25(OH)2D3, 25(OH)D3) v jednom vzorku s využitím vnitřního standardu. Při navrhovaném stanovení byla použita monolitní kolona Chromolith Performance RP- 18e, 100 x 4,6 mm. Detekce byla prováděna pomocí diode array detektoru při vlnové délce 265 nm pro vitamíny D a jeho metabolity, 295 nm pro vnitřní standard tokol. Jako mobilní fáze byla použita směs methanol : acetonitril : voda v procentuelním zastoupení 12,5 : 85 : 2,5. Průtok mobilní fáze byl 1,5 ml/min a nástřik vzorku na kolonu 20 μl. Celková doba analýzy byla 3,5 minuty včetně ekvilibrace kolony. Metoda byla vypracována a částečně optimalizována se standardy vitamínu D a bude dále validována pro biologický materiál.
|
|
Vývoj HPLC metody stanovení vitamínu D v biologickém materiálu
Vlčková, Alena ; Solich, Petr (vedoucí práce) ; Matysová, Ludmila (oponent)
V diplomové práci byla vyvinuta nová HPLC metoda pro stanovení vitamínů D (vitamín D2, D3) a jeho metabolitů (1,25(OH)2D3, 25(OH)D3) v jednom vzorku s využitím vnitřního standardu. Při navrhovaném stanovení byla použita monolitní kolona Chromolith Performance RP- 18e, 100 x 4,6 mm. Detekce byla prováděna pomocí diode array detektoru při vlnové délce 265 nm pro vitamíny D a jeho metabolity, 295 nm pro vnitřní standard tokol. Jako mobilní fáze byla použita směs methanol : acetonitril : voda v procentuelním zastoupení 12,5 : 85 : 2,5. Průtok mobilní fáze byl 1,5 ml/min a nástřik vzorku na kolonu 20 μl. Celková doba analýzy byla 3,5 minuty včetně ekvilibrace kolony. Metoda byla vypracována a částečně optimalizována se standardy vitamínu D a bude dále validována pro biologický materiál.
|
| |