|
|
Měření membránového potenciálu pomocí iontově-selektivních elektrod citlivých na tetrafenylfosfóniový kation
Lábajová, Anna ; Kofránek, Jiří (vedoucí práce) ; Sigler, Karel (oponent) ; Plášek, Jaromír (oponent)
SOUHRN 102 SOUHRN Byla zkonstruována aparatura na měření membránového potenciálu, která využívá iontově-selektivní elektrody citlivé na tetrafenylfosfóniový kationt (TPP+ ). Aparatura byla připojena k počítači a sběr, zpracování a ukládání dat bylo uskutečněno programem MATLAB/Simulink. Složení TPP+ -selektivní membrány bylo optimalizováno zabudováním sraženiny TPP+ TPB- do membrány, čím se dosáhla Nernstovská dopověď od koncentrace 3.10-6 M TPP+ . Protože docházelo k vyplavování TPP+ z membrány do média, TPP+ TPB- bylo nahrazeno tetrakis[3,5-bis(1,1,1,3,3,3- hexafluoro-2-methoxy-2-propyl)fenyl]boritanem sodným (NaHFPB). Elektrody s NaHFPB měly Nernstovskou odezvu od 1. 10-6 M TPP+ a tím byla dosažena větší citlivost oproti komerčně vyráběným elektrodám. Byly vypočteny koeficienty selektivity pro K+ , Na+ , Ca2+ a Mg2+ . Aparatura byla použita pro monitorování mitochondriálního membránového potenciálu izolovaných mitochondrií a pro sledování funkce dýchacího řetězce mitochondrií v buňkách s permeabilizovanou plasmatickou membránou (hepatocytů, BSC-40, HeLa G, cybridů) pomocí nízké koncentrace digitoninu. Tato metoda byla použita i pro sledování funkce "mitochondrial permeability transition pore" (MPTP) jak u izolovaných mitochondrií, tak u permeabilzovaných hepatocytů. Otevření MPTP bylo indukováno vysokou...
|
host ::
RSS.