|
|
Separace chirálních pesticidů pomocí cyklodextrinů kapilární elektroforézou
Denková, Barbora ; Jáč, Pavel (vedoucí práce) ; Polášek, Miroslav (oponent)
V této diplomové práci je představena předběžná studie využití EKC-PF (s cyklodextrinem, jako chirálním selektorem) pro separaci chirálních pesticidů. Úvodem jsou prezentovány teoretické informace týkající se přístrojového vybavení, teorie elektroforézy jakož i různých elektroforetických technik. Dále je zmíněna problematika chirálních separací pomocí CE, využití cyklodextrinů jako chirálních selektorů v CE a možnosti techniky částečného plnění kapiláry. Nakonec jsou definovány chirální pesticidy a uvedeny informace o separaci jejich enantiomerů. Experimentální část se zabývá hodnocením separace enantiomerů některých pesticidů (trichlorphon, cyprokonazol, hexakonazol, imazalil, myklobutanil, penkonazol, tebukonazol, propikonazol, a benalaxyl) pomocí CM-β-CD, jako chirálního selektoru. Nejprve byla provedena univariantní optimalizace separačních podmínek (doba nástřiku CM- β-CD, napětí, teplota, pH, povaha a koncentrace elektrolytu) u benalaxylu. Dále byl realizován screening efektu nástřikového času CM-β-CD na rozlišení a migrační časy u ostatních pesticidů se záměrem zjistit potenciál tohoto CD jako chirálního selektoru pro enantioselektivní separaci tohoto typu analytů.
|
|
|
Úprava vzorku pro stanovení alfa-tokoferolu v erytrocytární membráně vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií
Denková, Barbora ; Šatínský, Dalibor (oponent) ; Solich, Petr (vedoucí práce)
V této rigorózní práci byla vyvinuta nová metoda umožňující izolaci α-tokoferolu z membrán lidských erytrocytů pro následné stanovení tohoto vitaminu vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) s využitím ultracentrifugace a extrakce na tuhou fázi (SPE). Právě SPE je dnes jedna z nejúčinnějších a nejspolehlivějších moderních metod umožňujících vhodnou úpravu vzorku biologického materiálu před chromatografickou analýzou. Vyvinutý postup SPE je následující: 1) Promytí odebraných erytrocytů: 2,5 ml nesrážlivé krve centrifugujeme 10 min při 1300×g, 4˚C a horní vrstvu plasmy oddělíme. K erytrocytům přidáme roztok 0,01% BHT ve fyziologickém roztoku do objemu 2,5 ml a centrifugaci zopakujeme. Odstraníme supernatant a celý postup opakujeme třikrát. Promyté erytrocyty skladujeme při teplotě -86˚C. 2) Vlastní extrakce α-tokoferolu z promytých erytrocytů: Do ultracentrifugační kyvety napipetujeme 500 μl 50 mmol/l roztoku D-mannitolu a 500 μl 5 mmol/l HEPESu. Poté odebereme 100 μl rozmražených promytých erytrocytů pomocí pístové pipety, pipetu zvenku pečlivě otřeme buničinou a erytrocyty vpravíme do kyvety. Následně přidáme 11 μl 1 mol/l roztoku CaCl2 a vzorek ultracentrifugujeme 3 minuty, při 90 000 rpm (288 000×g, rAV = 31,8 mm) a 4žC. Po vyjmutí vzorku z ultracentrifugy odpipetujeme 500 μl supernatantu...
|
|
|
Separace chirálních pesticidů pomocí cyklodextrinů kapilární elektroforézou
Denková, Barbora ; Polášek, Miroslav (oponent) ; Jáč, Pavel (vedoucí práce)
V této diplomové práci je představena předběžná studie využití EKC-PF (s cyklodextrinem, jako chirálním selektorem) pro separaci chirálních pesticidů. Úvodem jsou prezentovány teoretické informace týkající se přístrojového vybavení, teorie elektroforézy jakož i různých elektroforetických technik. Dále je zmíněna problematika chirálních separací pomocí CE, využití cyklodextrinů jako chirálních selektorů v CE a možnosti techniky částečného plnění kapiláry. Nakonec jsou definovány chirální pesticidy a uvedeny informace o separaci jejich enantiomerů. Experimentální část se zabývá hodnocením separace enantiomerů některých pesticidů (trichlorphon, cyprokonazol, hexakonazol, imazalil, myklobutanil, penkonazol, tebukonazol, propikonazol, a benalaxyl) pomocí CM-β-CD, jako chirálního selektoru. Nejprve byla provedena univariantní optimalizace separačních podmínek (doba nástřiku CM- β-CD, napětí, teplota, pH, povaha a koncentrace elektrolytu) u benalaxylu. Dále byl realizován screening efektu nástřikového času CM-β-CD na rozlišení a migrační časy u ostatních pesticidů se záměrem zjistit potenciál tohoto CD jako chirálního selektoru pro enantioselektivní separaci tohoto typu analytů.
|
host ::
RSS.