|
| |
|
|
Analýza mikroflóry v sýrech pomocí DGGE
Čakajdová, Martina ; Rittich, Bohuslav (oponent) ; Trachtová, Štěpánka (vedoucí práce)
Molekulárno-biologické metódy sú rýchlou a účinnou pomôckou pri identifikácii mikroorganizmov v reálnych vzorkách. Cieľom tejto diplomovej práce bola analýza mikroflóry v kontrolných a kontaminovaných nezrejúcich syroch. DNA izolovaná z analyzovaných vzoriek bola použitá pre optimalizáciu PCR s primérmi s GC svorkou pre rozdelenie amplikónov pomocou DGGE. Produkty DGGE boli po optimalizácii reamplifikované a pripravené pre sekvenáciu. DNA izolovaná z analyzovaných vzoriek bola použitá pre PCR v reálnom čase s analýzou kriviek topenia amplikónov s vysokým rozlíšením (HRMA). Pomocou DGGE a HRMA analýzy boli porovnané amplikóny syrov s bakteriálnymi kultúrami izolovanými kultivačne z týchto syrov. Porovnaním polohy amplikónov bolo zistené, že kontaminujúcimi mohli byť Bacillus licheniformis, Staphylococcus epidermidis a Acinetobacter baumanii/calcoaceticus. Analýzou sekvencií amplikónov syrov a nálevov bola zistená, prítomnosť Bacillus sp. a ďalších mikroorganizmov radených do piatich rodov. Z nich boli vykultivovaní zástupcovia troch rodov z Preto sa predpokladá kontaminácia Bacillus sp., alebo mikroorganizmy, ktoré neboli použitými metódami kultivovateľné. Metóda je vhodná pre analýzu komplexnej mikroflóry v syroch a nálevoch po ďalšej optimalizácii.
|
|
|
Analýza mikroflóry v sýrech pomocí DGGE
Čakajdová, Martina ; Rittich, Bohuslav (oponent) ; Trachtová, Štěpánka (vedoucí práce)
Molekulárno-biologické metódy sú rýchlou a účinnou pomôckou pri identifikácii mikroorganizmov v reálnych vzorkách. Cieľom tejto diplomovej práce bola analýza mikroflóry v kontrolných a kontaminovaných nezrejúcich syroch. DNA izolovaná z analyzovaných vzoriek bola použitá pre optimalizáciu PCR s primérmi s GC svorkou pre rozdelenie amplikónov pomocou DGGE. Produkty DGGE boli po optimalizácii reamplifikované a pripravené pre sekvenáciu. DNA izolovaná z analyzovaných vzoriek bola použitá pre PCR v reálnom čase s analýzou kriviek topenia amplikónov s vysokým rozlíšením (HRMA). Pomocou DGGE a HRMA analýzy boli porovnané amplikóny syrov s bakteriálnymi kultúrami izolovanými kultivačne z týchto syrov. Porovnaním polohy amplikónov bolo zistené, že kontaminujúcimi mohli byť Bacillus licheniformis, Staphylococcus epidermidis a Acinetobacter baumanii/calcoaceticus. Analýzou sekvencií amplikónov syrov a nálevov bola zistená, prítomnosť Bacillus sp. a ďalších mikroorganizmov radených do piatich rodov. Z nich boli vykultivovaní zástupcovia troch rodov z Preto sa predpokladá kontaminácia Bacillus sp., alebo mikroorganizmy, ktoré neboli použitými metódami kultivovateľné. Metóda je vhodná pre analýzu komplexnej mikroflóry v syroch a nálevoch po ďalšej optimalizácii.
|
|
| |
host ::
RSS.