|
|
Antiproliferační účinky nových analogů resveratrolu na nádorové buněčné linie MCF-7 a HL-60
Moravová, Kristína ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Šimůnek, Tomáš (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Kristína Moravová Školiteľ: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Konzultant: Mgr. Veronika Keresteš Názov diplomovej práce: Antiproliferačné účinky nových analógov resveratrolu na nádorové bunkové línie MCF-7 a HL-60 Nádorové ochorenia predstavujú druhú najčastejšiu príčinu úmrtí na svete. S ohľadom na rôzne možnosti liečebných postupov nádorových ochorení patrí medzi základný typ liečby používanie chemoterapeutík. Najviac používané chemoterapeutiká sú antracyklíny. Antracyklíny (napr. doxorubicín, daunorubicín a epirubicín) sú klasifikované ako inhibítory topoizomerázy II. Antracyklíny predstavujú skupinu chemoterapeutík, ktorá disponuje relatívne veľkým množstvom nežiaducich účinkov. Jedným z najzávažnejších je kardiotoxicita, ktorá môže byť zmiernené použitím vhodného kardioprotektívneho liečiva. Aktuálne jediné registrované kardioprotektívum je dexrazoxan. Relatívne nedávno bolo zistené, že podstata kardioprotektívneho účinku dexrazoxanu je inhibícia topoizomerázy II. Táto práca je súčasťou širšieho výskumu zameraného na hľadanie látok potencionálne kardioprotektívnych inhibítorov topoizomerázy II. Konkrétne v tejto práci som sa zamerala na hodnotenie antiproliferačného potenciálu novo navrhnutých analógov...
|
|
| |
|
|
Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů
Martínková, Nikola ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Studentka: Nikola Martínková Vedoucí práce: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Konzultant: Mgr. Petr Jošt, Ph.D. Název diplomové práce: Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů Keratinocyty jsou součástí epidermis a představují majoritní část buněk svrchní vrstvy lidské kůže. Při poškození těchto buněk mutagenními látkami mohou nastat změny ve složení genetického materiálu, popřípadě může dojít i k zániku buňky. Mezi látky, které navozují změny v DNA a mají mutagenní potenciál lze zařadit i zpuchýřující bojovou chemickou látku sirný yperit. Cílem této práce bylo porovnat buněčnou linii keratinocytů HaCaT s experimentálně odvozenou buněčnou linií 3HSM4 v odpovědi na oxidační stres indukovaný peroxidem vodíku. Buňky 3HSM4 byly připraveny selekcí rezistentních klonů buněk HaCaT, které byly opakovaně vystaveny cytotoxickým účinkům sirného yperitu. Výsledky porovnání ukazují, že buňky 3HSM4 jsou rezistentnější vůči peroxidu vodíku. Pokud byla u obou typů buněk blokována syntéza glutathionu (GSH), byl cytotoxický účinek peroxidu vodíku stejný. Přesto, že se buňky 3HSM4 ukázaly jako odolnější z pohledu cytotoxicity, byla u nich zjištěna mnohem vyšší hladina volných radikálů než u buněk HaCaT. Při analýze...
|
|
|
New inhibitors of topoisomerase II - study of antiproliferative effects and influence on antitumor activity of anthracyclines
Vrobelová, Adriana ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Jirkovská, Anna (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Adriana Vrobelová Školiteľ: prof. PharmDr. Tomáš Šimůnek, PhD. Názov diplomovej práce: Nové inhibítory topoizomerázy II - štúdia antiproliferačných účinkov a vplyvu na protinádorovú aktivitu antracyklínov Napriek svojej dávkovo obmedzujúcej kardiotoxicite patria antracyklíny (ANT) medzi najpoužívanejšie a najefektívnejšie protinádorové liečivá. Jediným registrovaným liečivom k prevencii vzniku ANT kardiotoxicity je dexrazoxán, ktorého kardioprotektívne účinky sa aktuálne pripisujú interakcii s topoizomerázou 2 (TOP2) beta. Táto relatívne nová hypotéza poskytuje priestor pre objav a štúdium nových inhibítorov TOP2, ktoré by mohli byť použité ako výhodnejšie kardioprotektívne liečivá. Zásadnou podmienkou pre použitie potenciálneho kardioprotektíva je však absencia negatívneho ovplyvnenia protinádorovej účinnosti ANT. V tejto práci sme študovali antipoliferačnú aktivitu nových látok odvodených od parentnej molekuly BNS-22, ktorá je katalytickým inhibítorom TOP2 a prejavila kardioprotekčnú aktivitu. Okrem toho sme študovali aj ich vplyv na antiproliferačný účinok daunorubicínu (DAU) pre objasnenie kompatibility v prípade kombinovaného použitia s ANT. Dané experimenty boli uskutočnené na leukocytárnej bunkovej...
|
|
|
Vliv resveratrolu a kyseliny gambogové na poškození DNA neonatálních potkaních kardiomyocytů vyvolané daunorubicinem.
Mašín, Martin ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Martin Mašín Školitel: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv resveratrolu a kyseliny gambogové na poškození DNA neonatálních potkaních kardiomyocytů vyvolané daunorubicinem. DNA topoizomerasy jsou skupinou enzymů, které jsou schopny měnit topologii DNA pomocí přechodných jednořetězcových nebo dvouřetězcových zlomů (DSB) během fundamentálních procesů jako je replikace a transkripce. Inhibice topoizomerasy II (TOP II) je hlavním mechanismem účinku některých protinádorových léčiv, včetně antracyklinových antibiotik (ANT; např. daunorubicin). Jejich působením dochází k tvorbě DSB a později k apoptóze. Některé další inhibitory TOP II, které působí jiným mechanismem, mohou ovlivňovat vznik DSB nebo jiného poškození DNA, a tak modulovat také účinek ANT. V této diplomové práci jsme studovali poškození DNA v neonatálních potkaních kardiomyocytech vyvolané daunorubicinem (DAU) a jeho hlavním metabolitem daunorubicinolem (DAUnol) a vliv dvou přírodních látek a inhibitorů TOP II, resveratrolu (RES) a kyseliny gambogové (GA), na poškození DNA vyvolané DAU dvěma odlišnými metodami. Stanovovali jsme míru fosforylace histonu H2AX (γ-H2AX) pomocí imunoblotu a porovnali s výsledky získanými pomocí...
|
|
|
New inhibitors of topoisomerase II - study of antiproliferative effects and influence on antitumor activity of anthracyclines
Vrobelová, Adriana ; Šimůnek, Tomáš (vedoucí práce) ; Jirkovská, Anna (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Adriana Vrobelová Školiteľ: prof. PharmDr. Tomáš Šimůnek, PhD. Názov diplomovej práce: Nové inhibítory topoizomerázy II - štúdia antiproliferačných účinkov a vplyvu na protinádorovú aktivitu antracyklínov Napriek svojej dávkovo obmedzujúcej kardiotoxicite patria antracyklíny (ANT) medzi najpoužívanejšie a najefektívnejšie protinádorové liečivá. Jediným registrovaným liečivom k prevencii vzniku ANT kardiotoxicity je dexrazoxán, ktorého kardioprotektívne účinky sa aktuálne pripisujú interakcii s topoizomerázou 2 (TOP2) beta. Táto relatívne nová hypotéza poskytuje priestor pre objav a štúdium nových inhibítorov TOP2, ktoré by mohli byť použité ako výhodnejšie kardioprotektívne liečivá. Zásadnou podmienkou pre použitie potenciálneho kardioprotektíva je však absencia negatívneho ovplyvnenia protinádorovej účinnosti ANT. V tejto práci sme študovali antipoliferačnú aktivitu nových látok odvodených od parentnej molekuly BNS-22, ktorá je katalytickým inhibítorom TOP2 a prejavila kardioprotekčnú aktivitu. Okrem toho sme študovali aj ich vplyv na antiproliferačný účinok daunorubicínu (DAU) pre objasnenie kompatibility v prípade kombinovaného použitia s ANT. Dané experimenty boli uskutočnené na leukocytárnej bunkovej...
|
|
|
Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů
Martínková, Nikola ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Hradiská Breiterová, Kateřina (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Studentka: Nikola Martínková Vedoucí práce: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Konzultant: Mgr. Petr Jošt, Ph.D. Název diplomové práce: Indukce oxidačního stresu u buněk kožních keratinocytů Keratinocyty jsou součástí epidermis a představují majoritní část buněk svrchní vrstvy lidské kůže. Při poškození těchto buněk mutagenními látkami mohou nastat změny ve složení genetického materiálu, popřípadě může dojít i k zániku buňky. Mezi látky, které navozují změny v DNA a mají mutagenní potenciál lze zařadit i zpuchýřující bojovou chemickou látku sirný yperit. Cílem této práce bylo porovnat buněčnou linii keratinocytů HaCaT s experimentálně odvozenou buněčnou linií 3HSM4 v odpovědi na oxidační stres indukovaný peroxidem vodíku. Buňky 3HSM4 byly připraveny selekcí rezistentních klonů buněk HaCaT, které byly opakovaně vystaveny cytotoxickým účinkům sirného yperitu. Výsledky porovnání ukazují, že buňky 3HSM4 jsou rezistentnější vůči peroxidu vodíku. Pokud byla u obou typů buněk blokována syntéza glutathionu (GSH), byl cytotoxický účinek peroxidu vodíku stejný. Přesto, že se buňky 3HSM4 ukázaly jako odolnější z pohledu cytotoxicity, byla u nich zjištěna mnohem vyšší hladina volných radikálů než u buněk HaCaT. Při analýze...
|
|
|
Vliv resveratrolu a kyseliny gambogové na poškození DNA neonatálních potkaních kardiomyocytů vyvolané daunorubicinem.
Mašín, Martin ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Pávek, Petr (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Martin Mašín Školitel: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv resveratrolu a kyseliny gambogové na poškození DNA neonatálních potkaních kardiomyocytů vyvolané daunorubicinem. DNA topoizomerasy jsou skupinou enzymů, které jsou schopny měnit topologii DNA pomocí přechodných jednořetězcových nebo dvouřetězcových zlomů (DSB) během fundamentálních procesů jako je replikace a transkripce. Inhibice topoizomerasy II (TOP II) je hlavním mechanismem účinku některých protinádorových léčiv, včetně antracyklinových antibiotik (ANT; např. daunorubicin). Jejich působením dochází k tvorbě DSB a později k apoptóze. Některé další inhibitory TOP II, které působí jiným mechanismem, mohou ovlivňovat vznik DSB nebo jiného poškození DNA, a tak modulovat také účinek ANT. V této diplomové práci jsme studovali poškození DNA v neonatálních potkaních kardiomyocytech vyvolané daunorubicinem (DAU) a jeho hlavním metabolitem daunorubicinolem (DAUnol) a vliv dvou přírodních látek a inhibitorů TOP II, resveratrolu (RES) a kyseliny gambogové (GA), na poškození DNA vyvolané DAU dvěma odlišnými metodami. Stanovovali jsme míru fosforylace histonu H2AX (γ-H2AX) pomocí imunoblotu a porovnali s výsledky získanými pomocí...
|
|
|
Vliv topoisomerasy II beta na citlivost nádorových buněk k protinádorové terapii
Jaščevská, Nikola ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Nikola Jaščevská Školitel: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv topoisomerasy II beta na citlivost nádorových buněk k protinádorové terapii Topoisomerasa II (TOP II) je buněčný enzym zodpovědný za řešení topologických problémů dvouřetězcové DNA. Izoformy TOP II alfa a beta jsou produkty různých genů s téměř stejnou katalytickou funkcí. Exprese TOP IIα je vázána na G2/M fázi buněčného cyklu, zatímco TOP II je exprimována kontinuálně. Je proto na rozdíl od TOP IIα přítomna i v neproliferujících diferencovaných buňkách. Antracyklinová antibiotika jsou starou skupinou protinádorových léčiv, která patří mezi TOP II jedy. Ačkoli je jejich klinické použití časté, incidence vedlejších účinků (zejména myelotoxicity a kardiotoxicity) jejich použití omezuje. Stále častěji je diskutována role inhibice TOP II, která je taktéž přítomna v kardiomyocytech. Dexrazoxan, jediné klinicky používané kardioprotektivum, způsobuje depleci TOP II v kardiomyocytech, což by mohlo vysvětlovat jeho účinnost. Ačkoli se již dříve ukázalo, že TOP II je pro buněčnou proliferaci postradatelná, není dosud znám efekt deplece TOP II na citlivost nádorových buněk k protinádorovým léčivům ze skupiny inhibitorů TOP II....
|
|
|
Effect of selected antineoplastic drugs on the gene expression of DNA repair proteins
Klčová, Silvia ; Jirkovská, Anna (vedoucí práce) ; Suchá, Simona (oponent)
Univerzita Karlova v Prahe, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických vied Kandidát: Bc. Silvia Klčová Školiteľ: PharmDr. Anna Jirkovská, Ph.D. Názov práce: Vplyv vybraných protinádorových liečiv na génovú expresiu proteínov účastniacich sa bunkovej odpovede na poškodenie DNA Každá jedna bunka ľudského organizmu je nepretržite vystavovaná širokému spektru stresových faktorov, konzekvenciou ktorých vznikajú poškodenia v molekule DNA. Vzniknuté zmeny predstavujú škálu alterácií - od jednoduchých alkylačných modifikácií báz až po najnepriaznivejšie dvojvláknové zlomy. Vplyv bunkového stresu a následné genotoxické poškodenie DNA je však dvojsečná zbraň. Na jednej strane môžu byť typické alterácie v genóme vyvolané vplyvom mutagénnych agens (ako napríklad zložky tabakového dymu či ionizujúce žiarenie), pričom akumuláciou dôsledkov ich pôsobenia nastane strata kontroly nad jednotlivými krokmi bunkového cyklu, čo vyústi v nádorovú transformáciu bunky. Avšak na strane druhej, navodenie detrimentálneho účinku zasahujúceho do genómu nádorových buniek je jedným zo základných prístupov cytostatickej liečby malignít. V našej práci sme sa preto zamerali na štúdium niekoľkých antineoplastických liečiv široko využívaných v klinickej praxi (etopozid, daunorubicín), či podstupujúcich klinické...
|
host ::
RSS.