|
| |
|
|
Fyziologické a patologické vlastnosti NMDA receptorů astrocytů
Džamba, Dávid ; Anděrová, Miroslava (vedoucí práce) ; Vyklický, Ladislav (oponent) ; Paleček, Jiří (oponent)
Kortikální gliové buňky obsahují jak ionotropní, tak i metabotropní glutamátové receptory. Přes veškeré úsilí komplexní analýza celé rodiny glutamátových receptorů a jejich podjednotek přítomných v gliových buňkách stále chybí. V této práci poskytujeme celkový obraz genové exprese ionotropních (AMPA, kainát, NMDA) a hlavních metabotropních glutamátových receptorů u kortikálních gliových buněk izolovaných z GFAP/EGFP myší v průběhu stárnutí a před a po fokální cerebrální ischemii. Použitím jednobuněčné RT-qPCR metody jsme zjistili expresi genů kódujících podjednotky glutamátových receptorů u kortikálních GFAP/EGFP pozitivních (GFAP/EGFP+ ) gliových buněk. Většina z analyzovaných buněk exprimovala mRNA kódující podjednotky glutamátových receptorů a ve většině případů byla tato exprese po ischemickém poškození zvýšená. Analýza dat ukázala několik skupin GFAP/EGFP+ gliových buněk s ohledem na glutamátové receptory, a také na to, jakým způsobem jejich exprese koreluje s expresí gliových markerů před a po ischemii. Dále jsme zkoumali proteinovou expresi a funkční význam NMDA receptorů u gliových buněk. Imunohistochemická analýza všech sedmi podjednotek NMDA receptorů ukázala, že GluN3A podjednotka je přítomna v GFAP/EGFP+ gliových buňkách, a že se tato exprese po ischemii zvyšuje. Sledování změn...
|
|
| |
|
|
Měření membránového potenciálu u mutantních kmenů Saccharomyces cerevisiae deficientních v různých membránových transportérech
Džamba, Dávid ; Gášková, Dana (vedoucí práce) ; Krůšek, Jan (oponent)
Potassium transport across the cell membrane is supposed to contribute to the maintenance of membrane potential. In this work, the diS-C3(3) assay was used to determine the contribution of three main potassium transporters of S. cerevisiae cells (Trk1p, Trk2p and Tok1p) to the membrane potential changes in three different growth phases. It was shown that deletions of these transporters cause hyperpolarisation of the cell membrane in exponential and early diauxic growth phases; no difference was detected in post-diauxic cells. Another contribution of this work is in a deeper study of the activity of ABC pumps which are crucial in multidrug resistance. It was proved that apart from Pdr5p and Snq2p pumps, there are also other active extrusion pumps (most likely Pdr10p and Pdr15p). It was also showed that pdr1, pdr3 mutant strain is not an equivalent of strain lacking the multidrug pumps Pdr5p, Snq2p and Yor1p. The results in this work indicate that dis-C3(3) probe is probably a substrate of other pumps such as Pdr15p. Study of these transporters with our method is thus very suitable and could provide detailed information about their kinetics and help in finding their inhibitors.
|
host ::
RSS.