|
|
Inihibice glukuronidace léčiv extrakty a obsahovými látkami třezalky tečkované (Hypericum perforatum) a tymiánu obecného (Thymus vulgaris)
Čejchanová, Jana ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Julius-Maximilianova Univezita Würzburg Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Institut farmacie a potravinářské chemie Katedra biochemických věd Katedra farmaceutické chemie Kandidát: Jana Čejchanová Školitel: PharmDr. Iva Boušová, PhD. PD Dr. Matthias Unger Název diplomové práce: Inhibice glukuronidace léčiv extrakty a obsahovými látkami třezalky tečkované (Hypericum perforatum) a tymiánu obecného (Thymus vulgaris) O problematice interakcí rostlinných látek s léčivy se v posledních letech díky celosvětově se zvyšující oblibě přírodních léčiv hovoří více, než kdykoli předtím. Zatímco povědomí o interakcích rostlinných léčiv s cytochromem P450 je poměrně široké, problematika jejich interakcí s enzymy UDP-glukuronosyltransferasami (UGT), jedněmi z hlavních účastníků druhé fáze metabolismu u člověka, je stále plná otázek. Tato práce je zaměřena na léčivé rostliny třezalku tečkovanou (Hypericum perforatum) a tymián obecný (Thymus vulgaris) a jejich dopad na glukuronidaci v in vitro studiích. Rostlinné extrakty byly frakcionovány pomocí vyvinuté HPLC metody. Inhibiční aktivita rostlinných extraktů, jednotlivých frakcí a vybraných obsahových látek na UGT byla studována v lidských jaterních a/nebo lidských intestinálních mikrosomech za použití modelového substrátu TFMU...
|
|
|
Účinky antioxidantů přírodního původu v modelu glykace proteinů
Švehlová, Klára ; Dršata, Jaroslav (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Účinky antioxidantů přírodního původu v modelu glykace proteinů V diplomové práci jsem se zabývala přímým a nepřímým vlivem antioxidantů přírodního původu (hydroxyskořicových kyselin) na aktivitu enzymu aspartátaminotransferázy a vztahy mezi strukturou jednotlivých kyselin a jejich účinkem. Používala jsem nový model glykace aspartátaminotransferázy methylglyoxalem, který na katedře biochemických věd FaF UK HK dosud nebyl zkoušen. Zjistila jsem vztah mezi strukturou vybraných hydroxyskořicových kyselin a jejich účinkem. Se zvyšujícím se počtem hydroxylových skupin se zvyšoval antiglykační účinek. Methylglyoxalový model glykace se osvědčil a lze jej využívat i při dalších experimentech s jinými látkami. Dále jsem pozorovala interakce mezi kyselinami a samotným enzymem pomocí absorpční a fluorescenční spektroskopie. Ze získaných spekter je patrná interakce jednotlivých kyselin s enzymem, pravděpodobně se váží pouze na jeho proteinovou část, nikoli na koenzym. Účinek všech hydroxyskořicových kyselin byl závislý na jejich koncentraci.
|
|
| |
|
|
Vliv glutamátem navozené obezity na antioxidační enzymy u myší
Duchačová, Kateřina ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Kateřina Duchačová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název diplomové práce: Vliv glutamátem navozené obezity na antioxidační enzymy u myší. Obezita je v současné době jednou z nejrozšířenějších chronických nemocí na světě. Mnoho vědeckých týmů se věnuje objasnění příčin tohoto onemocnění a také zkoumají změny v organismu, které s touto nemocí mohou souviset. Cílem této práce bylo stanovení aktivit a exprese enzymů superoxiddismutasy (SOD) a katalasy (CAT) a stanovení aktivity peroxidas (Px) v jaterním cytosolu u pokusných NMRI myší s obezitou navozenou glutamátem sodným (MSG) a u zdravých kontrol. Aktivity a exprese vybraných enzymů byly porovnávány s ohledem na patologický stav (MSG myši, osmolální kontroly a neovlivněné myši), věk (8 týdnů x 20 týdnů) a pohlaví pokusných myší. Aktivity byly stanoveny pomocí spektrofotometrických metod a polyakrylamidová gelová elektroforéza s následným imunoblottingem byla použita pro sledování proteinové exprese. Rozdíly ve specifické aktivitě SOD i CAT byly mezi jednotlivými skupinami pouze malé. Nejvýraznější změny v souvislosti s navozením obezity jsem zaznamenala v aktivitě Px. MSG myši obou pohlaví a věku měly vyšší aktivitu Px než neovlivněné myši...
|
|
|
Modulační účinek humulenu, karyofylenu a karyofylenoxidu na vybrané biotransformační enzymy v lidských jaterních buňkách
Trnčáková, Veronika ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Matoušková, Petra (oponent)
1 ABSTRAKT Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Bc. Veronika Trnčáková Školitel: doc. PharmDr. Boušová Iva, Ph.D. Název diplomové práce: Modulační účinek humulenu, karyofylenu a karyofylenoxidu na vybrané biotransformační enzymy v lidských jaterních buňkách Seskviterpeny jsou látky přírodního původu, produkované zejména vyššími rostlinami. Nachází se především v doplňcích stravy a léčivech přírodního původu. Charakteristická je pro tyto látky velká strukturní rozmanitost. Byly u nich popsány také protizánětlivé, antiparazitární a antikancerogenní účinky. Cílem této diplomové práce bylo zjistit, jaký účinek mají seskviterpeny α-humulen (HUM), β-karyofylen (KAR) a β-karyofylenoxid (CAO) na genovou a proteinovou expresi vybraných enzymů I. fáze biotransformace, kterými byly karbonylreduktasa 1 (CBR1), aldoketoreduktasa 1C (AKR1C) a několik isoforem cytochromu P450 (CYP), konkrétně CYP3A4, CYP2B6 a CYP2C. Účinek seskviterpenů na genovou a proteinovou expresi enzymů byl studován v ultratenkých lidských jaterních řezech (průměr 8 mm, tloušťka 150-180 µm). Jaterní vzorky pocházely z resekce od pěti lidí obou pohlaví a věku 58 až 69 let. Jaterní řezy byly inkubovány 24 hodin se studovanými látkami (HUM, KAR, CAO) v 10 µM koncentraci ve 12 jamkové destičce a v atmosféře...
|
|
|
Vliv monoterpenu citralu na expresi detoxikačních enzymů v HepaRG buňkách
Švábová, Tereza ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Szotáková, Barbora (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Uchazeč: Bc. Tereza Švábová Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant: Mgr. Michaela Šadibolová Název diplomové práce: Vliv monoterpenu citralu na expresi detoxikačních enzymů v HepaRG buňkách Citral je acyklický monoterpen, který je produkován především vyššími rostlinami. Je jedním z mnoha sekundárních metabolitů, které slouží rostlině jako detoxikační faktory, morforegulátory, atraktanty pro opylovače nebo obranné látky. Mimo jiné má řadu pozitivních účinků např. antibakteriální, protizánětlivé nebo protinádorové, ale při nesprávném použití může být toxický, zejména pro játra. Cílem této diplomové práce bylo zjistit účinek citralu na vybrané biotransformační a antioxidační enzymy v HepaRG buňkách. Diferencované HepaRG buňky byly inkubovány s 10 μM rifampicinem, 10 μM β-naftoflavonem, 30 μM oltiprazem, 10 μM citralem, 30 μM citralem a 100 μM citralem 12 a 24 hodin pro stanovení exprese mRNA a 24 a 48 hodin pro stanovení proteinové exprese. Na úrovni mRNA rifampicin indukoval CYP3A4 při 12 i 24hodinové inkubaci, β-naftoflavon indukoval CYP1A2 při 12 i 24hodinové inkubaci a aldo-ketoreduktasu (AKR1C) při 24hodinové inkubaci, oltipraz indukoval glutathionperoxidasu (GPX1) při 12 i 24hodinové inkubaci. Po...
|
|
|
Vascular reactivity of carotid and renal arteries to natriuretic peptides: alterations due to diabetes
Čáňová, Kristýna ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Univerzita Valencia, Farmaceutická fakulta Katedra fyziologie Kandidát: Kristýna Čáňová Školitel: Doc. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Školitel specialista: Dr. José M. Centeno Guil Název diplomové práce: Reaktivita karotid a renálních arterií na natriuretické peptidy: změny v důsledku diabetu Diabetes souvisí se zvyšující se prevalencí hypertenze, kardiovaskulních a renálních onemocnění. Atriální natriuretický peptid (ANP) a B-typ natriuretického peptidu (BNP) hrají významnou roli v kardiovaskulární patofyziologii a předpokládá se, že mají ochranný vliv na srdce a ledviny u pacientů s diabetem. Cílem této práce bylo studovat vliv atriálního a mozkového natriuretického peptidu na králičí karotidy a renální arterie a zjistit, jestli je tato reakce změněna u diabetu. Šest týdnů po navození diabetu alloxanem, byly renální arterie a karotidy vypreparovány z těla a každý segment byl vložen do lázně pro izolované orgány, kde bylo měřeno izometrické napětí. Všechny segmenty byly nejprve kontrahovány fenylefrinem a do lázně byly přidávány dávky ANP a BNP (10-12 -10-7 M), z naměřěných dat byly vytvořeny křivky závistlosti relaxace na koncentraci přidaných NP (natriuretických peptidů). Ve všech případech, natriuretické...
|
|
|
Interakce přírodních látek s molekulou HSA
Nováková, Anežka ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Dršata, Jaroslav (oponent)
Vypracovala: Anežka Nováková Místo vypracování: Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Vedoucí diplomové práce: PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Název: Interakce přírodních látek s molekulou HSA Předkládaná diplomová práce se zabývá interakcí vybraných přírodních látek (apigenin, naringenin, kaempferol) s molekulou lidského sérového albuminu. V úvodních experimentech jsem pomocí UV-VIS absorpční spektroskopie sledovala stabilitu zadaných antioxidantů za fyziologických podmínek v průběhu času. Následně jsem pomocí stejné metody zjišťovala, jaký vliv má na stabilitu rozdílná teplota uchovávání. Vlastní interakci vybraných antioxidantů s molekulou albuminu jsem sledovala pomocí UV-VIS absorpční spektroskopie a fluorescenční spektroskopie. Fluorimetrická titrace prokázala, že zmíněné antioxidanty zhášejí tryptofanovou fluorescenci v molekule lidského albuminu. Pomocí Stern-Volmerovy analýzy jsem zjistila, že v rozsahu počátečních koncentrací antioxidantů (2,5 - 10 µM), byl mechanismus zhášení fluorescence statický. Vypočítané vazebné parametry antioxidantů poskytly konkrétnější informace o jejich interakci s albuminem a odhalily vztah mezi jejich chemickou strukturou a afinitou k albuminu. Přítomnost 3-OH skupiny společně s 2,3 nenasyceným kruhem C (struktura kaempferolu)...
|
|
|
Vztah mezi stavem kompenzace a renálními funkcemi u pacientů s diabetes mellitus II. typu
Vondráčková, Helena ; Szotáková, Barbora (vedoucí práce) ; Boušová, Iva (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemických věd Kandidát: Mgr. Bc. Helena Vondráčková Školitelka: prof. Ing. Barbora Szotáková, Ph.D. Specialista konzultant: MUDr. Pavel Pick Vztah mezi stavem kompenzace a renálními funkcemi u pacientů s diabetes mellitus II. typu Diabetes mellitus je chronické onemocnění doprovázené řadou komplikací. Mezi nejčastější a současně nejzávažnější patří onemocnění ledvin, které ve svém důsledku často vede až k jejich selhání. Tito pacienti jsou pak odkázáni na doživotní dialyzační léčbu nebo případnou transplantaci ledviny. Účinnou kompenzací diabetes mellitus lze rozvoj komplikací snížit nebo alespoň oddálit. K posouzení stavu kompenzace slouží hladina glukózy v krvi měřená nalačno a po jídle a hladina glykovaného hemoglobinu. Funkce ledvin posuzujeme dle vyšetření albuminu a proteinů v moči, koncentrace kreatininu v séru a odhad glomerulární filtrace. Cílem práce bylo zjistit, zda existuje vztah mezi úrovní kompenzace diabetes mellitus a funkcí ledvin. Byla vyhodnocena data od 70 pacientů s diagnózou diabetes mellitus II. typu pravidelně kontrolovaných v diabetologické poradně. Vzorky byly zpracovány na analyzátorech - G7 a BS 480 od firmy Medesa s.r.o. K vyhodnocení dat byla použita regresní analýza. Vztah mezi úrovní kompenzace...
|
|
|
Účinek isomerů kafru na expresi biotransformačních enzymů v lidských jaterních buňkách
Ondřejová, Michaela ; Boušová, Iva (vedoucí práce) ; Ambrož, Martin (oponent)
Univerzita Karlova Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra biochemickýchvěd Kandidát: Bc. Michaela Smolíková, DiS. Školitel: doc. PharmDr. Iva Boušová, Ph.D. Konzultant:Mgr. Michaela Šadibolová Název diplomové práce: Účinek isomerů kafru na expresi biotransformačních enzymů v lidských jaterníchbuňkách Kafr je cyklický keton ze skupiny monoterpenů. V přírodě se vyskytují dva isomery kafru. V dnešní době se kafr využívá jako antiseptikum,analgetikum,rubefaciens i jakoprotizánětlivý přípravek. Kafr se užívá zejména v přípravcích pro lokální užití, kde působí mírným znecitlivujícím účinkem a pocitem tepla spolu s jeho charakteristicky pronikavou svěží vůní. Většina intoxikací kafrem je vyvolána nesprávným použitím či dávkováním.Cílem diplomové práce bylo zjistit účinekisomerů(+)-kafru a (-)-kafruna expresi vybraných enzymů I. i II. fáze biotransformace.Biologickýmmateriálembylyultratenké lidské jaterní řezypřipravené z tkáně celkem tří pacientů, dvou mužů a jedné ženy ve věkovém rozmezí 46 - 49 let. Jaterní řezy byly inkubovány s 10 µM a 50 µM (+)-kafrem a (-)-kafrem 24 hodin při 37řC. Proteinová exprese enzymů I. fáze (cytochromu P450 (CYP) 3A4, CYP2C, aldo-ketoreduktasy (AKR) 1C3) a II. fáze (glutathion-S-transferasy (GST) A) byla stanovena metodou western blotingu. Exprese mRNA enzymů I. fáze...
|
host ::
RSS.