|
|
A new method for double bond characterization in lipids by ultraviolet photodissociation mass spectrometry
Rumlová, Barbora ; Strmeň, T. ; Cvačka, Josef
Lipids are structurally diverse biomolecules with vital functions in biological systems. Some of these functions are closely associated with the specific location of the carbon-carbon double bond in the lipid acyl chains. The chain length and the number of unsaturated carbon-carbon bonds can be determined using conventional MS/MS-based structural elucidation methods employing low or higher energy collision-induced dissociation. However, these dissociation techniques do not provide more subtle structural details, for example, the position of unsaturated bonds. Another type of activation method – ultraviolet photodissociation can be used for this purpose. In this study, a new method for characterization of double bond location in lipids acyl chain was developed using 193 nm ultraviolet photodissociation implemented on Orbitrap Fusion Lumos mass spectrometer. This approach is based on the derivatization of the double bond with bis-(5-iodo-[2]pyridyl)-disulfide, subsequent specific cleavages provide a unique diagnostic pair bearing information about the double bond position.
|
|
|
Vývoj miniaturizovaného iontového zdroje pro chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (HPLC/MS)
Rumlová, Barbora ; Cvačka, Josef (vedoucí práce) ; Jelínek, Ivan (oponent)
Tato práce se zabývá miniaturizovaným iontovým zdrojem pro chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (APCI), jehož klíčovou součástí je skleněný vyhřívaný mikrofluidní čip. Iontový zdroj byl sestaven z mikrofluidního čipu umístěného na mikromanipulátoru a jehlové elektrody pro koronový výboj. Geometrické uspořádání těchto prvků vůči vstupní vyhřívané kapiláře hmotnostního spektrometru LCQ Fleet (Thermo) bylo optimalizováno na základě velikosti signálu reserpinu. Roztok reserpinu o koncentraci 10 µg/ml byl kontinuálně přiváděn do vyhřívaného čipu pomocí stříkačkového čerpadla. Dále byl optimalizován průtok nebulizačního plynu. Při stejném hmotnostním toku reserpinu byla velikost signálu protonované molekuly reserpinu o dva řády vyšší než u komerčního iontového zdroje pro APCI (Thermo). Přetrvávajícím problémem testovaného miniaturizovaného zdroje je vysoká nestabilita signálu detekovaných iontů. Klíčová slova: hmotností spektrometrie, mikro APCI, mikrofluidní čip,
|
|
|
Temperature-programed micro-HPLC analysis of fatty acid methyl esters with APCI-MS detection
Vrkoslav, Vladimír ; Rumlová, Barbora ; Cvačka, Josef
HPLC/APCI-MS analysis at microliters-per-minute flow rates was optimized for separation of fatty acid methyl esters (FAMEs). HPLC C18 column with an internal diameter of 0.3 mm and isocratic elution using 99.9 % acetonitrile and 0.1% formic acid were employed. Standard APCI ion source was suitable for detection of FAMEs at 10 μl/min flow rate with the detection limit of micrograms-per-milliliter. APCI-MS spectra with predominant [M + H]+ molecular adducts were observed. The main advantage of micro-flow measurements is the possibility of using a temperature gradient, which significantly reduces retention times of FAMEs with longer aliphatic chain. The significant reduction of solvent consumption is also an important economic and environmental advantage. The positions of double bonds in FAME chains were established using acetonitrile-related adducts and tandem mass spectrometry. The optimized method was applied for analysis of FAMEs in triacylglycerol fraction of black currant seeds oil.
|
|
|
Kapalinová chromatografie s hmotnostně-spektrometrickou detekcí na bázi mikrofluidního čipu
Rumlová, Barbora ; Cvačka, Josef (vedoucí práce) ; Jelínek, Ivan (oponent)
Tato diplomová práce se zabývá spojením kapalinové chromatografie s hmotnostně- spektrometrickou detekcí na bázi mikrofluidního čipu. Nejprve byl sestaven miniaturizovaný iontový zdroj pro chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (APCI) a fotoionizaci za atmosférického tlaku (APPI), jehož hlavní komponentou byl skleněný mikrofluidní čip. Byla optimalizována geometrie a pracovní podmínky zdrojů. Jelikož oba iontové zdroje pracují za stejných podmínek, byly testovány možné výhody kombinovaného zdroje APCI/APPI. Dále byly studovány vlastnosti zdrojů a následně byly porovnávány s konvenčními zdroji pracujícími za vysokých průtoků. Zdroj, který vykazoval nejlepší vlastnosti, tedy APCI, byl spojen s kapalinovou chromatografií za nízkého průtoku. Byla vyvinuta metoda pro separaci methylesterů mastných kyselin pomocí standardu Supelco 37 Component FAME Mix. K separaci bylo využito reverzní chromatografie na stacionární fázi C18 a mobilní fázi obsahující 0,1 % kyseliny mravenčí v acetonitrilu. Pro zrychlení doby analýzy byl použit teplotní gradient. Byl určen limit detekce a limit stanovitelnosti čipového mikro-APCI zdroje a byl porovnán s detekcí pomocí komerčního zdroje v režimu mikro-APCI. Vyvinutá metoda byla použita k separaci methylesterů mastných kyselin ve vzorcích jojobového oleje a oleje z...
|
|
|
Vývoj miniaturizovaného iontového zdroje pro chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (HPLC/MS)
Rumlová, Barbora ; Cvačka, Josef (vedoucí práce) ; Jelínek, Ivan (oponent)
Tato práce se zabývá miniaturizovaným iontovým zdrojem pro chemickou ionizaci za atmosférického tlaku (APCI), jehož klíčovou součástí je skleněný vyhřívaný mikrofluidní čip. Iontový zdroj byl sestaven z mikrofluidního čipu umístěného na mikromanipulátoru a jehlové elektrody pro koronový výboj. Geometrické uspořádání těchto prvků vůči vstupní vyhřívané kapiláře hmotnostního spektrometru LCQ Fleet (Thermo) bylo optimalizováno na základě velikosti signálu reserpinu. Roztok reserpinu o koncentraci 10 µg/ml byl kontinuálně přiváděn do vyhřívaného čipu pomocí stříkačkového čerpadla. Dále byl optimalizován průtok nebulizačního plynu. Při stejném hmotnostním toku reserpinu byla velikost signálu protonované molekuly reserpinu o dva řády vyšší než u komerčního iontového zdroje pro APCI (Thermo). Přetrvávajícím problémem testovaného miniaturizovaného zdroje je vysoká nestabilita signálu detekovaných iontů. Klíčová slova: hmotností spektrometrie, mikro APCI, mikrofluidní čip,
|
host ::
RSS.