|
|
Charakterizace enzymů redukujících karbonylové sloučeniny u vlasovky slezové
Kunzová, Lucie ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Lucie Kunzová Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: Mgr. Nikola Rychlá Název diplomové práce: Charakterizace enzymů redukujících karbonylové sloučeniny u vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus), jeden z nejpatogennějších parazitů malých přežvýkavců jako jsou kozy a ovce, si vyvinul rezistenci vůči všem používaným anthelmintikům. Předpokládá se, že k rozvoji lékové rezistence přispívají i detoxikační enzymy, které představují hlavní obranný systém proti škodlivým xenobiotikům a u tohoto druhu nejsou plně prozkoumány. Tato práce je proto zaměřená na studium enzymů vlasovky slezové, konkrétně na reduktasy karbonylových sloučenin pomocí specifických substrátů a inhibitorů. Byly připraveny subcelulární frakce (cytosol a mikrosomy) z dospělců vlasovky slezové pro následné in vitro experimenty. V jednotlivých frakcích byla stanovena koncentrace proteinů a aktivita reduktas vůči různým substrátům. Substráty byly zvoleny na základě znalosti o lidských biotransformačních enzymech. Nejvyšší aktivita v cytosolu byla zjištěna pro substráty glyceraldehyd (8,22 ± 0,82 [nmol/min/mg]) a menadion (4,63 ± 0,46 [nmol/min/mg]), v mikrosomální frakci pro menadion (4,38 ± 0,36 [nmol/min/mg])...
|
|
|
Charakterizace enzymů redukujících karbonylové sloučeniny u vlasovky slezové
Kunzová, Lucie ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Novotná, Eva (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Lucie Kunzová Školitel: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Konzultant: Mgr. Nikola Rychlá Název diplomové práce: Charakterizace enzymů redukujících karbonylové sloučeniny u vlasovky slezové Vlasovka slezová (Haemonchus contortus), jeden z nejpatogennějších parazitů malých přežvýkavců jako jsou kozy a ovce, si vyvinul rezistenci vůči všem používaným anthelmintikům. Předpokládá se, že k rozvoji lékové rezistence přispívají i detoxikační enzymy, které představují hlavní obranný systém proti škodlivým xenobiotikům a u tohoto druhu nejsou plně prozkoumány. Tato práce je proto zaměřená na studium enzymů vlasovky slezové, konkrétně na reduktasy karbonylových sloučenin pomocí specifických substrátů a inhibitorů. Byly připraveny subcelulární frakce (cytosol a mikrosomy) z dospělců vlasovky slezové pro následné in vitro experimenty. V jednotlivých frakcích byla stanovena koncentrace proteinů a aktivita reduktas vůči různým substrátům. Substráty byly zvoleny na základě znalosti o lidských biotransformačních enzymech. Nejvyšší aktivita v cytosolu byla zjištěna pro substráty glyceraldehyd (8,22 ± 0,82 [nmol/min/mg]) a menadion (4,63 ± 0,46 [nmol/min/mg]), v mikrosomální frakci pro menadion (4,38 ± 0,36 [nmol/min/mg])...
|
|
|
Možnosti ovlivnění produkce sekundárních metabolitů u kultury Silybum marianum in vitro
Kunzová, Lucie ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce) ; Martin, Jan (oponent)
Mgr. Lucie Kunzová Možnosti ovlivnění produkce sekundárních metabolitů u kultury Silybum marianum in vitro Elicitace je metoda využívající obranných mechanizmů rostlin ke zvýšení produkce sekundárních metabolitů v rostlinách i kulturách in vitro. V této práci byl sledován vliv 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hod působení tří koncentrací abiotického elicitoru (3-jod-4-methylfenyl)amidu 5-methylpyrazin-2-karboxylové kyseliny na produkci flavonolignanů kalusovou a suspenzní kulturou Silybum marianum. Kultura byla kultivována na médiu podle Murashigeho a Skooga s přídavkem 10 mg/l kyseliny α-naftyloctové (α-NAA). Pro stanovení obsahu flavonolignanů v kalusové i suspenzní kultuře byla zvolena metoda HPLC. Maximální obsah flavonolignanů (0,03 %) v kalusové kultuře byl prokázán po 24 hod působení elicitoru o koncentraci c1 = 2,83 · 10-3 mol/l. Maximální obsah flavonolignanů (0,04 %) v suspenzní kultuře byl zjištěn po 48 hodinovém působení elicitoru o koncentraci c3 = 2,83 · 10-5 mol/l.
|
|
|
Kultury léčivých rostlin in vitro - IV
Kunzová, Lucie ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce) ; Kašparová, Marie (oponent)
Lucie Kunzová Kultury léčivých rostlin in vitro - IV. Elicitace je jednou z metod, která může ovlivnit produkci nebo hromadění sekundárních metabolitů v rostlinných kulturách. V této práci byl sledován vliv 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hod působení tří koncentrací abiotického elicitoru methylviologenu (paraquat) na produkci rutinu kalusovou a suspenzní kulturou Fagopyrum esculentum Moench. Kultura byla kultivována na médiu podle Murashigeho a Skooga s přídavkem 10 mg/l kyseliny dichlorfenoxyoctové (2,4-D). Pro stanovení obsahu rutinu v kalusové i suspenzní kultuře byla zvolena metoda HPLC. Maximální obsah rutinu v kalusové kultuře (0,25 %) byl prokázán po 72 hod elicitaci methylviologenem o koncentraci c1 = 2,1929 · 10-3 mol/l. Maximální obsah rutinu (0,02 %) v suspenzní kultuře byl prokázán po 24 hod elicitaci methylviologenem o koncentraci c3 = 2,1929 · 10-5 mol/l.
|
|
|
Možnosti ovlivnění produkce sekundárních metabolitů u kultury Silybum marianum in vitro
Kunzová, Lucie ; Martin, Jan (oponent) ; Tůmová, Lenka (vedoucí práce)
Mgr. Lucie Kunzová Možnosti ovlivnění produkce sekundárních metabolitů u kultury Silybum marianum in vitro Elicitace je metoda využívající obranných mechanizmů rostlin ke zvýšení produkce sekundárních metabolitů v rostlinách i kulturách in vitro. V této práci byl sledován vliv 6, 12, 24, 48, 72 a 168 hod působení tří koncentrací abiotického elicitoru (3-jod-4-methylfenyl)amidu 5-methylpyrazin-2-karboxylové kyseliny na produkci flavonolignanů kalusovou a suspenzní kulturou Silybum marianum. Kultura byla kultivována na médiu podle Murashigeho a Skooga s přídavkem 10 mg/l kyseliny α-naftyloctové (α-NAA). Pro stanovení obsahu flavonolignanů v kalusové i suspenzní kultuře byla zvolena metoda HPLC. Maximální obsah flavonolignanů (0,03 %) v kalusové kultuře byl prokázán po 24 hod působení elicitoru o koncentraci c1 = 2,83 · 10-3 mol/l. Maximální obsah flavonolignanů (0,04 %) v suspenzní kultuře byl zjištěn po 48 hodinovém působení elicitoru o koncentraci c3 = 2,83 · 10-5 mol/l.
|
host ::
RSS.